一種高抗白粉病苦瓜的育種方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高抗白粉病苦瓜的育種方法，是利用高抗白粉病材料MC42-52，通過連續(xù)回交轉(zhuǎn)育，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法對后代進行抗白粉病單株篩選，最后選育出高抗白粉病的優(yōu)良自交系，再利用本發(fā)明育成的高抗白粉病的自交系組配成高抗白粉病的雜交種。本方法是在苗期利用苦瓜離體葉片對后代進行抗白粉病單株篩選，具有簡便、高效、準確率高和占用空間小的優(yōu)點。
【專利說明】一種高抗白粉病苦瓜的育種方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于作物遺傳育種【技術(shù)領(lǐng)域】，具體來說是涉及一種高抗白粉病苦瓜的育種方法。

【背景技術(shù)】
[0002]苦瓜(Momordica charantia L.)起源于東南亞的熱帶地區(qū),南宋時傳入我國，歷經(jīng)幾百年的栽培，已形成了豐富的類型和品種。其主要分布在兩廣、海南、福建、臺灣、四川、湖南等南方省區(qū)，隨著苦瓜種植面積和規(guī)模的逐漸擴大，苦瓜在生產(chǎn)中的病害發(fā)病率也日益嚴重。苦瓜栽培種大多以常規(guī)種植為主，普遍存在抗病性差的缺點?？共】喙鲜怯N工作者進行品種改良的重要目標，近年來也取得一定進展。采用抗病品種可以節(jié)省人力物力，有效減少農(nóng)藥的使用，有利生產(chǎn)綠色或有機蔬菜迎合消費者對食品安全的需求。但是隨著新品種的推廣應(yīng)用，種植年代的增加，病原菌也會發(fā)生變異，產(chǎn)生新的生理小種從而喪失抗性。
[0003]苦瓜白粉病是苦瓜生產(chǎn)中常見的主要病害之一,屬于氣候性病害,主要在春秋兩季爆發(fā)流行。目前，尚未發(fā)現(xiàn)有完全對白粉病免疫的苦瓜資源，一些具備高抗白粉病的資源在產(chǎn)量、外形、風(fēng)味等商品性上大多不能迎合消費需求。
[0004]因此，將抗白粉病基因轉(zhuǎn)育到栽培種或性狀優(yōu)良的自交材料中，育成既高產(chǎn)又兼顧抗白粉病性狀的苦瓜品種，是苦瓜品種改良的一個目標。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種高抗白粉病苦瓜的育種方法，以獲得抗白粉病又兼顧其它優(yōu)良農(nóng)藝性狀的苦瓜品種。
[0006]為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，主要是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:
[0007]一種高抗白粉病苦瓜的育種方法，是利用高抗白粉病材料MC42-52，通過連續(xù)回交轉(zhuǎn)育，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法對后代進行抗白粉病單株篩選，最后選育出高抗白粉病的優(yōu)良自交系，利用選育的高抗白粉病的自交系組配成高抗白粉病的苦瓜雜交種。
[0008]本發(fā)明所提供的技術(shù)方案，包括以下步驟:
[0009](I)選育高抗白粉病自交系方法
[0010]A、將MC42-52與農(nóng)藝性狀優(yōu)良的自交系雜交，得到雜交F1 ；
[0011]B、以雜交F1與優(yōu)良自交系回交，得到回交一代BC1F1 ；
[0012]C、種植BC1F1，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與優(yōu)良自交系回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC1F2和BC2F1 ；
[0013]D、隨機取BC1F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC2F1單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與優(yōu)良自交系回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC2F2和BC3F1 ；
[0014]E、隨機取BC2F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC3F1單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與優(yōu)良自交系回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC3F2和BC4F1 ；
[0015]F、隨機取BC3F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC4F1單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與優(yōu)良自交系回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC4F2和BC5F1 ；
[0016]G、隨機取BC4F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC5F1單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與優(yōu)良自交系回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC5F2和BC6F1 ；
