一種微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法
【專利摘要】一種微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法，包括以下步驟：取杉木組培叢生苗進(jìn)行繼代增殖壯苗培養(yǎng)，得到一種不定芽：將不定芽移至塑料大棚中進(jìn)行煉苗，得到一種無根苗，將無根苗進(jìn)行前處理、前處理后的無根苗浸泡在生根劑溶液，再移栽至育苗袋中，扦插后的管理，誘導(dǎo)生根，即可培育出杉木無性繁殖苗木。本發(fā)明不僅可以縮短成苗時(shí)間，提高苗木健壯程度，還降低了生產(chǎn)成本，便于杉木優(yōu)良無性系苗木的大量生產(chǎn)，是一種經(jīng)濟(jì)實(shí)用且高效的杉木苗木生產(chǎn)技術(shù)。
【專利說明】一種微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種植株再生【技術(shù)領(lǐng)域】的微扦插移植方法，特別是一種微扦插快速生 產(chǎn)杉木苗的方法，屬于植物生物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 杉木是我國(guó)特有的鄉(xiāng)土樹種，是長(zhǎng)江以南地區(qū)最重要的商品用材樹種之一，其以 生長(zhǎng)快、產(chǎn)量高、材質(zhì)好、用途廣等優(yōu)點(diǎn)，在貴州、湖南、廣西、廣東、福建、江西等省份廣泛栽 培。廣西作為杉木的中心產(chǎn)區(qū)之一，具備良好的種源貯備，但其栽培方式以種子繁殖的實(shí)生 苗造林為主，因氣候等因素的影響，杉木種子園的產(chǎn)量波動(dòng)比較大，往往面臨種子缺乏、發(fā) 芽率偏低等困難，并且實(shí)生苗變異大，母株優(yōu)良性狀得不到保持，不利于發(fā)揮林分的最佳生 產(chǎn)力。
[0003] 杉木優(yōu)良無性系組培快繁技術(shù)不但使苗木具有遺傳品質(zhì)穩(wěn)定、增產(chǎn)效益顯著的優(yōu) 勢(shì)，而且可以快速提高良種壯苗產(chǎn)量，為杉木產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展提供重要保障。目前對(duì)杉木組 培苗瓶?jī)?nèi)生根有一些報(bào)道，但在杉木組培苗產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)過程中，瓶?jī)?nèi)生根方式尚存在較多 的問題，如生根耗時(shí)長(zhǎng)、生根率低、生根質(zhì)量差等問題，而且生產(chǎn)成本高、育苗周期長(zhǎng)、占用 室內(nèi)空間，杉木組培生根一直是杉木實(shí)行工廠化育苗、商業(yè)化經(jīng)營(yíng)的制約因素。而組培苗微 扦插技術(shù)集減少育苗步驟、縮短周期、移栽、適應(yīng)環(huán)境為一體，可以克服以上不足，又有效地 節(jié)約生產(chǎn)成本。采用微扦插技術(shù)對(duì)組培苗生根工序的改進(jìn),降低生產(chǎn)成本,提高移植成活率 和壯苗產(chǎn)出率，增強(qiáng)苗木市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，對(duì)于解決杉木組培苗實(shí)現(xiàn)規(guī)模化的技術(shù)性難題十分 必要。
[0004] 經(jīng)過對(duì)現(xiàn)在技術(shù)的檢索發(fā)現(xiàn)，目前杉木組培苗生根方法以瓶?jī)?nèi)生根為主。
[0005] 中國(guó)專利"一種杉木無性系離體生根培養(yǎng)方法"（CN102217539)，將杉木外 植體經(jīng)過誘導(dǎo)分化出不定芽后，轉(zhuǎn)入MS培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)，繼代配方為 3/4MS+6BA0. 3mg/L+蔗糖3% ;當(dāng)不定芽伸長(zhǎng)到2 - 3cm時(shí)，轉(zhuǎn)入誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基，生根培 養(yǎng)基配方為1/4MS，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑含有IBA 0. 05 - 0. 2mg/L、NAA 0. 05 - 0. 4mg/L，杉木 組培苗瓶?jī)?nèi)生根率最商可達(dá)100 %，但生根不整齊；移栽生根試管苗的基質(zhì)為黃土：泥炭土 3:1的混合基質(zhì)，移栽成活率為70%苗育基質(zhì)沒有采用輕基質(zhì)，根系不夠發(fā)達(dá)。
