茶尺蠖核型多角體病毒殺蟲懸浮劑及其生產(chǎn)方法
【專利摘要】本發(fā)明的主要目的在于提供一種茶尺蠖核型多角體病毒殺蟲懸浮劑及其生產(chǎn)方法，殺蟲劑由病毒懸液，二氧化硅，芳香族氨基酸，精制熒光增白劑，木質(zhì)素磺酸鈉，聚乙烯醇，氟啶脲，甘油以及無菌水組成。生產(chǎn)步驟為將蛹經(jīng)羽化成蟲進行配對產(chǎn)卵，卵經(jīng)消毒后孵出幼蟲，幼蟲用人工飼料飼養(yǎng)，然后在飼料表面接上茶尺蠖病毒進行飼養(yǎng)，感染病毒后的幼蟲經(jīng)粉碎、過濾，將濾液離心后收集沉淀并制成相應(yīng)殺蟲劑。利用該殺蟲劑可有效控制茶尺蠖病蟲害，而且防治成本低，對環(huán)境友好，避免了大量使用化學(xué)農(nóng)藥致使害蟲抗藥性增強、天敵數(shù)目減少、茶葉中農(nóng)藥殘留增加的問題。
【專利說明】茶尺蠖核型多角體病毒殺蟲懸淳劑及其生產(chǎn)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物殺蟲劑，具體涉及一種茶尺蠖核型多角體病毒殺蟲懸浮劑及該病 毒殺蟲懸浮劑的生產(chǎn)方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 茶尺蠖（Ectropis oblique Warren)，又稱拱拱蟲、量寸蟲、吊絲蟲，主要分布于安 徽、江蘇、浙江、江西、湖北、湖南、四川、廣東和福建等省。是茶樹的主要害蟲，該蟲屬鱗翅目 (Lepidoptera)尺蛾科（Geometridae)。幼蟲食葉，暴發(fā)時可將成片茶園食成光桿，致茶葉 減產(chǎn)60%以上，嚴(yán)重影響成茶品質(zhì)。
[0003] 以往防治茶尺蠖的基本方法為加強預(yù)測預(yù)報和農(nóng)業(yè)防治，人工捕殺，科學(xué)使用化 學(xué)農(nóng)藥。但是長期大量使用化學(xué)農(nóng)藥，致使害蟲抗藥性增強，天敵數(shù)目減少，造成害蟲的再 猖獗和爆發(fā)危害，而且污染環(huán)境，農(nóng)藥殘留增加，品質(zhì)下降。為解決這個問題，許多專家開始 研究用生物農(nóng)藥來防治茶樹害蟲，其中昆蟲病毒是其中比較常用的一種。
[0004] 茶尺蠖核型多角體病毒，是茶尺蠖的天然病原體。利用茶尺蠖核型多角體病毒防 治茶尺蠖，是一種環(huán)保，專一性很強的生物防治方法。茶尺蠖NPV在茶尺蠖體內(nèi)進行自我復(fù) 制增殖，破壞茶尺蠖幼蟲內(nèi)部結(jié)構(gòu)致其死亡。這種防治方法具有持續(xù)性，能很好的控制茶尺 蠖病蟲害，而且防治成本低，對環(huán)境友好。
[0005] 昆蟲病毒殺蟲劑的特異性強，只能在活的宿主細(xì)胞內(nèi)增殖，目前多采用野外病毒 感染收集的方式生產(chǎn)病毒殺蟲劑。其缺點容易受季節(jié)和氣候的原因，從而使生產(chǎn)病毒殺蟲 劑的產(chǎn)量極不穩(wěn)定，不能實現(xiàn)茶尺蠖核型多角體病毒殺蟲劑的大規(guī)?；a(chǎn)。
[0006] 信陽市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所發(fā)明了茶尺蠖室內(nèi)鮮葉繼代飼養(yǎng)方法，該方法具有成本低 廉、取材容易、幼蟲成活率高、幼蟲成長發(fā)育良好優(yōu)點，但是受容易受到季節(jié)的影響。中國林 業(yè)科學(xué)研究院森林生態(tài)環(huán)境與保護研究所發(fā)明了不含茶葉粉成分的茶尺蠖幼蟲的人工飼 料，該發(fā)明提供的茶尺蠖幼蟲人工飼料，其不含寄主植物的任何枝、葉、干、花、果實及提取 物，可大量生產(chǎn)，保證供應(yīng)。浙江省農(nóng)科院發(fā)明的一種茶尺蠖的人工飼料以及茶尺蠖的飼養(yǎng) 方法，克服了以往在冬季與早春因飼料短缺導(dǎo)致茶尺蠖不能全年繼代飼養(yǎng)的難題，實現(xiàn)了 藥劑篩選要求周年、大批量供應(yīng)茶尺蠖標(biāo)準(zhǔn)蟲源的目的。湖北省農(nóng)科院果樹茶葉研究所發(fā) 明了接骨草飼養(yǎng)茶尺蠖及其擴繁EcobNPV的方法，該發(fā)明用接骨草替代茶葉飼養(yǎng)茶尺蠖， 并配合各種飼養(yǎng)操作與擴繁操作以提高養(yǎng)蟲效果與產(chǎn)毒效果。
