一種鐵皮石斛的培養(yǎng)基的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率的培養(yǎng)基及該培養(yǎng)基的制備方法。一種鐵皮石斛的培養(yǎng)基，包括10%香蕉質(zhì)量比+MS +3%蔗糖質(zhì)量比+0.8%瓊脂質(zhì)量比+2.0mg/L NAA+IAA濃度為0.2～1.0mg／L+6-BA濃度為1.0～5.0mg／L；其中，改良MS 培養(yǎng)基中 KNO3、KH2PO4 和H3BO3 用量為MS 培養(yǎng)基中KNO3、KH2PO4 和H3BO3 用量的三倍，其余組分含量不變。用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率的培養(yǎng)基及該培養(yǎng)基的制備方法，該培養(yǎng)基克服現(xiàn)有技術(shù)中鐵皮石斛結(jié)實(shí)階段營(yíng)養(yǎng)不良導(dǎo)致結(jié)實(shí)率低、果夾小的問(wèn)題，誘導(dǎo)鐵皮石斛結(jié)實(shí)，提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種鐵皮石斛的培養(yǎng)基

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率的培養(yǎng)基及該 培養(yǎng)基的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 鐵皮石斛又稱黑節(jié)草，屬蘭科附生蘭類(lèi)，為多年生草本植物。鐵皮石斛是石斛 中的極品，因其表皮呈鐵綠色而得名，是著名的觀賞兼藥用蘭花；現(xiàn)有技術(shù)中，對(duì)鐵皮石斛 的培養(yǎng)階段中，大多對(duì)外植體原球莖進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖、分化、生化培養(yǎng)，得到小苗，但是 對(duì)后期的試管結(jié)實(shí)的研究比較少；鐵皮石斛對(duì)生境條件要求苛刻，難結(jié)實(shí)，因此，對(duì)鐵皮石 斛結(jié)實(shí)的培養(yǎng)對(duì)提高植物結(jié)實(shí)機(jī)理研究具有非常重要的意義；而現(xiàn)有的鐵皮石斛結(jié)實(shí)過(guò)程 中，授粉后植株一般沒(méi)有單獨(dú)特殊的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)元素不充足，直接影響果實(shí)發(fā)育，造 成果夾小，結(jié)實(shí)率低；并且，通常情況下，培養(yǎng)基的制備過(guò)程中一般采用熱灌裝的方式，即白 糖和瓊脂粉均是經(jīng)加熱煮沸后倒入灌裝機(jī)中灌裝，該方法制備出的培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)元素流失嚴(yán) 重，灌裝不均勻，不便于結(jié)實(shí)的培養(yǎng)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率的培養(yǎng)基及該培養(yǎng)基的制 備方法，該培養(yǎng)基克服現(xiàn)有技術(shù)中鐵皮石斛結(jié)實(shí)階段營(yíng)養(yǎng)不良導(dǎo)致結(jié)實(shí)率低、果夾小的問(wèn) 題，誘導(dǎo)鐵皮石斛結(jié)實(shí)，提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率。
[0004] 本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種鐵皮石斛的培養(yǎng)基，包括10%香蕉質(zhì)量比+MS +3%蔗糖 質(zhì)量比+0. 8%瓊脂質(zhì)量比+2. Omg/L NAA+IAA濃度為0. 2?I. Omg / L+6-BA濃度為I. 0? 5. Omg/ L;其中，改良MS培養(yǎng)基中KN03、KH2P04和H3B03用量為MS培養(yǎng)基中KN03、 KH2P04和H3B03用量的三倍，其余組分含量不變。
[0005] 根據(jù)上述發(fā)明所述的一種鐵皮石斛的培養(yǎng)基的配置方法，其特征在于：包括： A量取800ml蒸餾水于潔凈的大燒杯中，加熱至沸騰； B準(zhǔn)確稱量IOOg香蕉果肉，切成碎片狀，并倒入上述燒杯中，加熱煮沸5min，其間攪拌 使之充分溶解； C按照大量、微量、Fe2+鹽、有機(jī)I、有機(jī)II順序，量取MS各種母液于盛有50ml蒸餾水 的燒杯，混合均勻； D將B和C的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NAA濃度為0. lmg/ml，混合均 勻，加入IAA濃度為0· 2?L Omg / L和6-BA濃度為L(zhǎng) 0?5. Omg / L ; E加熱至沸騰，加入8g瓊脂并煮沸5min，其間不斷攪拌使之充分溶解； F冷卻至50±5°C時(shí)，調(diào)pH至pH5. 6?6. 0,分裝于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，33. 3ml/瓶，培養(yǎng)時(shí)保持 溫度25°C?28°C。

【具體實(shí)施方式】