[0006] 中國(guó)專利"一種杉木組織培養(yǎng)生根方法"（CN200810070456) "，將杉木繼代小苗接 種于生根培養(yǎng)基，杉木生根培養(yǎng)基由改良MS培養(yǎng)基、ABTlsO. 4 - 0. 8mg/L、IBA0. 1 - 0. 5mg/ L、根太陽(yáng)稀釋液2 - 6mL/L組成。經(jīng)生根培養(yǎng)22天后，杉木生根率最高達(dá)到96%，但生根 不整齊，并且沒有進(jìn)行煉苗、移栽等工序，不能確定杉木苗移栽成活率及植株健康情況。
[0007] 中國(guó)專利"一種杉木試管苗生根誘導(dǎo)方法"（CN201310195197)，將繁殖繼代小苗， 接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，預(yù)生根培養(yǎng)基以1/2MS-MS為基本培養(yǎng)基，含有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié) 劑NAA0. 02 - 0. 08mg/L。經(jīng)15 - 25天預(yù)生根培養(yǎng)后，再進(jìn)行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基以1/2MS 為基本培養(yǎng)基，含有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑IBA0. 10 - 0. 25mg/L、NAA0. 05 - 0. 08mg/L。此法的 杉木試管苗的生根率生根率達(dá)到88 - 96%，根系萌發(fā)較整齊，但預(yù)生根培養(yǎng)增加了生產(chǎn)工 序，生根時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)，且沒有進(jìn)行煉苗、移栽等工序，不能確定杉木苗移栽成活率及植株 健康情況，不能確定生產(chǎn)供應(yīng)能力。
[0008] 有關(guān)杉木組培瓶外生根技術(shù)方面，高小坤報(bào)道將杉木組培苗在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng) 30d后，移到煉苗大棚煉苗15d，對(duì)長(zhǎng)有愈傷組織但沒有生根的無根試管苗進(jìn)行瓶外生根， 基質(zhì)用紅心土 ：河砂（3:1)、愈傷組織部分切除、蘸300mg/L ABTls，移栽3個(gè)月后的生根率、 生根數(shù)、生根長(zhǎng)度分別可以達(dá)到92. 15%、3. 18條（福建林業(yè)科技，2006, 33 (4): 163-165)。 此報(bào)道有助于部分地解決瓶?jī)?nèi)生根培養(yǎng)基上不能生根的試管苗移栽生根的問題，但沒有解 決提高杉木生根速度、縮短杉木苗育苗周期、降低育苗成本的問題，并且育苗基質(zhì)仍為黃心 土，不能滿足現(xiàn)代輕基質(zhì)育苗技術(shù)的要求及基質(zhì)自動(dòng)裝填設(shè)備的要求，影響苗木生產(chǎn)效率。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明針對(duì)上述現(xiàn)在技術(shù)存在的不足，提出一種微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法， 不經(jīng)瓶?jī)?nèi)生根過程，在無菌苗繼代擴(kuò)繁、煉苗后，直接栽培于育苗袋基質(zhì)中進(jìn)行生根，并采 用輕基質(zhì)育苗，通過自動(dòng)電控間歇噴霧裝置調(diào)控空氣和基質(zhì)濕度，把組織培養(yǎng)和扦插繁殖 有機(jī)地結(jié)合起來，提高成活率、擴(kuò)大繁殖率，實(shí)現(xiàn)杉木組培苗規(guī)?；绲哪康摹?br> [0010] 本發(fā)明通過以下技術(shù)方案達(dá)到上述目的：一種微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法，包 括以下步驟：
