一種利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種利用荊條屑為主料培養(yǎng)靈芝的方法，創(chuàng)新點(diǎn)在于靈芝的栽培培養(yǎng)基重量組成包括：荊條屑60％、棉籽皮20％、麩皮19％、生石灰1％；制備方法是將荊條粉碎成木屑狀，配以麩皮和生石灰，料水比為1∶1.4。作為荊條屑為主料培養(yǎng)靈芝的配套技術(shù)還包括：靈芝的液體菌種培養(yǎng)基和谷粒菌種培養(yǎng)基中,荊條屑也作為底物誘導(dǎo)，提前加入。本發(fā)明充分利用了林業(yè)廢棄物荊條，形成循環(huán)經(jīng)濟(jì)模式，避免了資源浪費(fèi)、降低了栽培成本，產(chǎn)量高、周期短。具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益，具有廣闊的應(yīng)用前景。
【專利說明】一種利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食用真菌栽培的【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種包含荊條屑的靈芝培養(yǎng)料及 其用于培養(yǎng)靈芝的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 靈芝（Ganoderma Iucidum)在系統(tǒng)分類上屬于菌物界，擔(dān)子菌門，層菌綱，靈芝目， 靈芝科，靈芝屬，是一種藥用價值很高的真菌。中國靈芝科的真菌資源特別豐富，現(xiàn)在有4 屬98種。靈芝又被稱為"靈芝草"、"仙草"、"瑞草"，也叫長生草、還魂草，在我國有著悠久 的藥用歷史。靈芝碳水化合物中含有單糖和多糖，其中起作用的主要是多糖，多糖大約占靈 芝碳水化合物的2. 5%-5%。靈芝中氨基酸含量很高，種類很多，具有很高的營養(yǎng)價值。此 夕卜，靈芝中含有很多種維生素，其中包括維生素C、B 2、B12和維生素D，它們是人體不可缺 少的營養(yǎng)物質(zhì)。靈芝子實(shí)體、孢子粉和其提取物安全而且沒有毒副作用，具有抗腫瘤；調(diào)節(jié) 機(jī)體免疫力；鎮(zhèn)靜、安神；降血壓；鎮(zhèn)咳、祛痰；降血糖、消除自由基；防治神經(jīng)系統(tǒng)的疾病等 很多方面的藥理作用，目前靈芝市場前景非常廣闊。
[0003] 棉籽皮因其營養(yǎng)豐富、通氣性好，是食用菌高產(chǎn)栽培最常用的栽培料，但由于近年 來棉籽皮價格上漲，食用菌種植成本升高，經(jīng)濟(jì)效益下降，所以尋找可代替棉籽皮的栽培新 原料，成為了目前業(yè)內(nèi)的一大課題，同時，也有利于其它農(nóng)林廢棄物的資源化開發(fā)。
[0004] 荊條（Vitex negundo var ineica) 土名荊子、荊梢、條子等，分類屬馬鞭草科，牡 荊屬，黃荊的一個變種，落葉灌木或小喬木，分布幾遍全國，尤以膠東半島的沿海地區(qū)更為 顯著，冀北山地、晉東南山地、太行山、豫西山地丘陵以及晉陜黃土高原等地均有分布。在河 北太行山低山丘陵區(qū)分布極為廣泛，構(gòu)成了該區(qū)干早陽坡的優(yōu)勢灌木樹種。我們采用普查 與重點(diǎn)調(diào)查結(jié)合的方法進(jìn)行了調(diào)查，荊條為落葉灌木，喜光、抗旱耐貧瘠薄，主要生長在 山坡、路旁、林緣土崗等地。荊條適應(yīng)性極強(qiáng)，對土壤要求不嚴(yán)，各類土壤上均有生長。荊 條種子萌芽力強(qiáng)，實(shí)生繁殖容易，人為封禁含少量荊條雜草等的荒山，3-5年即可草木叢 生。河北太行山荊條資源豐富，分布廣泛，據(jù)調(diào)查多處于野生狀態(tài)，尚無較大利用，目前 主要利用途徑為：
[0005] (1)荊編：荊條產(chǎn)區(qū)群眾，采條編織各種筐籃，以自用為主，很少外銷。另外， 一些小型煤礦用荊條編織小排，用于坑道頂面做棚架用，但用量很少。
[0006] (2)薪炭：荊條具有耐平茬、產(chǎn)柴量高的特點(diǎn)，所以當(dāng)?shù)囟嘧鳛槿疾袷褂?，但利?量極其有限。