[0007] 以上發(fā)明均是重點解決茶尺蠖幼蟲的人工飼料及茶尺蠖幼蟲的人工飼養(yǎng)和傳代， 但是對茶尺蠖核型多角體病毒室內(nèi)人工規(guī)?；瘮U繁、茶尺蠖病毒殺蟲劑加工工藝并未涉 及。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的主要目的在于提供一種茶尺蠖的人工飼料，還提供一種茶尺蠖核型多角 體病毒殺蟲懸浮劑的生產(chǎn)方法，該發(fā)明克服了以往病毒殺蟲劑生產(chǎn)過程中的問題，使利用 該發(fā)明的人工飼料飼養(yǎng)生產(chǎn)茶尺蠖幼蟲制備茶尺蠖病毒殺蟲劑的工業(yè)化生產(chǎn)變?yōu)榭赡?，?證了該病毒殺蟲劑生產(chǎn)的質(zhì)量和產(chǎn)量。
[0009] -種茶尺蠖病毒殺蟲劑，其組分及重量配比為：200億PIB/mL病毒懸液 5% -15 %，60nm二氧化硅0. 1% -0.5%，芳香族氨基酸0. 1% -0. 15%，精制熒光增白劑 0. 5 % -1 %，木質(zhì)素磺酸鈉0. 1-1 %，聚乙烯醇0. 1 % -1. 8 %，氟啶脲0. 01 % -0. 1 %，甘油 1. 0% -5. 0%，無菌水為余量。
[0010] 茶尺蠖病毒殺蟲劑生產(chǎn)方法，包括以下步驟：將茶尺蠖的蛹裝入容器中，室溫 24°C下羽化成蟲并解除滯育；將上述羽化后的成蟲雌雄搭配成對，放入成蟲產(chǎn)卵間進行交 配產(chǎn)卵；將上述交配產(chǎn)生的卵經(jīng)消毒后孵出幼蟲，接入裝有茶尺蠖幼蟲人工飼料的茶尺蠖 幼蟲飼養(yǎng)板內(nèi)，放入健康養(yǎng)蟲間內(nèi)飼養(yǎng)到4齡；將上述的茶尺蠖幼蟲人工飼料表面接上經(jīng) 過純化后的茶尺蠖核型多角體病毒，將上述接有病毒的人工飼料裝入病毒飼養(yǎng)板中，在病 毒飼養(yǎng)板中接入上述的經(jīng)過健康養(yǎng)蟲間飼養(yǎng)的幼蟲，然后放入復(fù)制養(yǎng)蟲間飼養(yǎng)；經(jīng)過復(fù)制 養(yǎng)蟲間飼養(yǎng)的感染茶尺蠖核型多角體病毒的幼蟲經(jīng)粉碎、過濾，將濾液離心后收集沉淀，在 該沉淀中加入甘油、納米級二氧化硅、精致熒光增白劑、芳香族氨基酸、木質(zhì)素磺酸鈉、聚乙 烯醇、甘油、滅幼脲類似物氟啶脲和無菌水，攪拌均勻后得到產(chǎn)品。
[0011] 進一步的，成蟲產(chǎn)卵間內(nèi)懸掛有供成蟲產(chǎn)卵用紙條,并為成蟲提供充足的飛行空 間。
[0012]進一步的，消毒為將茶尺蠖卵塊用40目塑料紗包好放在2%次氯酸鈉溶液中浸漬 5分鐘，取出后用無菌水洗滌3次，陰干后放入的冰箱內(nèi)保持4°C備用。
[0013]進一步的，人工飼料的組成包含有質(zhì)量百分比如下的原料：麥胚6%?10%，干酪 素2%?5%，韋氏鹽0. 3%?1. 2%，山梨酸0. 2%?0.6%，尼泊爾金0. 1 %?0. 5%，抗壞 血酸0? 5%?1%，維生素B0. 2%?0? 8%，維生素E0. 02%?0? 1%，肌醇0? 03%?0? 6%， 瓊脂1. 2%?1. 8%，茶葉粉：5%?10%，水65%?85%。
[0014]進一步的，健康養(yǎng)蟲間的潔凈度為千級，具有控溫、控光照時間及空氣循環(huán)功能， 保持室溫20?25 °C。
[0015]進一步的，健康養(yǎng)蟲間溫度為22°C?25°C，濕度40%?70%，光照16小時。
[0016]進一步的，千級潔凈為不小于0. 5 ii m的灰塵應(yīng)不高于35粒/L。
