一枝黃花脫毒培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種一枝黃花脫毒培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括一枝黃花莖尖的獲得、愈傷組織的誘導、愈傷組織的分化、生根培養(yǎng)、煉苗移栽等步驟，本發(fā)明方法所制備的一枝黃花生產周期短，成活率高且完全無病毒，可以進行大規(guī)模種植和開發(fā)。
【專利說明】一枝黃花脫毒培養(yǎng)的快速繁殖方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一枝黃花脫毒培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物【技術領域】。

【背景技術】
[0002]—枝黃花,菊科,別稱野黃菊、山邊半枝香、酒金花、滿山黃、等，是一個多型性的種，葉形與花序式有極大變化。花期8-10月，果期10-12月。生于海拔565-2850米的山坡、闊葉林緣、林下、路旁及草叢之中。原產北美，上世紀30年代中期(1935年)作為觀賞植物引入上海、南京等地后逸生為惡性雜草，成為入侵植物。喜光，喜涼爽干燥的環(huán)境，耐寒，耐熱，耐瘠薄，肥力過大容易倒伏。在各類土壤中均能生長。稍能耐短期積水。對環(huán)境適應性強，宜栽種于肥沃疏松富含腐殖質排水良好的砂質土壤中。全草含槲皮苷、異斛皮苷、蕓香甙、紫云英苷、山柰酚-3-蕓香糖甙、一枝黃花酚甙、2，6_ 二甲氧基苯甲酸芐酯、當歸酸-3，5-二甲氧基-4-乙酰氧基肉桂酯及2-順、8-順-母菊酯?？Х人?、奎尼酸、綠元酸、矢車菊雙苷。含少量揮發(fā)油及皂苷、煙酸、乙醇酸，根含揮發(fā)油?？刹捎梅N子、分株等方法繁殖。全草入藥，性味辛、苦，微溫，功能主治:疏風清熱，抗菌消炎。用于風熱感冒；頭痛；咽喉腫痛；肺熱咳嗽；黃疸；泄瀉；熱淋；癰腫瘡癤；毒蛇咬傷，目前主要是自然繁殖，利用組培技術生產周期短，成活率高且完全無病毒，可以進行大規(guī)模種植和開發(fā)。


【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種一枝黃花的快速繁殖方法，由該方法所制備的一枝黃花生產周期短，成活率高且完全無病毒，可以進行大規(guī)模種植和開發(fā)。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的:
取一枝黃花幼嫩的莖尖，流水沖洗30min，超凈工作臺上75%的酒精處理30s，0.1%的升汞處理llmin，無菌水沖洗5次，放在吸水紙上吸干，解剖針剝去外層苞片，用解剖刀切取頂端2cm，消毒處理過的一枝黃花幼嫩莖尖接入MS+6-BA0.lmg/L+NAA0.lmg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖40g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.83，暗室培養(yǎng)，溫度23±2°C，濕度65%，誘導出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基MS+6-BA0.2-0.3mg/L+NAA0.1-0.2mg/L進行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖50g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.83，光照35001x，溫度25±2°C，已生根的瓶苗從培養(yǎng)室內取出，掀開封口膜，放置室溫，加入少量水以保證苗木不失水，煉苗4天后取出，洗去根部培養(yǎng)基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到裝有黃心土的基質中，基質使用高壓裝置滅菌30min，溫度控制在25°C，進行間歇補水，40天后統(tǒng)計成活率。
[0005]采用本發(fā)明制備的一枝黃花分化成活率高，周期短，產量大，污染小，利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