[0006] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的描述，但它們不是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步限制。
[0007] 實(shí)施例1 該用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率的培養(yǎng)基的配方為： 包括10%香蕉質(zhì)量比+MS +3%蔗糖質(zhì)量比+0. 8%瓊脂質(zhì)量比+2. Omg/L NAA+IAA濃度 為0. 2?I. Omg / L+6-BA濃度為I. 0?5. Omg / L ;其中，改良MS培養(yǎng)基中KN03、KH2P04 和H3B03用量為MS培養(yǎng)基中KN03、KH2P04和H3B03用量的三倍，其余組分含量不變。
[0008] 其中，每升改良MS培養(yǎng)基中含有的組分及各組分的重量如下：NH4N03 165mg、 KN035700mg、CaC12 · 2H20 440mg、MgS04 · 7H20 370mg、KH2P04 510mg、KI 0. 83mg、H3B03 18. 6mg、MnS04 · H20 16. 9mg、ZnS04 · 7H20 8. 6mg、Na2Mo04 · 2H20 0. 25mg、CuS04 · 5H20 0.025mg、C〇C12.6H20 0.025mg、FeS04.7H20 27.8mg、Na2-EDTA.2H20 37.3mg、肌醇 100 mg、煙酸0. 5mg、鹽酸批卩多醇0. 5 mg、鹽酸硫胺素 0. I mg、甘氨酸2 mg。
[0009] 上述用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率的培養(yǎng)基的配制過(guò)程為： A量取800ml蒸餾水于潔凈的大燒杯中，加熱至沸騰； B準(zhǔn)確稱量IOOg香蕉果肉，切成碎片狀，并倒入上述燒杯中，加熱煮沸5min，其間攪拌 使之充分溶解； C按照大量、微量、Fe2+鹽、有機(jī)I、有機(jī)II順序，量取MS各種母液于盛有50ml蒸餾水 的燒杯，混合均勻； D將B和C的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NAA濃度為0. lmg/ml，混合均 勻，加入IAA濃度為0. 2mg / L和6-BA濃度為I. Omg / L ; E加熱至沸騰，加入8g瓊脂并煮沸5min，其間不斷攪拌使之充分溶解； F冷卻至50±5°C時(shí)，調(diào)pH至pH5. 6?6. 0,分裝于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，33. 3ml/瓶，培養(yǎng)時(shí)保持 溫度25°C?28°C。
[0010] 實(shí)施例2 該用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率的培養(yǎng)基的配方為： 包括10%香蕉質(zhì)量比+MS +3%蔗糖質(zhì)量比+0. 8%瓊脂質(zhì)量比+2. Omg/L NAA+IAA濃度 為0. 2?I. Omg / L+6-BA濃度為I. 0?5. Omg / L ;其中，改良MS培養(yǎng)基中KN03、KH2P04 和H3B03用量為MS培養(yǎng)基中KN03、KH2P04和H3B03用量的三倍，其余組分含量不變。
[0011] 其中，每升改良MS培養(yǎng)基中含有的組分及各組分的重量如下：NH4N03 165mg、 KN035700mg、CaC12 · 2H20 440mg、MgS04 · 7H20 370mg、KH2P04 510mg、KI 0. 83mg、H3B03 18. 6mg、MnS04 · H20 16. 9mg、ZnS04 · 7H20 8. 6mg、Na2Mo04 · 2H20 0. 25mg、CuS04 · 5H20 0.025mg、C〇C12.6H20 0.025mg、FeS04.7H20 27.8mg、Na2-EDTA.2H20 37.3mg、肌醇 100 mg、煙酸0. 5mg、鹽酸批卩多醇0. 5 mg、鹽酸硫胺素 0. I mg、甘氨酸2 mg。
[0012] 上述用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率的培養(yǎng)基的配制過(guò)程為： A量取800ml蒸餾水于潔凈的大燒杯中，加熱至沸騰； B準(zhǔn)確稱量IOOg香蕉果肉，切成碎片狀，并倒入上述燒杯中，加熱煮沸5min，其間攪拌 使之充分溶解； C按照大量、微量、Fe2+鹽、有機(jī)I、有機(jī)II順序，量取MS各種母液于盛有50ml蒸餾水 的燒杯，混合均勻； D將B和C的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NAA濃度為0. lmg/ml，混合均 勻，加入IAA濃度為I. Omg / L和6-BA濃度為5. Omg / L ; E加熱至沸騰，加入8g瓊脂并煮沸5min，其間不斷攪拌使之充分溶解； F冷卻至50±5°C時(shí)，調(diào)pH至pH5. 6?6. 0,分裝于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，33. 3ml/瓶，培養(yǎng)時(shí)保持 溫度25°C?28°C。