[0017]進一步的，將收集的病死蟲尸加水稀釋2?3倍，用高速組織搗碎機做間斷勻漿 2-3分鐘后取出，用紗布過濾；濾液再用80目篩子過濾并加水稀釋2-3倍，此濾液用離心 機在16000r/min下離心，收集沉淀，在該沉淀中加入甘油、納米級二氧化硅、精致熒光增白 齊IJ、芳香族氨基酸、木質(zhì)素磺酸鈉、甘油、聚乙烯醇、滅幼脲類似物氟啶脲和無菌水，攪拌均 勻后得到產(chǎn)品。
[0018]本發(fā)明的有益效果在于提供的一種茶尺蠖核型多角體病毒殺蟲懸浮劑的生產(chǎn)方 法，利用該方法可工業(yè)化生產(chǎn)該病毒殺蟲劑，利用該殺蟲劑可有效控制茶尺蠖病蟲害，而且 防治成本低，對環(huán)境友好，避免了大量使用化學(xué)農(nóng)藥致使害蟲抗藥性增強、天敵數(shù)目減少、 茶葉中農(nóng)藥殘留增加的諸多問題。

【具體實施方式】
[0019] 下文將結(jié)合實施例詳細(xì)描述本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)注意的是，下述實施例中描述的技術(shù)特 征或者技術(shù)特征的組合不應(yīng)當(dāng)被認(rèn)為是孤立的，它們可以被相互組合和相互結(jié)合從而達到 更好的技術(shù)效果。
[0020] 本發(fā)明涉及一種由人工飼料生產(chǎn)茶尺蠖核型多角體病毒殺蟲懸浮劑的生產(chǎn)方法， 包括以下步驟：采自野外的蛹裝入容器中，室溫24°C下羽化成蟲并解除滯育；將上述羽化 后的成蟲雌雄搭配成對，放入成蟲產(chǎn)卵間進行交配產(chǎn)卵；將上述交配產(chǎn)生的卵經(jīng)消毒后孵 出幼蟲，消毒用40目塑料紗包好放在2%次氯酸鈉溶液中浸漬5分鐘，取出后用無菌水洗滌 3次，陰干后放入的冰箱內(nèi)4°C保存?zhèn)溆茫珒Υ嫫诔^3個月的蟲卵不能再用。接入裝有茶 尺蠖幼蟲人工飼料的茶尺蠖幼蟲飼養(yǎng)板內(nèi)，優(yōu)選4-5天后1齡幼蟲破殼而出，要及時將1齡 幼蟲用毛筆接入已裝好人工飼料的養(yǎng)蟲板中，每板優(yōu)選20頭。將接入幼蟲的養(yǎng)蟲板放在養(yǎng) 蟲架上。放入健康養(yǎng)蟲間內(nèi)飼養(yǎng)到4齡初；其中，健康養(yǎng)蟲間可控溫、控濕、控光并達到千級 潔凈水平，優(yōu)選溫度22°C -25°C;濕度40% -70%;光照16小時，同時彡0. 5 ii m的灰塵彡35 粒/L。養(yǎng)蟲間空氣經(jīng)凈化后循環(huán)60次/小時，加溫采用空調(diào)機，頂及四壁安裝日光燈，光照 強度優(yōu)選要達到3000LX以上，頂部安裝紫外燈。將毒株（優(yōu)選核型多角體病毒）加入適量 蒸餾水配制成一定濃度的接毒水，均勻接入人工飼料表面，待其表面干燥無水滴便可以放 入4齡初蟲（優(yōu)選6條）任其自由取食。茶尺蠖幼蟲感染病毒后隨時將感毒蟲和死亡蟲進 行回收，幼蟲，粉碎、過濾，將濾液離心后收集沉淀。在該沉淀中加入甘油、納米級二氧化硅、 精致熒光增白劑、芳香族氨基酸、木質(zhì)素磺酸鈉、甘油、聚乙烯醇、滅幼脲類似物氟啶脲和無 菌水，攪拌均勻后得到產(chǎn)品。
[0021] 表1 :茶尺蠖幼蟲人工飼料不同配方各物質(zhì)的重量百分比
[0022]

【權(quán)利要求】
1. 一種茶尺蠖病毒殺蟲劑，其特征在于：所述病毒殺蟲劑的組分及其重量配比是：200 億PIB/mL病毒懸液5 %-15 %，60nm二氧化硅0. 1 %-0. 5 %，芳香族氨基酸0. 1 %-0. 15 %， 精制熒光增白劑0.5 % -1 %，木質(zhì)素磺酸鈉0. 1% -1 %，聚乙烯醇0. 1% -1.8%，氟啶脲 0? 01% -0? 1%，甘油 1. 0% -5. 0%，以及無菌水。
