一種杠柳的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種杠柳的快速繁殖方法，包括外植體的消毒、腋芽的誘導(dǎo)、叢生芽的增殖、生根誘導(dǎo)和煉苗移栽、多效唑的調(diào)控。本發(fā)明的杠柳組培方法操作簡便易行，增殖系數(shù)及繁殖率高，生長速度快，有效成份含量高，可以短期內(nèi)獲得大量的杠柳幼苗，有助于杠柳種質(zhì)資源的大規(guī)模開發(fā)和利用。
【專利說明】 一種杠柳的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及組培條件下杠柳的培養(yǎng)，屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]杠柳，Periploca灌木,蘿摩科,又叫羊奶子、北五加皮、羊角桃、羊桃等。其特性為陽性，耐寒，耐旱，耐瘠薄，喜光，耐蔭，對土壤適應(yīng)性強(qiáng)。根系分布較深，常叢生。主要分布在西北、東北、華北地區(qū)及河南、四川、江蘇等省區(qū)。具有廣泛的適應(yīng)性，是優(yōu)良的固沙、水土保持樹種。根皮入中藥。莖枝入蒙藥，莖皮和根皮含十余種甙類化合物，已知結(jié)構(gòu)的有強(qiáng)心甙杠柳毒甙，皂甙杠柳甙K，Η、Ε、α 一香樹酯醇，β 一香樹酯醇，α 一香樹酯醇乙酸酯，β —香樹酯醇乙酸酯，4 一甲氧基水楊醛，β —谷留醇及其葡萄糖甙等。主治:風(fēng)濕痹痛，腰膝酸軟，心悸，氣短，腳腫，小便不利，祛風(fēng)濕，強(qiáng)筋骨，用于風(fēng)寒濕痹，腰膝酸軟，心悸氣短，下肢浮腫。目前杠柳主要是野外繁殖，尚無進(jìn)行人工引種，栽培。組培方法可以快速對杠柳進(jìn)行繁殖，使其得到廣泛推廣與應(yīng)用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供杠柳的快速繁殖方法，并采用多效唑?qū)ζ渖L進(jìn)行調(diào)控，增殖率高，生長速度快，遺傳性狀穩(wěn)定，操作簡單易控，可以獲得大量杠柳幼苗，有利于杠柳資源的開發(fā)。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案:
取杠柳帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗Ih，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理13min，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的杠柳帶芽莖段接入改良ffhite+P-CPA0.5mg/L+6-BAl.5mg/L+5mg/L廣大霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6-7g/L，PH5.8-5.9，光照30001x，溫度24°C，生長出來的杠柳腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良ffhite+IAA0.2mg/L+ABAl.5mg/L+KTlmg/L 附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6_7g/L，PH5.8-5.9，光照40001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基3/4MS+NAA0.3mg/L,附加蔗糖25g/L，瓊脂
5-6g/L，PH5.8-5.9，光照80001x，生根后的杠柳試管苗將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，0.2%多菌靈浸根lOmin，栽植于珍珠巖:泥炭=2:1的基質(zhì)中培養(yǎng)，并噴施30mg/LPP333,培養(yǎng)20天后，統(tǒng)計(jì)成活率。
[0005]采用本發(fā)明制備的杠柳生長速度快，操作簡單，成活率達(dá)94%，能耗小，污染小。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
取杠柳帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗Ih，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理13min，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的杠柳帶芽莖段接入改良ffhite+P-CPA0.5mg/L+6-BAl.5mg/L+5mg/L廣大霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6-7g/L，PH5.8-5.9，光照30001x，溫度24°C，生長出來的杠柳腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良ffhite+IAA0.lmg/L+ABAl.5mg/L+KT0.5mg/L 附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6_7g/L，PH5.8-5.9，光照40001x，增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基3/4MS+NAA0.3mg/L,附加蔗糖25g/L，瓊脂
5-6g/L，PH5.8-5.9，光照80001x，生根后的杠柳試管苗將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，0.2%多菌靈浸根lOmin，栽植于珍珠巖:泥炭=2:1的基質(zhì)中培養(yǎng)，并噴施1mg/LPP333,培養(yǎng)20天后，成活率達(dá)90%。
[0008]實(shí)施例2
取杠柳帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗Ih，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理13min，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的杠柳帶芽莖段接入改良ffhite+P-CPA0.5mg/L+6-BAl.5mg/L+5mg/L廣大霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂
6-7g/L，PH5.8-5.9，光照30001x，溫度24°C，生長出來的杠柳腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良ffhite+IAA0.3mg/L+ABAl.5mg/L+KTl.5mg/L 附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6_7g/L，PH5.8-5.9，光照40001x,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基3/4MS+NAA0.3mg/L,附加蔗糖25g/L，瓊脂