[0013] 實(shí)施例3 該用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率的培養(yǎng)基的配方為： 包括10%香蕉質(zhì)量比+MS +3%蔗糖質(zhì)量比+0. 8%瓊脂質(zhì)量比+2. Omg/L NAA+IAA濃度 為0. 2?I. Omg / L+6-BA濃度為I. 0?5. Omg / L ;其中，改良MS培養(yǎng)基中KN03、KH2P04 和H3B03用量為MS培養(yǎng)基中KN03、KH2P04和H3B03用量的三倍，其余組分含量不變。
[0014] 其中，每升改良MS培養(yǎng)基中含有的組分及各組分的重量如下：NH4N03 165mg、 KN035700mg、CaC12 · 2H20 440mg、MgS04 · 7H20 370mg、KH2P04 510mg、KI 0. 83mg、H3B03 18. 6mg、MnS04 · H20 16. 9mg、ZnS04 · 7H20 8. 6mg、Na2Mo04 · 2H20 0. 25mg、CuS04 · 5H20 0.025mg、C〇C12.6H20 0.025mg、FeS04.7H20 27.8mg、Na2-EDTA.2H20 37.3mg、肌醇 100 mg、煙酸0. 5mg、鹽酸批卩多醇0. 5 mg、鹽酸硫胺素 0. I mg、甘氨酸2 mg。
[0015] 上述用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率的培養(yǎng)基的配制過(guò)程為： A量取800ml蒸餾水于潔凈的大燒杯中，加熱至沸騰； B準(zhǔn)確稱量IOOg香蕉果肉，切成碎片狀，并倒入上述燒杯中，加熱煮沸5min，其間攪拌 使之充分溶解； C按照大量、微量、Fe2+鹽、有機(jī)I、有機(jī)II順序，量取MS各種母液于盛有50ml蒸餾水 的燒杯，混合均勻； D將B和C的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NAA濃度為0. lmg/m，混合均 勻，加入IAA濃度為0. 6mg / L和6-BA濃度為3. Omg / L ; E加熱至沸騰，加入8g瓊脂并煮沸5min，其間不斷攪拌使之充分溶解； F冷卻至50±5°C時(shí)，調(diào)pH至pH5. 6?6. 0,分裝于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，33. 3ml/瓶，培養(yǎng)時(shí)保持 溫度25°C?28°C。
[0016] 試驗(yàn)例 將授粉后的鐵皮石斛植株轉(zhuǎn)接到本發(fā)明實(shí)施例1制備的用于提高鐵皮石斛結(jié)實(shí)率 的培養(yǎng)基中，采用28瓦日光色燈管作為光源，光照強(qiáng)度為30001X，在溫度為23°C，濕度為 50%，光照時(shí)間13小時(shí)/天的條件下，培養(yǎng)100天；其中，表1為將授粉后的植株轉(zhuǎn)接到本 發(fā)明培養(yǎng)基中進(jìn)行結(jié)實(shí)培養(yǎng)與轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)后的植株?duì)顟B(tài)的對(duì)照：

【權(quán)利要求】
1. 一種鐵皮石斛的培養(yǎng)基，其特征在于：包括10%香蕉質(zhì)量比+MS +3%蔗糖質(zhì)量比 +0? 8% 瓊脂質(zhì)量比 +2. Omg/L NAA+0. 2 ?1. Omg / L IAA+1. 0 ?5. Omg / L 6-BA ;其中， 改良MS培養(yǎng)基中KN03、KH2P04和H3B03用量為MS培養(yǎng)基中KN03、KH2P04和H3B03用 量的三倍，其余組分含量不變。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鐵皮石斛的培養(yǎng)基的配置方法，其特征在于：包括： A量取800ml蒸餾水于潔凈的大燒杯中，加熱至沸騰； B準(zhǔn)確稱量100g香蕉果肉，切成碎片狀，并倒入上述燒杯中，加熱煮沸5min，其間攪拌 使之充分溶解； C按照大量、微量、Fe2+鹽、有機(jī)I、有機(jī)II順序，量取MS各種母液于盛有50ml蒸餾水 的燒杯，混合均勻； D將B和C的溶液混合，然后加入30g蔗糖，并移取2ml NAA，NAA的濃度為0? lmg/ml， 混合均勻，加入IAA，IAA的濃度0? 2?1. Omg / L和6-BA，6-BA的濃度為1. 0?5. Omg / L ； E加熱至沸騰，加入8g瓊脂并煮沸5min，其間不斷攪拌使之充分溶解； F冷卻至50±5°C時(shí)，調(diào)pH至pH5. 6?6. 0,分裝于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，33. 3ml/瓶，培養(yǎng)時(shí)保持 溫度25°C?28°C。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104488707SQ201410721873
【公開(kāi)日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2014年12月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月3日
【發(fā)明者】黃志鏗 申請(qǐng)人:柳州市泓吉農(nóng)業(yè)科技有限公司