一種楤木的種苗快速繁殖的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種楤木的種苗快速繁殖的方法，涉及一種生物技術(shù)應用領(lǐng)域，具體方法如下：第一步是取楤木的頂端休眠芽為外植體，先用自來水沖洗干凈，再用70％酒精浸泡，再放入0.1％升汞的溶液中消毒，最后用無菌水沖洗干凈；第二步是將消毒好的外植體切成0.5～1cm的小塊，接種在準備好的誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：光強1500～20001x，溫度(25±1℃)，12h光照，待分化出不定芽；第三步是將誘導出的不定芽轉(zhuǎn)接到繼代培養(yǎng)基上進行增殖培養(yǎng)，使芽苗長得更加健壯；第四步是將分化的不定芽接種到生根培養(yǎng)基中，待有不定根生出即可準備移栽，移栽后成活率可達80％以上。本發(fā)明方法簡單易行，操作簡單，且繁殖速度快，適合工廠化育苗。
【專利說明】一種锪木的種苗快速繁殖的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
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[0001]本發(fā)明涉及一種生物技術(shù)應用領(lǐng)域，是一種利用植物組織離體培養(yǎng)技術(shù)，用于一種惚木的種苗快速繁殖的方法。

【背景技術(shù)】
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[0002]惚木別鳥不宿、百鳥不棲、刺桐，為五加科落葉灌木獲小喬木。小枝疏生細刺，被黃絨毛。2?3回羽狀復葉互生；羽片有小葉5?13枚，基部有小葉一對；小葉片卵形、寬卵形或卵狀橢圓形，先端漸尖或短漸尖，基部圓形或近心形緣具細鋸齒。傘形花序再組成頂生大型圓錐花序，主軸長30cm以上，一級分枝在主軸上總狀排列，花梗明顯，花白色；果球形，具5棱，熟時黑色或紫黑色。花期6-8月，果期9-10月。產(chǎn)于全國各地，生于向陽坡、溝谷中、林緣或路邊曠地，灌叢中。我國華北、華中、華東、華南、西南等地均有分布。惚木具有食用和藥用價值，富含蛋白質(zhì)、脂肪、還原糖、維生素及15種氨基酸和多種礦物質(zhì)；有滋陰潤燥、補中益氣、祛風濕、散瘀結(jié)、消腫毒、健胃、活血等功效。
[0003]近年來，受生態(tài)環(huán)境的變化和市場需求增加等因素的影響，現(xiàn)有的野生惚木的資源存量正在迅速減少，已引起人們的普遍關(guān)注。惚木自然繁殖率較低，再生能力差。惚木雖能開花結(jié)籽，可以進行有性繁殖，但種子繁殖變異率較大，商品性降低，且繁殖率很低。生產(chǎn)上主要采用無性繁殖，枝條或根段進行扦插繁殖，但往往造成資源的浪費與植被的破壞，且扦插育苗成活率低，成本高。


【發(fā)明內(nèi)容】

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[0004]本發(fā)明的目的就是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，而提供一種惚木的種苗快速繁殖的方法。本發(fā)明具有簡單易行，操作簡單，且繁殖速度快，適合工廠化育苗的優(yōu)點。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)解決措施如下:
[0006]一種惚木的種苗快速繁殖的方法，其特征在于，包括如下步驟:(I)小塊莖尖的備用；(2)外植體誘導和繼代培養(yǎng)；(3)芽苗接種生根培養(yǎng)基。
[0007]所述小塊莖尖備用的方法為:于2?3月取惚木的頂端的休眠芽為外植體，先將嫩枝芽水洗干凈后，先用70%乙醇浸泡30s?Imin,再用0.1 %升萊消毒5?1min,用無菌水沖洗4?5次，用無菌干濾紙吸去殘留水分，在超凈工作臺上用無菌解剖刀剝?nèi)デo尖外面的芽鱗片，并切成0.5?Icm的小塊備用。
[0008]所述外植體誘導和繼代培養(yǎng)的方法為:將上述的外植體接種到附加(1.0?2.0)mg/L 6-BA、(0.01 ?0.l)mg/L NAA,O ?0.5mg/L IBA,O ?0.5mg/L 2-4D 的 MS 培養(yǎng)基上進行誘導、分化和繼代培養(yǎng)基，四周左右就可以形成不定芽，待苗長到2?3cm時，將苗分成單株，轉(zhuǎn)接到培增殖培養(yǎng)基上；蔗糖的質(zhì)量分數(shù)為30克每升，瓊脂的質(zhì)量分數(shù)為7克每升，pH 為 5.8。
[0009]所述芽苗接種生根培養(yǎng)基的方法為:將誘導出的芽苗接種到附加(O?0.5)mg/L6-BA、(O ?0.5) mg/L IBA、(O ?0.5) mg/L NAA、(O ?0.5)mg/LIBM、(O ?3g/L)活性炭的1/2MS的生根培養(yǎng)基上，一個月可分化出I?3條粗壯的不定根，即可移栽。
[0010]所述培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件為:光強1500?20001x，溫度(25±1°C )，12h光照；各階段的培養(yǎng)基附加物質(zhì)，不同濃度的6-BA、IBA、NAA、2-4D、IBM組合，形成一套快繁體系，同時在生根培養(yǎng)基中加入了 IBM和活性炭物質(zhì)。