【具體實施方式】
[0007]實施例1
取一枝黃花幼嫩的莖尖，流水沖洗30min，超凈工作臺上75%的酒精處理30s，0.1%的升汞處理llmin，無菌水沖洗5次，放在吸水紙上吸干，解剖針剝去外層苞片，用解剖刀切取頂端2cm，消毒處理過的一枝黃花幼嫩莖尖接入MS+6-BA0.lmg/L+NAA0.lmg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖40g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.83，暗室培養(yǎng)，溫度23±2°C，濕度65%，誘導出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.lmg/L進行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖50g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.83，光照35001x，溫度25±2°C，已生根的瓶苗從培養(yǎng)室內取出，掀開封口膜，放置室溫，加入少量水以保證苗木不失水，煉苗4天后取出，洗去根部培養(yǎng)基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到裝有黃心土的基質中，基質使用高壓裝置滅菌30min，溫度控制在25°C，進行間歇補水，40天后統(tǒng)計成活率，成活率90%。
[0008]實施例2
取一枝黃花幼嫩的莖尖，流水沖洗30min，超凈工作臺上75%的酒精處理30s，0.1%的升汞處理llmin，無菌水沖洗5次，放在吸水紙上吸干，解剖針剝去外層苞片，用解剖刀切取頂端2cm，消毒處理過的一枝黃花幼嫩莖尖接入MS+6-BA0.lmg/L+NAA0.lmg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖40g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.83，暗室培養(yǎng)，溫度23±2°C，濕度65%，誘導出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.2mg/L進行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖50g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.83，光照35001x，溫度25±2°C，已生根的瓶苗從培養(yǎng)室內取出，掀開封口膜，放置室溫，加入少量水以保證苗木不失水，煉苗4天后取出，洗去根部培養(yǎng)基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到裝有黃心土的基質中，基質使用高壓裝置滅菌30min，溫度控制在25°C，進行間歇補水，40天后統(tǒng)計成活率，成活率89%。
[0009]實施例3
取一枝黃花幼嫩的莖尖，流水沖洗30min，超凈工作臺上75%的酒精處理30s，0.1%的升汞處理llmin，無菌水沖洗5次，放在吸水紙上吸干，解剖針剝去外層苞片，用解剖刀切取頂端2cm，消毒處理過的一枝黃花幼嫩莖尖接入MS+6-BA0.lmg/L+NAA0.lmg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖40g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.83，暗室培養(yǎng)，溫度23±2°C，濕度65%，誘導出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L進行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖50g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.83，光照35001x，溫度25±2°C，已生根的瓶苗從培養(yǎng)室內取出，掀開封口膜，放置室溫，加入少量水以保證苗木不失水，煉苗4天后取出，洗去根部培養(yǎng)基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到裝有黃心土的基質中，基質使用高壓裝置滅菌30min，溫度控制在25°C，進行間歇補水，40天后統(tǒng)計成活率，成活率87%。
【權利要求】
1.一種一枝黃花脫毒培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括一枝黃花莖尖的獲得、愈傷組織的誘導、愈傷組織的分化、生根培養(yǎng)、煉苗移栽，其主要步驟如下: (O取一枝黃花幼嫩的莖尖，對其進行消毒處理； (2)取步驟(I)消毒處理過的一枝黃花幼嫩莖尖接入MS+6-BA0.lmg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導，附加蔗糖40g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.83，暗室培養(yǎng)，溫度23±2°C，濕度 65% ； (3)取步驟(2)誘導出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基MS+6-BA0.2-0.3mg/L+NAA0.1-0.2mg/L進行愈傷組織分化培養(yǎng)，附加蔗糖50g/L，瓊脂6.5g/L，pH5.83，光照35001x，溫度25±2°C ； (4)取步驟(3)分化出來的叢生芽接入1/3MS培養(yǎng)基中進行生根誘導，附加蔗糖20g/L，瓊脂 5g/L，ρΗ5.7，光照 160001χ，溫度 25±2°C ； (5)取步驟(4)生根的試管苗進行煉苗移栽。
2.按照權利要求1所述的一種一枝黃花脫毒培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述一枝黃花無菌莖尖的獲得為，取一枝黃花幼嫩的莖尖，流水沖洗30min，超凈工作臺上75%的酒精處理30s，0.1%的升汞處理llmin，無菌水沖洗5次，放在吸水紙上吸干，解剖針剝去外層苞片，用解剖刀切取頂端2cm。
3.按照權利要求1所述的一種一枝黃花脫毒培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(5)中一枝黃花的煉苗培養(yǎng)方法為已生根的瓶苗從培養(yǎng)室內取出，掀開封口膜，放置室溫，加入少量水以保證苗木不失水，煉苗4天后取出，洗去根部培養(yǎng)基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到裝有黃心土的基質中，基質使用高壓裝置滅菌30min，溫度控制在25°C，進行間歇補水，40天后統(tǒng)計成活率。
【文檔編號】A01H4/00GK104170749SQ201410463357
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年9月12日 優(yōu)先權日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請人:南京通澤農業(yè)科技有限公司