[0007] 就傳統(tǒng)利用方式荊編來說，荊條的總利用量也不足資源量的10%，研究表明荊條 中有纖維素、木質(zhì)素、半纖維這些食藥用真菌生長所必須的營養(yǎng)物質(zhì)，還含有豐富的有機(jī)質(zhì) 和農(nóng)作物生長所需要的營養(yǎng)元素。但是到目前為止，荊條一直被視為農(nóng)林廢棄物并沒有得 到充分而有效的開發(fā)利用，嚴(yán)重地浪費(fèi)了資源。隨著低碳環(huán)保和生物資源循環(huán)利用觀念的 深入，利用荊條栽培食用菌，不僅可以使荊條變廢為寶，使其替代傳統(tǒng)栽培基質(zhì)棉籽殼，成 為栽培食用菌的新型基質(zhì)，同時為農(nóng)民增收創(chuàng)造更多的機(jī)遇。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的是提供一種利用荊條培養(yǎng)靈芝的方法，解決目前太行山地區(qū)野生荊 條浪費(fèi)的問題，在對環(huán)境無污染并且高收益的前提下實(shí)現(xiàn)農(nóng)林廢棄物的生物資源循環(huán)利 用。
[0009] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明所述目的，本發(fā)明提供了以下技術(shù)方案。
[0010] 這種利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，創(chuàng)新點(diǎn)在于靈芝的栽培培養(yǎng)基重量組成包括： 荊條屑60%、棉籽皮20%、麩皮19%、生石灰1 %;制備方法是將荊條粉碎成木屑，配以麩皮 和生石灰，料水比為I : 1. 4。
[0011] 所述的利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，靈芝的液體菌種培養(yǎng)基中也作為底物誘導(dǎo) 物、提前加入荊條屑；其優(yōu)化液體菌種培養(yǎng)基配方重量比為：馬鈴薯20%，荊條粉5%，麩皮 3%，葡萄糖 2%，KH2P040. 3%，MgS040. 15%，VB1IOmg/!,羧甲基纖維素 0? 3%，水 1000mL，pH 自然。
[0012] 所述的利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，靈芝的谷粒菌種培養(yǎng)基中也作為底物誘導(dǎo) 物、提前加入荊條屑；其優(yōu)化的谷粒菌種培養(yǎng)基配方重量比為：麥粒69%，荊條屑30%，生 石灰1%。
[0013] 所述的利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，包括如下步驟：
[0014] A?液體菌種的制備
[0015] a. -級液體菌種的制備
[0016] 無菌條件下，將市售母種接入一級液體培養(yǎng)基中，28°C、160r/min恒溫振蕩培養(yǎng) 5d，即制得一級液體菌種；
[0017] 所述一級液體菌種培養(yǎng)基包括：以重量百分比計，馬鈴薯20 %，麩皮3 %，葡萄糖 2%, KH2PO4O. 3%, MgSO4O. 15%, CMC0. 3%, VBJOmg/L ；
[0018] b.二級液體菌種的制備
[0019] 無菌條件下，將一級液體菌種以10%的接種量接入二級液體培養(yǎng)基中，28°C、 160r/min恒溫振蕩培養(yǎng)7d，即制得二級液體菌種；
[0020] 所述二級液體菌種培養(yǎng)基配方為：以重量百分比計，馬鈴薯20%，荊條屑粉5%， 麩皮 3%，葡萄糖 2%，KH2PO4O. 3%，MgSO4O. 15%，CMC0. 3%，VB1IOmg/!;
[0021] B.谷粒菌種的制備
[0022] 將步驟A得到的二級液體菌種接入谷粒菌種培養(yǎng)基，接種量為10%，22_25°C培養(yǎng) 至滿，得到谷粒菌種；
[0023] 所述谷粒菌種培養(yǎng)基包括：麥粒69%，荊條屑30%，生石灰1 %。
[0024] C.荊條屑培養(yǎng)料的制備
[0025] 荊條枝均事先粉碎為木屑狀；