【具體實施方式】
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[0011]以下結(jié)合具體實施例來對本發(fā)明作進一步的描述，但本發(fā)明所要求保護的范圍并不局限于實施方式所涉及之范圍。
[0012]實例1:
[0013]將惚木的休眠芽水洗干凈后，先用70%乙醇浸泡lmin，再用0.1%升汞消毒5min，用無菌水沖凈外植體表面，在超凈工作臺上用無菌解剖刀將莖尖切成厚度0.5?Icm左右的小塊，置于培養(yǎng)基MS+1.5mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA上進行培養(yǎng)，再將誘導出的不定芽接種在1/2MS+0.5mg/L IBA+0.01mg/L NAA的生根培養(yǎng)基上，經(jīng)過4周左右，會長出I?3條左右的新根，即可移栽。
[0014]實例2:
[0015]將惚木的嫩枝芽水洗干凈后，先用70%乙醇浸泡lmin，再用0.1%升汞消毒8min，用無菌水沖凈外植體表面，在超凈工作臺上用無菌解剖刀將莖尖切成厚度0.5?Icm左右的小塊，置于培養(yǎng)基MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L IBA上進行培養(yǎng)，再將誘導的不定芽接種在1/2MS+0.5mg/L IBM+0.2mg/L NAA+2g/L活性炭的生根培養(yǎng)基上進行生根，經(jīng)過4周左右，幼苗會長出I?3條左右的新根，即可移栽。
[0016]實例3:
[0017]將惚木的嫩芽水洗干凈后,先用70%乙醇浸泡30s,再用0.1%升萊消毒1min,用無菌水沖凈外植體表面，在超凈工作臺上用無菌解剖刀將莖尖切成厚度0.5?Icm左右的小塊，置于培養(yǎng)基MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2-4D上進行培養(yǎng)，再將誘導的不定芽接種在1/2MS+0.2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的生根培養(yǎng)基上進行生根，經(jīng)過一個月左右，幼苗會長出I?3條左右的新根，即可移栽。
[0018]實例4:
[0019]將惚木的嫩芽水洗干凈后,先用70%乙醇浸泡30s,再用0.1%升萊消毒7min,用無菌水沖凈外植體表面，在超凈工作臺上用無菌解剖刀將莖尖切成厚度0.5?Icm左右的小塊，置于培養(yǎng)基MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L IBA+0.2mg/L 2_4D上進行培養(yǎng)，再將誘導的不定芽接種在1/2MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的生根培養(yǎng)基上進行生根，經(jīng)過一個月左右，幼苗會長出I?3條左右的新根，即可移栽。
【權(quán)利要求】
1.一種惚木的種苗快速繁殖的方法，其特征在于，包括如下步驟:(1)小塊莖尖的備用；(2)外植體誘導和繼代培養(yǎng)；(3)芽苗接種生根培養(yǎng)基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種惚木的種苗快速繁殖的方法，其特征在于:所述小塊莖尖備用的方法為:于2?3月取惚木的頂端的休眠芽為外植體，先將嫩枝芽水洗干凈后，先用70%乙醇浸泡30s?Imin,再用0.1 %升萊消毒5?1min,用無菌水沖洗4?5次,用無菌干濾紙吸去殘留水分，在超凈工作臺上用無菌解剖刀剝?nèi)デo尖外面的芽鱗片，并切成0.5?Icm的小塊備用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種惚木的種苗快速繁殖的方法，其特征在于:所述外植體誘導和繼代培養(yǎng)的方法為:將上述的外植體接種到附加(1.0?2.0)mg/L 6-BA、(0.01?0.l)mg/L NAA,O?0.5mg/L IBA,O?0.5mg/L 2-4D的MS培養(yǎng)基上進行誘導、分化和繼代培養(yǎng)基，四周左右就可以形成不定芽，待苗長到2?3cm時，將苗分成單株，轉(zhuǎn)接到培增殖培養(yǎng)基上；蔗糖的質(zhì)量分數(shù)為30克每升，瓊脂的質(zhì)量分數(shù)為7克每升，pH為5.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種惚木的種苗快速繁殖的方法，其特征在于:所述芽苗接種生根培養(yǎng)基的方法為:將誘導出的芽苗接種到附加(O?0.5)mg/L6-BA、(O?0.5)mg/LIBA、(O ?0.5)mg/L NAA、(O ?0.5)mg/L IBM、(O ?3g/L)活性炭的 1/2MS 的生根培養(yǎng)基上，一個月可分化出I?3條粗壯的不定根，即可移栽。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的一種惚木的種苗快速繁殖的方法，其特征在于:所述培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件為:光強1500?20001x，溫度(25±1°C )，12h光照；各階段的培養(yǎng)基附加物質(zhì)，不同濃度的6-BA、IBA、NAA、2-4D、IBM組合，形成一套快繁體系，同時在生根培養(yǎng)基中加入了 IBM和活性炭物質(zhì)。
【文檔編號】A01H4/00GK104255498SQ201410505669
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月28日
【發(fā)明者】陳麗萍, 魚南洋, 張志友, 韓明麗, 趙根, 李艷冬, 譚宏, 胡亮 申請人:湖州市農(nóng)業(yè)科學研究院