一種柳蘭的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種柳蘭誘變育種的快速繁殖方法，包括無菌外植體的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的誘變育種、愈傷組織的分化、生根誘導(dǎo)等步驟，本發(fā)明方法所制備的柳蘭可以提高突變頻率，得到豐富的變異體，增加選擇機(jī)會(huì)，縮短育種周期，為選育新品種提供豐富的材料。
【專利說明】 一種柳蘭的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及柳蘭誘變育種的快繁方法，屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]熱生，Epilobium angustifolium Linn.柳葉菜科，多年生草本，高約I一 1.3米。莖直立，通常不分枝。葉互生，披針形，總狀花序頂生，伸長，花序軸被短柔毛，苞片線形，長I—2厘米，花大，兩性，紅紫色。根、莖、葉、花、果均含鞣質(zhì)，分布于我國西南、西北、華北至東北；北溫帶廣布，北美洲、歐洲至日本，自然生于海拔較高的林緣、林間、山坡草地、河岸草叢及火燒或采伐跡地。耐寒。喜涼爽、濕潤氣候及濕潤、肥沃、排水良好的土壤。稍耐陰。畏炎熱、干旱的環(huán)境。柳蘭全草70%丙酮提取物中分得9個(gè)鞣質(zhì)類及其他酚性化合物，分別鑒定為3-氧-沒食子?；?D-葡萄糖、I，6- 二-氧-沒食子?；?β -D-吡喃型葡萄糖、1-氧-沒食子酰基_4，6-六羥基聯(lián)苯甲?；?β -D-吡喃型葡萄糖、水楊梅丁素、英國櫟鞣花酸、特里馬素、蝦子花素、綠原酸、沒食子酸。根狀莖或全草入藥，有小毒，能調(diào)經(jīng)活血、消腫止痛，主治月經(jīng)不調(diào)、骨折、關(guān)節(jié)扭傷。柳蘭繁殖采用種子繁殖，也可分株和扦插繁殖，誘變育種可以提高突變頻率，得到豐富的變異體，增加選擇機(jī)會(huì)，縮短育種周期，為選育新品種提供豐富的材料。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供柳蘭誘變育種的快速繁殖方法，提高突變頻率，得到豐富的變異體，增加選擇機(jī)會(huì)，縮短育種周期，為選育新品種提供豐富的材料。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案:
取柳蘭花瓣，在流水沖洗3min，表面無污垢，超凈工作臺(tái)上次氯酸鈉處理4min，無菌水沖洗5遍，吸水紙吸去表面水分，滅菌處理過的柳蘭花瓣接入培養(yǎng)基配方為B5+NAAlmg/L+IBA2mg/L+50mg/LVC誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗室培養(yǎng)，溫度25°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織做6tlCo-Y射線10_30Gy處理，加入分化培養(yǎng)基B5+NAA0.1-0.2mg/L+6-BAl-2mg/L中誘導(dǎo)分化，獲得新品種植株。
[0005]采用本發(fā)明制備的柳蘭新品種植株，生長速度快，藥用次生代謝物含量高，能耗少，污染小。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
取柳蘭花瓣，在流水沖洗3min，表面無污垢，超凈工作臺(tái)上次氯酸鈉處理4min，無菌水沖洗5遍，吸水紙吸去表面水分，滅菌處理過的柳蘭花瓣接入培養(yǎng)基配方為B5+NAAlmg/L+IBA2mg/L+50mg/LVC誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗室培養(yǎng)，溫度25°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織做6tlCo- Y射線1Gy處理，加入分化培養(yǎng)基Β5+ΝΑΑ0.lmg/L+6-BAlmg/L中誘導(dǎo)分化，獲得新品種植株，誘變率75%。
[0008]實(shí)施例2
取柳蘭花瓣，在流水沖洗3min，表面無污垢，超凈工作臺(tái)上次氯酸鈉處理4min，無菌水沖洗5遍，吸水紙吸去表面水分，滅菌處理過的柳蘭花瓣接入培養(yǎng)基配方為B5+NAAlmg/L+IBA2mg/L+50mg/LVC誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗室培養(yǎng)，溫度25°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織做6tlCo- Y射線30Gy處理，加入分化培養(yǎng)基B5+NAA0.2mg/L+6-BA2mg/L中誘導(dǎo)分化，獲得新品種植株，誘變率77%。
[0009]實(shí)施例3
取柳蘭花瓣，在流水沖洗3min，表面無污垢，超凈工作臺(tái)上次氯酸鈉處理4min，無菌水沖洗5遍，吸水紙吸去表面水分，滅菌處理過的柳蘭花瓣接入培養(yǎng)基配方為B5+NAAlmg/L+IBA2mg/L+50mg/LVC誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗室培養(yǎng)，溫度25°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織做6tlCo- Y射線20Gy處理，加入分化培養(yǎng)基B5+NAA0.lmg/L+6-BA2mg/L中誘導(dǎo)分化，獲得新品種植株，誘變率79%。
【權(quán)利要求】
1.一種柳蘭誘變育種的快速繁殖方法，包括無菌外植體的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的誘變育種、生根誘導(dǎo)，其主要步驟如下: (1)取柳蘭的花瓣芽，在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行消毒處理； (2)取步驟(I)滅菌處理過的柳蘭花瓣接入培養(yǎng)基配方為B5+NAAlmg/L+IBA2mg/L+50mg/LVC誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.8，暗室培養(yǎng)，溫度25 °C ； (3)取步驟(2)誘導(dǎo)出來的愈傷組織做6ciCo-Y射線10-30Gy處理； (4)取步驟(3)誘導(dǎo)出來的愈傷組織加入分化培養(yǎng)基Β5+ΝΑΑ0.1-0.2mg/L+6-BAl-2mg/L中誘導(dǎo)分化。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種柳蘭誘變育種的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述誘導(dǎo)愈傷組織的外植體選擇為柳蘭的花瓣，花瓣是誘導(dǎo)愈傷組織的好材料。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種柳蘭誘變育種的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)柳蘭無菌花瓣的獲得為，取柳蘭花瓣，在流水沖洗3min，表面無污垢，超凈工作臺(tái)上次氯酸鈉處理4min,無菌水沖洗5遍,吸水紙吸去表面水分。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種柳蘭誘變育種的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(3)誘變育種選擇6tlCo- Y射線能促進(jìn)染色體結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著變化，花期株型和花色，葉綠素含量、光合速率和次生代謝物含量等指標(biāo)均發(fā)生了變化。
【文檔編號】A01H1/06GK104255447SQ201410463157
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司