[0026] 荊條屑培養(yǎng)料組成包括：荊條屑60%、棉籽皮20%、麩皮19%、生石灰1% ;
[0027] 準(zhǔn)確稱取荊條屑培養(yǎng)基的各組成成分，加水混合均勻后，堆悶30 min，裝入容器 內(nèi)，滅菌，冷卻后備用；
[0028] D.接種、培養(yǎng)、采收
[0029] 無菌條件下，將步驟B制備得到的谷粒菌種接入步驟C制備得到的荊條屑培養(yǎng)料， 進(jìn)行培養(yǎng)、出菇管理、采收。
[0030] 所述利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，步驟D中谷粒菌種的接種量為5-10%。
[0031] 所述利用荊條屑培養(yǎng)靈芝方法，步驟C中盛裝荊條屑培養(yǎng)料的容器選用聚乙烯 袋、聚丙烯袋或玻璃瓶。
[0032] 所述利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，步驟C中荊條屑培養(yǎng)料的滅菌條件為121°C高 壓滅菌150min或10CTC常壓滅菌24h。
[0033] 本發(fā)明用于栽培靈芝的培養(yǎng)基，以荊條屑為主要原料，作用有三：1、對于食用菌而 言，為其提供生長所需碳源。2、荊條目前尚未得到開發(fā)利用，資源豐富，為食用菌栽培提供 了一種價格低廉的栽培原料，生產(chǎn)成本低，經(jīng)濟(jì)效益高。3、從生態(tài)的角度來看，實(shí)現(xiàn)了農(nóng)林 廢棄物的再利用，具有可觀的經(jīng)濟(jì)效益，應(yīng)用前景廣闊。

【具體實(shí)施方式】
[0034] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明所述內(nèi)容做進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
[0035] 實(shí)施例1、利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，靈芝菌種為市場采購
[0036] A.液體菌種的制備
[0037] 一級液體菌種培養(yǎng)基配方：馬鈴薯20%，麩皮3%，葡萄糖2%，KH2PO 4O. 3%， MgSO4O. 15%，VBJOmg/L，CMC0. 3%，pH 自然；
[0038] 二級液體菌種培養(yǎng)基配方：荊條屑粉5 %，馬鈴薯20 %，麩皮3 %，葡萄糖2 %， KH2PO4O. 3%，MgSO4O. 15%，VB1IOmg/!, CMC0. 3%，pH 自然；其中荊條屑粉碎過 80 目篩得粉 狀，與馬鈴薯、麩皮共煮沸30min，過濾去渣得浸提液。
[0039] 一級液體菌種制備時使用500mL錐形瓶，裝液量為200mL，12rC高壓滅菌30min 后，無菌條件下接入市售的PDA斜面菌種，每瓶接種量為4塊0. 5cmX0. 5cm菌種塊。接種 后在28°C、160r/min的條件下，恒溫振蕩培養(yǎng)5d。
[0040] 二級液體菌種裝液量規(guī)格、滅菌條件及培養(yǎng)條件同上，接種量為10%。
[0041] 在二級液體菌種制備階段，測定優(yōu)化液體菌種發(fā)酵液中漆酶酶活及羧甲基纖維素 酶酶活（CMC酶活），以未添加荊條屑粉末的培養(yǎng)基為對照，以發(fā)現(xiàn)荊條粉末在液體菌種中 是否有底物誘導(dǎo)作用的優(yōu)勢。酶活測定結(jié)果如表1所示。
[0042] 漆酶酶活力定義：在一定條件下，每分鐘使反應(yīng)液OD值增加0. 001的酶量定義為 一個漆酶酶活力單位（U)。
[0043] 羧甲基纖維素酶酶活力（CMC酶活）定義：在一定條件下，每分鐘酶解底物產(chǎn)生 I y g葡萄糖的酶量定義為一個羧甲基纖維素酶酶活力單位（U)。
[0044] 表1靈芝菌株的酶活數(shù)據(jù)

【權(quán)利要求】
