一種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物的制作方法
【專利摘要】一種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物，以重量份數(shù)計，制備原料為100～1000份聚氧乙烯蓖麻油、1～100份Span 80、90～1800份乙酸乙酯、1～100份Tween 80、10～1000份0.1～2.0mg/ml氨芐和1000～250000份含有Brij 35的去離子水溶液。制備方法為：將有機相注入水相中，攪拌使得有機相的各組分在水相中均勻擴散，在超聲波下攪拌，使體系平衡，形成油包水納米乳；采用減壓蒸餾將體系中的有機溶劑完全除去；將蒸餾母液溶于Brij35的去離子水溶液中。本發(fā)明所述的藥物配方能夠將藥物更加有效地透過葉片表皮，從而有效地清除柑橘體內的黃龍病病原菌。
【專利說明】一種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種防治果樹病害的藥物，具體涉及一種適用于葉片噴施的防治柑橘 黃龍病的納米藥物。

【背景技術】
[0002] 柑橘黃龍病是一種對世界柑橘生產極具毀滅性的病害。據(jù)有關研究，估計在世界 上40多個國家約上億株柑橘樹都受到柑橘黃龍病的感染。在我國柑橘黃龍病于20世紀初 在華南地區(qū)首次報告，近一個多世紀來嚴重制約了廣東、廣西和福建三省柑橘產業(yè)的發(fā)展。 臺灣、浙江、江西、湖南、貴州、海南、云南、四川與云南相鄰的部分地區(qū)也有黃龍病發(fā)生和危 害的報道，受害面積占柑橘總栽培面積的80%以上，產量占總產量的85%左右。
[0003]柑橘黃龍病病原是一種寄生韌皮部篩管細胞的革蘭氏陰性細菌，主要通過亞洲柑 橘木虱進行傳播。目前柑橘黃龍病的防治上還存在許多難題，在柑橘的種質資源中，也沒有 發(fā)現(xiàn)對黃龍病具有抗性的品種。因此，通過常規(guī)育種途徑、培育抗性品種還存在一定的困 難。當前柑橘黃龍病防治的主要方法是通過控制傳播媒介亞洲柑橘木虱、生產健康種苗以 及根除已經受到黃龍病感染的柑橘植株。雖然以上幾種防治手段一定程度上控制了黃龍病 菌在柑橘上的繁殖，降低黃龍病對柑橘的危害。但是，并沒有從根本上消除柑橘體內的黃龍 病菌?；瘜W治療被認為是一種防治柑橘黃龍病十分有效的手段，但由于病原體寄居在柑橘 韌皮部內。特別是柑橘葉片表皮具有很厚的臘層，制約了透過葉片表皮將有效藥物運輸?shù)?韌皮部。隨著納米技術的發(fā)展，納米乳擁有高滲透性和穩(wěn)定性，可以作為一種有效的運輸載 體將藥物運輸?shù)街参矬w內。


【發(fā)明內容】

[0004]本發(fā)明針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種經濟、有效的納米藥物，將有效藥物透過柑 橘葉片表皮運輸?shù)狡漤g皮部，達到防治柑橘黃龍病的目的。
[0005] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了以下技術方案：
[0006] -種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物的制備方法，包括如下步驟：
[0007] (1)按重量份數(shù)稱取100?1000份聚氧乙烯蓖麻油、1?100份Span 80和90? 1800份乙酸乙酯，然后混合并攪拌，得到均質的有機相S1 ;
[0008] (2)按重量份數(shù)稱取1?100份Tween 80和10?1000份0? 1?2. Omg/ml氨芐， 然后混合并攪拌，得到均質的水相S2 ;
[0009] (3)將有機相S1注入水相S2,攪拌25?45min，使有機相S1的各組分在水相S2 內部均勻擴散，然后在5?20watts的超聲波下，攪拌5?lOmin，得到油包水納米乳；