[0017]H、播種BC5F2，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，選留高抗白粉病的植株，連續(xù)2代自交，自交代均表現(xiàn)為高抗白粉病，單瓜收種，種成瓜行，在瓜行中選株種成株系，獲得高抗白粉病的自交系。
[0018](2)利用上述方法所育成的高抗白粉病自交系進行雜交，可選育出高抗白粉病的苦瓜雜交種。
[0019]作為優(yōu)選，步驟(I)C中所述單株自交方法為:于授粉前一天分別給雌花與雄花套袋，第二天選擇同一株的雄花作為花粉給同一株的雌花授粉，授粉后立即套袋。
[0020]作為優(yōu)選，步驟(I)D中所述苗期為長至4葉I心的苦瓜苗。
[0021]步驟(I)中所述農(nóng)藝性狀好是指具有高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、商品性好的育種目標性狀。
[0022]本發(fā)明的有益.效果
[0023](I)在苗期利用苦瓜離體葉片對回交后代進行白粉病的鑒定與篩選，具有簡便、高效、準確率高且占用空間小的優(yōu)點。
[0024](2)本發(fā)明育成的高抗白粉病品種，具備抗病性強且農(nóng)藝性狀良好的特點，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上推廣應(yīng)用，可以減少化學(xué)農(nóng)藥的使用，既有利生產(chǎn)無毒無害的綠色產(chǎn)品滿足消費需求，又保護生態(tài)環(huán)境促進農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，具有很好的經(jīng)濟效益和社會效益。

【具體實施方式】
[0025]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明。
[0026]實施例:
[0027]A、2008年春，將MC42_52(從來源于亞洲蔬菜研究與發(fā)展中心(AVRDC)的苦瓜種質(zhì)T0T4206經(jīng)自交分離而來，對白粉病的抗性由隱性基因控制)與另一個優(yōu)良自交系MC35-37 (從商品種新翠經(jīng)6代自交系譜選擇獲得)雜交，得到雜交F1 ；
[0028]B、以雜交F1與此35_37回交，得到回交一代BC1F1 ；
[0029]C、2009年，種植BC1F1并進行單株自交，同時與自交系MC35-37回交，做好對應(yīng)編號，分別單瓜收獲BC1F2和BC2F1 ；
[0030]其中苦瓜白粉病離體葉片鑒定法:在苗期取苦瓜基生葉，用打孔器制成直徑為5cm的葉碟,清水沖洗1min,用3%的次氯酸鈉消毒8min,最后用無菌水沖冼4次,正面朝上放入滅菌消毒的鋪有雙層濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中，每個葉碟表面均勻地噴入濃度為IXlO5個/ml苦瓜白粉病孢子懸浮液，以葉面不滴水為準，封口后置于28°C /16h，20°C /8h的培養(yǎng)箱中光暗交替培養(yǎng)7d。于7d后進行病情指數(shù)的統(tǒng)計分析。
[0031]抗白粉病鑒定中病害分級標準為:0級:無癥狀；1級:葉片上出現(xiàn)少量白粉狀病斑且病斑模糊不清，病斑面積占葉片面積的5%以下；2級:葉片上出現(xiàn)明顯病斑，但分散不連片，病斑面積總面積的6%?25%，；3級:葉片上產(chǎn)生中等數(shù)量的白粉狀病斑且病斑連成片，病斑面積占總面積的26%?50% ；4級:葉片的白粉病病斑數(shù)量較多，占葉面積的51%?75% ;5級:葉片上的白粉病病斑數(shù)量很多且粉層較厚，占葉面積的76%?100%。
[0032]病情指數(shù)的統(tǒng)計分析公式:DI = Σ (sXn) X 100/NX S (DI_病情指數(shù)，s-各病情級別的代表數(shù)值，η-各病情級別病葉數(shù)，N-調(diào)查總?cè)~數(shù)，S-最高級別代表值)計算病情指數(shù)。
[0033]抗病性鑒定的標準為:高抗:0 <病情指數(shù)< 15 ;抗病:15 <病情指數(shù)< 35沖抗:35 <病情指數(shù)< 55 ;感病:55 <病情指數(shù)< 75 ;高感:病情指數(shù)> 75。
[0034]D、將BC1F2單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC2F1單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與自交系MC35-37回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC2F2和BC3F1 ；
[0035]Ε、隨機取BC2F2單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC3F1單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與自交系MC35-37回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC3F2和BC4F1 ；
[0036]F、隨機取BC3F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC4F1單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與自交系MC35-37回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC4F2和BC5F1 ；