[0011] (1)繼代增殖壯苗培養(yǎng)：取杉木組培叢生苗，接種到MS壯苗培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度 為23-26°C，光照強(qiáng)度1800-20001ux，光照時(shí)間為12小時(shí)/天，得到一種不定芽；
[0012] 所述 MS 壯苗培養(yǎng)基為 0? 6mg/L 的 6-BA、0. 3mg/L 的 IBA、1. Omg/L 的 KT、30g/L 蔗 糖、5g/L的瓊脂和0. 5g/L活性炭，培養(yǎng)基的pH值為5. 8 ;
[0013] (2)煉苗：待不定芽在組培室內(nèi)培養(yǎng)至4 一 5cm時(shí)，移至塑料大棚中進(jìn)行煉苗，塑 料大棚四周有通風(fēng)裝置，在自然光下煉苗15 - 20天，得到一種無根苗；
[0014] (3)前處理：將上述無根苗取出后，洗凈培養(yǎng)基，剪去愈傷組織，于1%。的多菌靈中 浸泡20min，整理分成單株，用營(yíng)養(yǎng)袋將基質(zhì)進(jìn)行裝杯，在移栽前1 一 2天用3%。的高錳酸鉀 噴灑于基質(zhì)上進(jìn)行消毒，移栽當(dāng)天用水將基質(zhì)中高錳酸鉀沖洗干凈后備用；
[0015] (4)微扦插：將完成前處理的無根苗，在基部0. 8 - I. Ocm的部位浸泡在生根劑溶 液中15分鐘，再直接移栽至育苗基質(zhì)袋中；所述生根劑溶液為50mg/L的IBA和25mg/L的 NAA，育苗基質(zhì)由椰糠、泥炭、珍珠巖組成，各成分所占質(zhì)量百分比分別為椰糠64?75%、泥 炭 14 一 17%、珍珠巖 8 - 21%，
[0016] (5)植后管理：苗木移栽后澆灌定根水，之后將扦插好的苗木放在遮蔭網(wǎng)大棚內(nèi)， 透光率為60%，苗床覆蓋塑料薄膜，采用自動(dòng)間歇噴霧裝置，每隔每6小時(shí)噴霧30秒，保 持空氣相對(duì)濕度在95%以上；7天后將苗床兩端塑料薄膜卷起1/3,空氣相對(duì)濕度在90% 以上；10 - 15天后，去掉塑料薄膜，當(dāng)溫度超過30°C時(shí)，需噴水降溫，移栽后每周澆施一次 I/2MS、1 %。的多菌靈，移栽15-20天后，陸續(xù)有生根現(xiàn)象。
[0017] 所述育苗基質(zhì)的成分及質(zhì)量比為椰糠：泥炭=9:2。
[0018] 所述育苗基質(zhì)的成分及質(zhì)量比為椰糠：泥炭：珍珠巖=9:2:1?4。
[0019] 本發(fā)明的突出優(yōu)點(diǎn)在于：
[0020] 與現(xiàn)有技術(shù)的根本區(qū)別在于，本發(fā)明在杉木無菌苗繼代增殖后，不經(jīng)瓶?jī)?nèi)生根過 程，直接進(jìn)入煉苗程序，優(yōu)化移栽條件，移栽后15天左右即可開始生根，采用生根液為含有 50mg/L IBA和25mg/L NAA混合液，同時(shí)利用自然光照條件進(jìn)行光合作用，大大提高了杉木 生根速度、縮短杉木苗育苗周期，移栽苗成活率可達(dá)94 一 96%。
[0021] 采用由椰糠、泥炭、珍珠巖組成的輕基質(zhì)做為杉木微扦插育苗基質(zhì)，一方面輕基質(zhì) 持水、保水、保肥性能良好，通氣性好，根系發(fā)達(dá)，且重量輕，便于搬運(yùn)，滿足現(xiàn)代造林技術(shù)的 需求，另一方面輕基質(zhì)育苗袋采用基質(zhì)自動(dòng)裝填設(shè)備裝填，節(jié)省勞動(dòng)力，提高了工作效率， 可用于規(guī)?；a(chǎn)及技術(shù)推廣。
[0022] 在MS壯苗培養(yǎng)基中添加濃度為0. 6mg/L的6-BA、0. 3mg/L的IBA，可促進(jìn)叢生芽莖 段長(zhǎng)高，葉片展開，增加葉面積，提高苗木葉綠素含量，有利于光合產(chǎn)物的形成，從而提高移 栽苗質(zhì)量，促進(jìn)其早生根。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0023] 圖1為杉木無根試管苗微扦插生根效果圖。

【具體實(shí)施方式】
[0024] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)一步說明。
[0025] 實(shí)施例1
[0026] 本發(fā)明所述的微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法，包括以下步驟：