1. 一種利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，其特征包括：靈芝的栽培培養(yǎng)基重量組成包括： 荊條屑60 %、棉籽皮20 %、麩皮19 %、生石灰1 %;制備方法是將荊條粉碎成木屑，配以麩皮 和生石灰，料水比為I : 1. 4。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，其特征包括：靈芝的液體菌種 培養(yǎng)基中也作為底物誘導(dǎo)物、提前加入荊條屑；其優(yōu)化液體菌種培養(yǎng)基配方重量比為：馬 鈴薯 20 %，荊條粉 5 %，麩皮 3 %，葡萄糖 2 %，KH2PO4O. 3 %，MgSO4O. 15 %，VB110mg/L，羧甲基 纖維素0? 3 %，水lOOOmL，pH自然。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，其特征包括：靈芝的谷粒菌種 培養(yǎng)基中也作為底物誘導(dǎo)物、提前加入荊條屑；其優(yōu)化的谷粒菌種培養(yǎng)基配方重量比為： 麥粒69%，荊條屑30%，生石灰1%。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，其特征包括如下步驟： A. 液體菌種的制備 a. -級液體菌種的制備 無菌條件下，將市售母種接入一級液體培養(yǎng)基中，28°C、160r/min恒溫振蕩培養(yǎng)5d，即 制得一級液體菌種； 所述一級液體菌種培養(yǎng)基包括：以重量百分比計，馬鈴薯20 %，麩皮3 %，葡萄糖2 %， KH2PO4O. 3%, MgSO4O. 15%, CMC0. 3%, VBJOmg/L ； b. 二級液體菌種的制備 無菌條件下，將一級液體菌種以10 %的接種量接入二級液體培養(yǎng)基中，28 °C、160r/min 恒溫振蕩培養(yǎng)7d，即制得二級液體菌種； 所述二級液體菌種培養(yǎng)基配方為：以重量百分比計，馬鈴薯20%，荊條屑粉5%，麩皮 3%，葡萄糖 2%，KH2PO4O. 3%，MgSO4O. 15%，CMC0. 3%，VB1IOmg/!; B. 谷粒菌種的制備 將步驟A得到的二級液體菌種接入谷粒菌種培養(yǎng)基，接種量為10 %，22-25°C培養(yǎng)至 滿，得到谷粒菌種； 所述谷粒菌種培養(yǎng)基包括：麥粒69 %，荊條屑30 %，生石灰1 %。 C. 荊條屑培養(yǎng)料的制備 荊條枝均事先粉碎為木屑狀； 荊條屑培養(yǎng)料組成包括：荊條屑60%、棉籽皮20%、麩皮19%、生石灰1% ; 準(zhǔn)確稱取荊條屑培養(yǎng)基的各組成成分，加水混合均勻后，堆悶30min，裝入容器內(nèi)，滅 囷，冷卻后備用； D. 接種、培養(yǎng)、采收 無菌條件下，將步驟B制備得到的谷粒菌種接入步驟C制備得到的荊條屑培養(yǎng)料，進(jìn)行 培養(yǎng)、出燕管理、米收。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，其特征在于，步驟D中谷粒菌種的 接種量為5-10%。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述利用荊條屑培養(yǎng)靈芝方法，其特征在于，步驟C中盛裝荊條屑培 養(yǎng)料的容器選用聚乙烯袋、聚丙烯袋或玻璃瓶。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，其特征在于，步驟C中荊條屑培養(yǎng) 料的滅菌條件為121°C高壓滅菌150min或100°C常壓滅菌24h。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，其特征在于，液體培養(yǎng)基中所用 荊條屑，事先粉碎并過80目篩。
9. 根據(jù)權(quán)利要求3所述利用荊條屑培養(yǎng)靈芝的方法，其特征在于，谷粒菌種培養(yǎng)基中 所用荊條屑，事先粉碎為木屑狀。
【文檔編號】A01G1/04GK104303845SQ201410611995
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年11月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月3日
【發(fā)明者】王謙, 劉敏, 馮東東, 盧紅, 盛銘浩 申請人:河北大學(xué)