2. -種茶尺蠖病毒殺蟲劑生產(chǎn)方法，其特征在于，包括以下步驟： 將茶尺蠖的蛹裝入容器中，室溫24度下羽化成蟲并解除滯育； 將上述羽化后的成蟲雌雄搭配成對，放入成蟲產(chǎn)卵間進行交配產(chǎn)卵； 將上述交配產(chǎn)生的卵經(jīng)消毒后孵出幼蟲，接入裝有茶尺蠖幼蟲人工飼料的茶尺蠖幼蟲 飼養(yǎng)板內(nèi)，放入健康養(yǎng)蟲間內(nèi)飼養(yǎng)到4齡； 將上述的茶尺蠖幼蟲人工飼料表面接上經(jīng)過純化后的茶尺蠖核型多角體病毒，將上述 接有病毒的人工飼料裝入病毒飼養(yǎng)板中，在病毒飼養(yǎng)板中接入上述的經(jīng)過健康養(yǎng)蟲間飼養(yǎng) 的幼蟲，然后放入復(fù)制養(yǎng)蟲間飼養(yǎng)； 經(jīng)過復(fù)制養(yǎng)蟲間飼養(yǎng)的感染茶尺蠖核型多角體病毒的幼蟲經(jīng)粉碎、過濾，離心收集沉 淀，在該沉淀中加入甘油、納米級二氧化硅、精致熒光增白劑、芳香族氨基酸、木質(zhì)素磺酸 鈉、聚乙烯醇、甘油、滅幼脲類似物氟啶脲和無菌水，攪拌均勻后得到產(chǎn)品。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的茶尺蠖病毒殺蟲劑生產(chǎn)方法，其特征在于：所述成蟲產(chǎn)卵間 內(nèi)懸掛有供成蟲產(chǎn)卵用紙條，并為成蟲提供充足的飛行空間。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的茶尺蠖病毒殺蟲劑生產(chǎn)方法，其特征在于：所述消毒為將茶 尺蠖卵塊用40目塑料紗包好放在2%次氯酸鈉溶液中浸漬5分鐘，取出后用無菌水洗滌3 次，陰干后放入的冰箱內(nèi)保持4°C備用。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的茶尺蠖病毒殺蟲劑生產(chǎn)方法，其特征在于：所述健康養(yǎng)蟲間 的潔凈度為千級，具有控溫、控光照時間及空氣循環(huán)功能，保持室溫20?25°C。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的茶尺蠖病毒殺蟲劑生產(chǎn)方法，其特征在于：所述人工飼料的 組成包含有質(zhì)量百分比如下的原料：麥胚6%?10%，干酪素2%?5%，韋氏鹽0. 3%? 1.2%，山梨酸0.2%?0.6%，尼泊爾金0. 1 %?0.5%，抗壞血酸0.5%?1%，維生素 B0. 2%?0? 8%，維生素 E0. 02%?0? 1%，肌醇 0? 03%?0? 6%，瓊脂 1. 2%?1. 8%，茶葉 粉：5%?10%，水 65%?85%。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的茶尺蠖病毒殺蟲劑生產(chǎn)方法，其特征在于：所述健康養(yǎng)蟲間 溫度為22°C?25°C，濕度40%?70%，光照16小時。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的茶尺蠖病毒殺蟲劑生產(chǎn)方法，其特征在于：所述千級潔凈為 不小于0. 5 ii m的灰塵應(yīng)不高于35粒/L。
9. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的茶尺蠖病毒殺蟲劑生產(chǎn)方法，其特征在于：所述粉碎、過濾， 離心收集沉淀為將收集的病死蟲尸加水稀釋2?3倍，用高速組織搗碎機做間斷勻漿2-3 分鐘后取出，用紗布過濾；濾液再用80目篩子過濾并加水稀釋2-3倍，此濾液用離心機在 16000r/min下離心，收集沉淀，在該沉淀中加入甘油、納米級二氧化硅、精致熒光增白劑、芳 香族氨基酸、木質(zhì)素磺酸鈉、甘油、聚乙烯醇、滅幼脲類似物氟啶脲和無菌水，攪拌均勻后得 到產(chǎn)品。
【文檔編號】A01N25/04GK104430539SQ201410659052
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年11月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月18日
【發(fā)明者】靳亮, 王洪秀, 王金昌, 張莉莉, 關(guān)麗梅, 鄭國華, 黃朝 申請人:江西省科學(xué)院微生物研究所