[0027] (1)繼代增殖壯苗培養(yǎng)：取杉木組培叢生苗，接種到MS壯苗培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度 為23-26°C，光照強(qiáng)度1800-20001UX，光照時(shí)間為12小時(shí)/天的條件下增殖培養(yǎng)40天，即 可獲得叢生芽苗，所述MS壯苗培養(yǎng)基為含0. 6mg/L的6-BA、0. 3mg/L的IBA、I. Omg/L的KT、 30g/L蔗糖、5g/L的瓊脂和0. 5g/L活性炭。培養(yǎng)基的pH值為5. 8。
[0028] (2)煉苗：待不定芽在組培室內(nèi)培養(yǎng)至4cm - 5cm時(shí)，移至塑料大棚中進(jìn)行煉苗， 塑料大棚四周有通風(fēng)裝置，在自然光下通過15 - 20天時(shí)間的煉苗。
[0029] (3)前處理：將上述無根苗取出后，洗凈培養(yǎng)基，剪去愈傷組織，于1%。的多菌靈中 浸泡lOmin，整理分成單株。用營(yíng)養(yǎng)袋將基質(zhì)進(jìn)行裝杯，在移栽前1 一 2天用3%。的高錳酸 鉀噴灑于基質(zhì)上進(jìn)行消毒。移栽當(dāng)天用水將基質(zhì)中高錳酸鉀沖洗干凈后備用。
[0030] (4)微扦插：將完成前處理的無根苗，優(yōu)化移栽條件為：在基部0. 8cm - I. Ocm的 部位浸泡在生根劑溶液中15分鐘，再直接移栽至育苗袋中。所述生根劑溶液為50mg/L的 IBA和25mg/L的NAA，育苗基質(zhì)為由椰糠、泥炭、珍珠巖組成，各成分所占質(zhì)量百分比分別為 椰糠64?75%、泥炭14 一 17%、珍珠巖8 - 21%。
[0031] (5)植后管理：苗木移栽后澆灌定根水，之后將扦插好的苗木放在遮蔭網(wǎng)大棚內(nèi)， 透光率為60%，苗床覆蓋塑料薄膜，采用自動(dòng)間歇噴霧裝置，每隔每6小時(shí)噴霧30秒，保持 空氣相對(duì)濕度在95%以上；7天后將苗床兩端塑料薄膜卷起1/3,空氣相對(duì)濕度在90%以 上；10 - 15天后，去掉塑料薄膜。當(dāng)溫度超過30°C時(shí)，需噴水降溫。移栽后每周澆施一次 1/2MS、1%。的多菌靈。移栽15-20天后，陸續(xù)有生根現(xiàn)象。
[0032] 實(shí)施例2
[0033] 本發(fā)明所述的微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法的第2個(gè)實(shí)例，除以下操作步驟和控 制技術(shù)條件不同以外，其他步驟同實(shí)施例1。
[0034] 生根劑浸泡時(shí)間：將杉木無菌苗繼代增殖后，將4 一 5cm的無根試管苗經(jīng)過煉苗 后取出，洗凈培養(yǎng)基，剪去愈傷組織，于1%。的多菌靈中浸泡lOmin，然后將苗基部0. 8cm - I. Ocm的部位浸泡在生根劑溶液中，生根劑含有50mg/L的IBA和25mg/L的NAA，無根試管苗 于生根劑中分別浸泡5分鐘、15分鐘、25分鐘，以黃心土為基質(zhì)。移栽50天后，浸泡15分 鐘效果最好，生根率達(dá)80%，葉綠素含量為I. 68mg/g ;浸泡5分鐘、25分鐘的生根率分別為 72%和63%。本試驗(yàn)以黃心土為基質(zhì)，保水性好，但通氣、透水性差，苗根不易伸展，因此，對(duì) 移栽基質(zhì)和生根劑配方做進(jìn)一步改善。
[0035] 實(shí)施例3
[0036] 本發(fā)明所述的微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法的第3個(gè)實(shí)例，除以下操作步驟和控 制技術(shù)條件不同以外，其他步驟同實(shí)施例1。
[0037] 優(yōu)化生根劑種類和濃度、基質(zhì)類型及配比：將杉木無菌苗繼代增殖后，將4 一 5cm 的無根試管苗經(jīng)過煉苗后取出，洗凈培養(yǎng)基，剪去愈傷組織，于1%。的多菌靈中浸泡lOmin， 然后將苗基部〇. 8cm - I. Ocm的部位浸泡在生根劑溶液中。采用正交設(shè)計(jì)，設(shè)置IBA、NAA 不同濃度及不同基質(zhì)類型，移栽50天后測(cè)定苗木的生根情況、葉綠素含量。表2結(jié)果表明： 基質(zhì)對(duì)杉木試管苗微扦插生根率、不定根條數(shù)、苗高的影響均比生根劑的影響要大，各在椰 糠和泥炭土按重量比為9:2的混合輕基質(zhì)上，各試驗(yàn)處理的平均生根率、不定根條數(shù)、苗高 78. 8%、4. 7條、5. 8cm，育苗基質(zhì)按椰糠和泥炭土按重量比為9:2的混合輕基質(zhì)比含有黃心 土和沙子的基質(zhì)要好，生根率最高90. 2 ;IBA對(duì)生根指標(biāo)影響比NAA的影響大，生根劑溶液 為50mg/L的IBA和25mg/L的NAA時(shí)，生根情況最好。IBA對(duì)植株葉綠素影響最大，在不同 濃度水平上葉綠素含量差別較大；而NAA葉綠素含量影響最小，在不同濃度水平上葉綠素 含量差別不明顯。