[0010] (4)采用減壓蒸餾的方法，對所述油包水納米乳進行30?60min的蒸餾，完全除去 乙酸乙酯，使得油包水納米乳將均勻分布在由油脂、表面活性劑和氨芐溶液所組成的體系 中，得到蒸餾母液；
[0011] (5)將步驟⑷得到的蒸餾母液溶于1000?250000份含有0? 1?0? 5 % (w/w) Brij 35的去離子水溶液中，攪拌均勻，即得到所述納米藥物。
[0012] -種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物，由權利要求1所述的制備方 法制備而成。
[0013] 所述的納米藥物中油包水納米乳的徑粒大小范圍為10?450nm。
[0014] 一種所述的納米藥物的使用方法，將所述的納米藥物用清水稀釋100?500倍，將 稀釋液噴施到黃龍病感病植株的葉片上，每15?20天進行一次噴施，直至清除感病植株體 內的黃龍病病原菌。
[0015] 與現(xiàn)有技術相比較，本發(fā)明具備的有益效果：
[0016] (1)能夠將藥物更加有效地透過葉片表皮。
[0017] (2)能夠有效地清除柑橘體內的黃龍病病原菌。

【具體實施方式】
[0018] 下面通過實施例對本發(fā)明的技術方案作進一步闡述。
[0019] 實施例1
[0020] 本發(fā)明所述一種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物，以重量份數(shù)計， 其制備原料如下：1〇〇份聚氧乙烯菌麻油、1份Span 80、90份乙酸乙酯、1份Tween 80、10份 的0. lmg/ml氨芐溶液和1000份含有0. 1% (w/w)Brij 35的去離子水溶液。
[0021] 上述納米藥物的制備方法，包括如下步驟：
[0022] (1)按重量份數(shù)稱取100份聚氧乙烯蓖麻油、1份Span 80和90份乙酸乙酯，然后 混合并攪拌，得到均質的有機相S1 ;
[0023] (2)按重量份數(shù)稱取1份Tween 80和10份的0? lmg/ml氨芐溶液，然后混合并攪 拌，得到均質的水相S2 ;
[0024] (3)將有機相S1注入水相S2,攪拌30min，使得有機相S1的各組分在水相S2內部 均勻擴散，然后在8watts的超聲波下，攪拌5min，使體系平衡，得到油包水納米乳；
[0025] (4)采用減壓蒸餾的方法，對所述油包水納米乳進行30min的蒸餾，將乙酸乙酯完 全除去，使得油包水納米乳將均勻分布在由油脂、表面活性劑和氨芐溶液所組成的體系中， 得到蒸餾母液；
[0026] (5)將步驟（4)得到的蒸餾母液溶于1000份含有0? 1% (w/w)Brij 35的去離子 水溶液中，攪拌均勻，即得到所述納米藥物。
[0027] 經檢測，油包水納米乳的徑粒大小范圍為425nm。
[0028] 實施例2
[0029] 本發(fā)明所述一種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物，以重量份數(shù)計， 其制備原料如下：1〇〇〇份聚氧乙烯菌麻油、100份Span 80、1800份乙酸乙酯、100份Tween 80U000份的2. Omg/ml氨芐溶液和250000份含有0. 5% (w/w)Brij 35的去離子水溶液。
[0030] 上述納米藥物的制備方法，包括如下步驟：
[0031] (1)按重量份數(shù)稱取1000份聚氧乙烯蓖麻油、100份Span 80和18份乙酸乙酯， 然后混合并攪拌，得到均質的有機相S1 ;
[0032] (2)按重量份數(shù)稱取100份Tween 80和1000份的2. Omg/ml氨芐溶液，然后混合 并攪拌，得到均質的水相S2;
[0033] (3)將有機相S1注入水相S2,攪拌60min，使得有機相S1的各組分在水相S2內部 均勻擴散，然后在16watts的超聲波下，攪拌lOmin，使體系平衡，得到油包水納米乳；