5-6g/L，PH5.8-5.9，光照80001x，生根后的杠柳試管苗將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，0.2%多菌靈浸根lOmin，栽植于珍珠巖:泥炭=2:1的基質(zhì)中培養(yǎng)，并噴施30mg/LPP333，培養(yǎng)20天后，成活率達(dá)91%。
[0009]實(shí)施例3
取杠柳帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗Ih，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理13min，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的杠柳帶芽莖段接入改良ffhite+P-CPA0.5mg/L+6-BAl.5mg/L+5mg/L廣大霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂
6-7g/L，PH5.8-5.9，光照30001x，溫度24°C，生長出來的杠柳腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良ffhite+IAA0.2mg/L+ABAl.5mg/L+KTl.5mg/L 附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6_7g/L，PH5.8-5.9，光照40001x,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基3/4MS+NAA0.3mg/L,附加蔗糖25g/L，瓊脂
5-6g/L，PH5.8-5.9，光照80001x，生根后的杠柳試管苗將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，0.2%多菌靈浸根lOmin，栽植于珍珠巖:泥炭=2:1的基質(zhì)中培養(yǎng)，并噴施20mg/LPP333,培養(yǎng)20天后，成活率達(dá)92%。
[0010]實(shí)施例4
取杠柳帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗Ih，超凈工作臺上75%酒精處理30s，氯化汞處理13min，無菌水沖洗5_7遍，滅菌處理過的杠柳帶芽莖段接入改良ffhite+P-CPA0.5mg/L+6-BAl.5mg/L+5mg/L廣大霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂
6-7g/L，PH5.8-5.9，光照30001x，溫度24°C，生長出來的杠柳腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良ffhite+IAA0.2mg/L+ABAl.5mg/L+KT0.5mg/L 附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6_7g/L，PH5.8-5.9，光照40001x,增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基3/4MS+NAA0.3mg/L,附加蔗糖25g/L，瓊脂5-6g/L，PH5.8-5.9，光照80001x，生根后的杠柳試管苗將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，0.2%多菌靈浸根lOmin，栽植于珍珠巖:泥炭=2:1的基質(zhì)中培養(yǎng)，并噴施30mg/LPP333,培養(yǎng)20天后，成活率達(dá)93%。
【權(quán)利要求】
1.一種杠柳的快速繁殖方法，包括腋芽的消毒、叢生芽的誘導(dǎo)、叢生芽的增殖、生根誘導(dǎo)和煉苗移栽、多效唑的調(diào)控，其主要步驟如下: (1)取杠柳帶腋芽的莖段，對其進(jìn)行常規(guī)消毒處理； (2)將步驟(I)滅菌處理過的杠柳帶芽莖段接入改良White+P-CPA0.5mg/L+6-BA1.5mg/L+5mg/L廣大霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)，附加蔗糖30g/L，瓊脂6_7g/L，PH5.8-5.9，光照30001x，溫度240C ； (3)取步驟(2)生長出來的杠柳腋芽，放入增殖培養(yǎng)基改良White+IAA0.1-0.3mg/L+ABA1.5mg/L+KT0.5-1.5mg/L 附加蔗糖 30g/L，瓊脂 6_7g/L，PH5.8-5.9，光照 40001x ； (4)取步驟(3)增殖培養(yǎng)出來的叢生芽放入生根培養(yǎng)基3/4MS+NAA0.3mg/L,附加蔗糖25g/L，瓊脂 5-6g/L, PH5.8-5.9，光照 80001x ； (5)取步驟(4)生根后的杠柳試管苗移栽到大田進(jìn)行煉苗培養(yǎng)，并噴施10-30mg/LPP333，調(diào)控其生長。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種杠柳的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述杠柳帶芽莖段的滅菌處理為:取杠柳帶芽莖段，在漂白粉中浸泡3min，流水沖洗lh，超凈工作臺上75%酒精處理30s,氯化萊處理13min,無菌水沖洗5_7遍。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種杠柳的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(2)腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)中附加了廣大霉素5mg/L，用來消除內(nèi)生菌，且采用過濾滅菌。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種杠柳的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(3)中的增殖培養(yǎng)基中附加了 ABA，可以促進(jìn)不定芽的分化。
5.按照權(quán)利要求1所述的一種杠柳的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(5)中加入了10-30mg/LPP333，PP333可以促進(jìn)植物的伸長生長，且采用葉面噴施。
6.按照權(quán)利要求1所述的一種杠柳的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(5)中杠柳的煉苗培養(yǎng)方法為將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗去根部的培養(yǎng)基，0.2%多菌靈浸根lOmin，栽植于珍珠巖:泥炭=2:1的基質(zhì)中培養(yǎng)，培養(yǎng)20天后，統(tǒng)計(jì)成活率。
【文檔編號】A01H4/00GK104255479SQ201410463237
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司