[0037]G、隨機取BC4F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC5F1單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與自交系MC35-37回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC5F2和BC6F1 ；
[0038]Η、2012年，播種BC5F2，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，選留高抗白粉病的植株，連續(xù)2代自交，自交代均表現(xiàn)為高抗白粉病，單瓜收種，種成瓜行，在瓜行中選株種成株系，獲得高抗白粉病的自交系。
[0039]2013年，將通過上述程序育成的高抗白粉病自交系進行雜交，收獲雜交種F1,隨機取F1種子進行種植，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，結(jié)果均表現(xiàn)出高抗白粉病的特性，選育出高抗白粉病的苦瓜雜交種。
[0040]前述對本發(fā)明的具體示例性實施方案的描述是為了說明和例證的目的。這些描述并非想將本發(fā)明限定為所公開的精確形式，并且很顯然，根據(jù)上述教導(dǎo)，可以進行很多改變和變化。對示例性實施例進行選擇和描述的目的在于解釋本發(fā)明的特定原理及其實際應(yīng)用，從而使得本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)并利用本發(fā)明的各種不同的示例性實施方案以及各種不同的選擇和改變。本發(fā)明的范圍意在由權(quán)利要求書及其等同形式所限定。
【權(quán)利要求】
1.一種高抗白粉病苦瓜的育種方法，是利用高抗白粉病材料MC42-52，通過連續(xù)回交轉(zhuǎn)育，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法對后代進行抗白粉病單株篩選，最后選育出高抗白粉病的優(yōu)良自交系，再利用選育出自交系組配成高抗白粉病的苦瓜雜交種，其包括以下步驟: (1)選育高抗白粉病自交系。 A、將MC42-52與農(nóng)藝性狀優(yōu)良的自交系雜交，得到雜交匕； B、以雜交匕與優(yōu)良自交系回交，得到回交一代BC^； C、種植BCR，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與優(yōu)良自交系回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲Β@2和BCR ； D、隨機取BC^單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC2Fi單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與優(yōu)良自交系回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC2F2和BC^ ； E、隨機取BC2F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC^單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與優(yōu)良自交系回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC3F2和BCR ； F、隨機取BC3F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC4Fi單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與優(yōu)良自交系回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC4F2和BC5Fi ； G、隨機取BC4F2單株單瓜種子播種，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，種植具高抗白粉病的對應(yīng)的BC^單株，選農(nóng)藝性狀好的單株自交，同時與優(yōu)良自交系回交，做好對應(yīng)編號，分別單株單瓜收獲BC5F2和BCR ； H、播種BC5F2，在苗期利用苦瓜白粉病離體葉片鑒定法進行抗白粉病鑒定，選留高抗白粉病的植株，連續(xù)2代自交，自交代均表現(xiàn)為高抗白粉病，單瓜收種，種成瓜行，在瓜行中選株種成株系，獲得高抗白粉病的自交系。 (2)利用步驟(1)所育成的高抗白粉病自交系進行雜交，選育出高抗白粉病的苦瓜雜交種。
2.如權(quán)利要求1所述的育種方法，其特征在于:步驟(1)C中所述單株自交方法為:于授粉前一天分別給雌花與雄花套袋，第二天選擇同一株的雄花作為花粉給同一株的雌花授粉，授粉后立即套袋。
3.如權(quán)利要求1所述的育種方法，其特征在于:步驟(1)D中所述苗期為長至4葉1心的苦瓜苗。
4.如權(quán)利要求1所述的育種方法，其特征在于:步驟(1)中所述農(nóng)藝性狀好是指具有高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、商品性好的育種目標性狀。
【文檔編號】A01H1/02GK104303992SQ201410582901
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年10月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月27日
【發(fā)明者】黃如葵, 黃熊娟, 陳小鳳, 陳振東, 梁家作, 馮誠誠, 黃玉輝, 車江旅, 劉杏連 申請人:廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所