[0034] (4)采用減壓蒸餾的方法，對所述油包水納米乳進行30min的蒸饋，將乙酸乙酯完 全除去，使得油包水納米乳將均勻分布在由油脂、表面活性劑和氨芐溶液所組成的體系中， 得到蒸餾母液；
[0035] (5)將步驟（4)得到的蒸餾母液溶于250000份含有0? 5% (w/w)Brij 35的去離 子水溶液中，攪拌均勻，即得到所述納米藥物。
[0036] 經檢測，油包水納米乳的徑粒大小范圍為344nm。
[0037] 實施例3
[0038] 本發(fā)明所述一種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物，以重量份數(shù)計， 其制備原料如下：300份聚氧乙烯菌麻油、5份Span 80、200份乙酸乙酯、5份Tween 80、200 份的0. 2mg/ml氨芐溶液和30000份含有0. 4% (w/w)Brij 35的去離子水溶液。
[0039] 上述納米藥物的制備方法，包括如下步驟：
[0040] (1)按重量份數(shù)稱取300份聚氧乙烯蓖麻油、5份Span 80、200份乙酸乙酯，然后 混合并攪拌，得到均質的有機相S1;
[0041] (2)按重量份數(shù)稱取5份Tween 80、200份的0? 2mg/ml氨芐溶液，然后混合并攪 拌，得到均質的水相S2;
[0042] (3)將有機相S1注入水相S2,攪拌50min，使得有機相S1的各組分在水相S2內部 均勻擴散，然后在5watts的超聲波下，攪拌7min，使體系平衡，得到油包水納米乳；
[0043] (4)采用減壓蒸餾的方法，對所述油包水納米乳進行30min的蒸餾，將乙酸乙酯完 全除去，使得油包水納米乳將均勻分布在由油脂、表面活性劑和氨芐溶液所組成的體系中， 得到蒸餾母液；
[0044] (5)將步驟（4)得到的蒸餾母液溶于30000份含有0? 4 % (w/w)Brij 35的去離子 水溶液中，攪拌均勻，即得到所述納米藥物。
[0045] 經檢測，油包水納米乳的徑粒大小范圍為296nm。
[0046] 實施例4
[0047] 本發(fā)明所述一種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物，以重量份數(shù)計， 包括500份聚氧乙烯菌麻油、30份Span 80、900份乙酸乙酯、50份Tween 80、500份的 1. Omg/ml氨芐溶液和100000份含有0. 2% (w/w)Brij 35的去離子水溶液。
[0048] 上述納米藥物的制備方法，包括如下步驟：
[0049] (1)按重量份數(shù)稱取500份聚氧乙烯蓖麻油、30份Span 80、900份乙酸乙酯，然后 混合并攪拌，得到均質的有機相S1;
[0050] (2)按重量份數(shù)稱取50份Tween 80、500份的1. Omg/ml氨節(jié)溶液，然后混合并攪 拌，得到均質水相S2;
[0051] (3)將有機相S1注入水相S2,攪拌45min，使得有機相S1的各組分在水相S2內部 均勻擴散，然后在12watts的超聲波下，攪拌8min，使體系平衡，得到油包水納米乳；
[0052] (4)采用減壓蒸餾的方法，對所述油包水納米乳進行45min的蒸饋，將體系中的乙 酸乙酯完全除去，使得油包水納米乳將均勻分布在由油脂、表面活性劑和氨芐溶液所組成 的體系中；
[0053] (5)將步驟⑷得到的蒸餾母液溶于100000份含有0? 2% (w/w)Brij 35的去離 子水溶液中，攪拌均勻，即得到所述納米藥物。
[0054] 經檢測，所述的油包水納米乳的徑粒大小范圍為168nm。
[0055] 實施例5
[0056] 本發(fā)明所述一種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物，以重量份數(shù)計， 包括800份聚氧乙烯菌麻油、80份Span80、1500份乙酸乙酯、800份Tween80、800份的 1. 5mg/ml氨芐溶液和210000份含有0.3% (w/w)Brij35的去離子水溶液。