[0038] 綜上所述，杉木無根苗微扦插生根劑為50mg/L的IBA和25mg/L的NAA，在按 椰糠和泥炭土按重量比為9:2的混合輕基質(zhì)上的生根率、不定根條數(shù)、苗高最大，分別達(dá) 90. 2%、6. 2條、6. 3cm。輕基質(zhì)培育出的苗木須根量多，根系發(fā)達(dá)、粗壯，苗木高生長(zhǎng)快，而黃 心土培育出的苗木根量少，須根不發(fā)達(dá)，苗木高生長(zhǎng)速度較慢，見圖1。
[0039] 表1杉木微扦插生根劑與基質(zhì)的正交試驗(yàn)因素水平表
[0040]

【權(quán)利要求】
1. 一種微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 繼代增殖壯苗培養(yǎng)：取杉木組培叢生苗，接種到MS壯苗培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為 23-26°C，光照強(qiáng)度1800-20001ux，光照時(shí)間為12小時(shí)/天，得到一種不定芽； 所述MS 壯苗培養(yǎng)基為 0· 6mg/L 的 6-BA、0. 3mg/L 的 IBA、1. Omg/L 的 KT、30g/L蔗糖、5g/ L的瓊脂和0. 5g/L活性炭，培養(yǎng)基的pH值為5. 8 ; (2) 煉苗：待不定芽在組培室內(nèi)培養(yǎng)至4 一 5cm時(shí)，移至塑料大棚中進(jìn)行煉苗，塑料大 棚四周有通風(fēng)裝置，在自然光下煉苗15 - 20天，得到一種無根苗； (3) 前處理：將上述無根苗取出后，洗凈培養(yǎng)基，剪去愈傷組織，于1%。的多菌靈中浸泡 20min，整理分成單株，用營(yíng)養(yǎng)袋將基質(zhì)進(jìn)行裝杯，在移栽前1 一 2天用3%。的高錳酸鉀噴灑 于基質(zhì)上進(jìn)行消毒，移栽當(dāng)天用水將基質(zhì)中高錳酸鉀沖洗干凈后備用； (4) 微扦插：將完成前處理的無根苗，在基部0. 8 - 1. 0cm的部位浸泡在生根劑溶液中 15分鐘，再直接移栽至育苗基質(zhì)袋中；所述生根劑溶液為50mg/L的IBA和25mg/L的NAA，育 苗基質(zhì)由椰糠、泥炭、珍珠巖組成，各成分所占質(zhì)量百分比分別為椰糠64?75%、泥炭14 一 17%、珍珠巖 8 - 21%， (5) 植后管理：苗木移栽后澆灌定根水，之后將扦插好的苗木放在遮蔭網(wǎng)大棚內(nèi)，透光 率為60%，苗床覆蓋塑料薄膜，采用自動(dòng)間歇噴霧裝置，每隔每6小時(shí)噴霧30秒，保持空 氣相對(duì)濕度在95%以上；7天后將苗床兩端塑料薄膜卷起1/3,空氣相對(duì)濕度在90%以上； 10 - 15天后，去掉塑料薄膜，當(dāng)溫度超過30°C時(shí)，需噴水降溫，移栽后每周澆施一次1/2MS、 1%。的多菌靈，移栽15-20天后，陸續(xù)有生根現(xiàn)象。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法，其特征在于，所述育苗基質(zhì) 的成分及質(zhì)量比為椰糠：泥炭=9:2。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的微扦插快速生產(chǎn)杉木苗的方法，其特征在于，所述育苗基質(zhì) 的成分及質(zhì)量比為椰糠：泥炭：珍珠巖=9:2:1?4。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104255524SQ201410544594
【公開日】2015年1月7日 申請(qǐng)日期:2014年10月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月15日
【發(fā)明者】楊梅, 徐圓圓, 楊家鴻, 黃壽先, 戴勤, 盧亮, 蔣維昕, 周傳明 申請(qǐng)人:廣西大學(xué)