[0057] 上述納米藥物的制備方法，包括如下步驟：
[0058] (1)按重量份數(shù)稱取800份聚氧乙烯蓖麻油、80份Span 80、1500份乙酸乙酯，然 后混合并攪拌，得到均質的有機相S1;
[0059] (2)按重量份數(shù)稱取80份Tween 80、800份的1. 5mg/ml氨節(jié)溶液，然后混合并攪 拌，得到均質水相S2;
[0060] (3)將有機相S1注入水相S2,攪拌40min，使得有機相S1的各組分在水相內部均 勻擴散，然后在20watts的超聲波下，攪拌lOmin，使體系平衡，得到油包水納米乳；
[0061] (4)采用減壓蒸餾的方法，對所述油包水納米乳進行60min的蒸餾，將體系中的乙 酸乙酯完全除去，使得油包水納米乳將均勻分布在由油脂、表面活性劑和氨芐溶液所組成 的體系中；
[0062] (5)將步驟⑷得到的蒸餾母液溶于210000份含有0? 3% (w/w)Brij 35的去離 子水溶液中，攪拌均勻，即得到所述納米藥物。
[0063] 經檢測，油包水納米乳的徑粒大小范圍為75nm。
[0064] 實施例6
[0065] 納米藥物的離體效果鑒定。
[0066] 將離體柑橘表皮黏在涂滿對有效藥物氨芐十分敏感的菌bacillus subtilis的 LB培養(yǎng)基上，將5 ill如實施例1所述的納米藥物滴該表皮上，于培養(yǎng)箱中28°C培養(yǎng)24h，觀 察其抑菌圈的大小，抑菌圈結果如表1所示。
[0067]從表1的結果可以看出，在所述納米藥物中的油包水納米乳和滲透劑的共同作用 下，氨節(jié)能夠更有效地透過分離的柑橘葉片表皮，其抑菌圈大小為6. 66mm，高于氨節(jié)水溶液 處理的2. 83mm。
[0068] 表1 :納米藥物透過分離表皮的抑菌圈大小
[0069]

【權利要求】
1. 一種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物的制備方法，其特征在于，包括 如下步驟： (1) 按重量份數(shù)稱取100?1000份聚氧乙烯蓖麻油、1?100份Span 80和90?1800 份乙酸乙酯，然后混合并攪拌，得到均質的有機相S1 ; (2) 按重量份數(shù)稱取1?100份Tween 80和10?1000份0? 1?2. Omg/ml氨芐，然后 混合并攪拌，得到均質的水相S2 ; (3) 將有機相S1注入水相S2,攪拌25?45min，使有機相S1的各組分在水相S2內部 均勻擴散，然后在5?20watts的超聲波下，攪拌5?lOmin，得到油包水納米乳； (4) 采用減壓蒸餾的方法，對所述油包水納米乳進行30?60min的蒸餾，完全除去乙酸 乙酯，使得油包水納米乳將均勻分布在由油脂、表面活性劑和氨芐溶液所組成的體系中，得 到蒸餾母液； (5) 將步驟（4)得到的蒸餾母液溶于1000?250000份含有0. 1?0. 5 % (w/w)Brij 35的去離子水溶液中，攪拌均勻，即得到所述納米藥物。
2. -種適用于葉片噴施的防治柑橘黃龍病的納米藥物，其特征在于，由權利要求1所 述的制備方法制備而成。
3. 如權利要求2所述的納米藥物，其特征在于，所述的納米藥物中油包水納米乳的徑 粒大小范圍為10?450nm。
4. 一種如權利要求2?3任意一項所述的納米藥物的使用方法，其特征在于，將如權利 要求2或3所述的納米藥物用清水稀釋100?500倍，將稀釋液噴施到黃龍病感病植株的 葉片上，每15?20天進行一次噴施，直至清除感病植株體內的黃龍病病原菌。
【文檔編號】A01N25/04GK104430396SQ201410614713
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年11月4日 優(yōu)先權日:2014年11月4日
【發(fā)明者】張木清, 楊川毓 申請人:廣西大學