一種頂果木組織培養(yǎng)方法
【專利摘要】一種頂果木組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟：步驟一，外植體選擇；步驟二，外植體處理；步驟三，接種；步驟四，誘導(dǎo)培養(yǎng)基制定；步驟五，繼代培養(yǎng)基制??；步驟六，壯苗培養(yǎng)；誘導(dǎo)培養(yǎng)基制作配方為，MS+6BA 1mg/L+NAA 0.2mg/L+白糖30g+瓊脂6.5g；繼代培養(yǎng)制作選取配方，MS+6BA 0.6 mg/L+NAA0.2 mg/L+白糖30g+瓊脂6.5g；該頂果木的無性快速繁殖方法，采用三種不同的培養(yǎng)基進(jìn)行頂果木培養(yǎng)，它可以使頂果木在相對短的時間內(nèi)大規(guī)模繁殖出外觀整齊的植株，再生植株變異低；再生體系非常高效；平均單株再生苗的成本極低，適合頂果木的大批量高效快速繁殖，非常適用于工廠化生產(chǎn)。
【專利說明】_種頂果木組織培養(yǎng)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及組培【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其是一種頂果木組織培養(yǎng)方法。

【背景技術(shù)】
[0002]頂果木生長很快，屬陽性樹種，落葉或者半落葉大喬木，高大挺拔。有資料顯示，頂果木早期特別速生，壽命長、衰退慢，可培育大徑級木材。萌發(fā)力很強，伐后可萌發(fā)植株?？勺骶G化、防風(fēng)固土和用材。其木材紋理直、耐水濕、堅硬、韌性好，適用于建筑、家具等，特別適用于制作耐水濕的用具；
[0003]現(xiàn)有技術(shù)對于頂果木的快速繁殖一般沒有一種或者幾種比較適宜的培養(yǎng)基作為誘導(dǎo)，導(dǎo)致其在快速繁殖出現(xiàn)以下不良情況:植株的生長不整齊，植株變異率較高，進(jìn)而給后期的種植帶來較多的麻煩。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]現(xiàn)有技術(shù)不能滿足人們的需要，為彌補現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明旨在提供一種頂果木組織培養(yǎng)方法。
[0005]為實現(xiàn)該技術(shù)目的，本發(fā)明的方案是:一種頂果木組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟:步驟一，外植體選擇；步驟二，外植體處理；步驟三，接種；步驟四，誘導(dǎo)培養(yǎng)基制定；步驟五，繼代培養(yǎng)基制??；步驟六，壯苗培養(yǎng)。
[0006]其中在步驟一中:采用半年生幼苗的幼嫩葉芽作為外植體進(jìn)行組培；
[0007]在步驟二中:將步驟一選擇的外植體剪掉多余的葉片后用洗衣粉浸泡10分鐘，沖洗干凈后置于超凈工作臺上，用75%酒精消毒20秒，無菌水沖洗1-2次后再用0.1%氯化汞加吐溫80，2-3滴混合溶液震蕩消毒7分鐘，無菌水沖洗4-5次后吸干；
[0008]在步驟三中:由步驟二處理好的外植體接種于啟動培養(yǎng)基中暗培養(yǎng)7天后轉(zhuǎn)到光照下培養(yǎng)每天12小時燈光，光照強度1500?2000Lux，20°C?30°C，25?30天繼代一次；
[0009]在步驟四中:誘導(dǎo)培養(yǎng)基制作配方為，MS+6BA lmg/L+NAA 0.2mg/L+白糖30g+瓊脂 6.5g ；
[0010]在步驟五中:繼代培養(yǎng)制作選取配方，MS+6BA 0.6mg/L+NAA0.2mg/L+白糖30g+瓊脂 6.5g ；
[0011]在步驟六中:壯苗培養(yǎng)，選用培養(yǎng)基配方為改良1/2MS+6BA 0.3mg/L+NAA0.2mg/L+1BA0.5mg/L+ 白糖 20g+ 卡拉膠 7g。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:該頂果木組織培養(yǎng)方法，采用三種不同的培養(yǎng)基進(jìn)行頂果木組織培養(yǎng)，它可以使頂果木在相對短的時間內(nèi)大規(guī)模繁殖出外觀整齊的植株，再生植株變異低；再生體系非常高效；平均單株再生苗的成本極低，適合頂果木的大批量高效快速繁殖，非常適用于工廠化生產(chǎn)。

【具體實施方式】
[0013]下面將對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其它實施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0014]本發(fā)明實施例中，一種頂果木組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟:步驟一，外植體選擇；步驟二，外植體處理；步驟三，接種；步驟四，誘導(dǎo)培養(yǎng)基制定；步驟五，繼代培養(yǎng)基制??；步驟六，壯苗培養(yǎng)。
[0015]其中在步驟一中:采用半年生幼苗的幼嫩葉芽作為外植體進(jìn)行組培；
[0016]在步驟二中:將步驟一選擇的外植體剪掉多余的葉片后用洗衣粉浸泡10分鐘，沖洗干凈后置于超凈工作臺上，用75%酒精消毒20秒，無菌水沖洗1-2次后再用0.1%氯化汞加吐溫80 2-3滴，混合溶液震蕩消毒7分鐘，無菌水沖洗4-5次后吸干。
[0017]在步驟三中:由步驟二處理好的外植體接種于啟動培養(yǎng)基中暗培養(yǎng)7天后轉(zhuǎn)到光照下培養(yǎng)每天12小時燈光，光照強度1500?2000Lux，20°C?30°C，25?30天繼代一次；
[0018]在步驟四中:誘導(dǎo)培養(yǎng)基制作配方為，MS+6BA lmg/L+NAA 0.2mg/L+白糖30g+瓊脂 6.5g ；
[0019]在步驟五中:繼代培養(yǎng)制作選取配方，MS+6BA 0.6mg/L+NAA0.2mg/L+白糖30g+瓊脂 6.5g ；
[0020]在步驟六中:壯苗培養(yǎng)，選用培養(yǎng)基配方為改良1/2MS+6BA 0.3mg/L+NAA0.2mg/L+1BA0.5mg/L+ 白糖 20g+ 卡拉膠 7g。
[0021]實施例一(采用以下培養(yǎng)基的效果為)
[0022]誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6BA lmg/L+NAA 0.2mg/L+白糖30g+瓊脂6.5g 30d后葉芽開始萌動。
[0023]繼代培養(yǎng)基MS+6BA 0.6mg/L+NAA0.2mg/L+ 白糖 30g+ 瓊脂 6.5g 增值系數(shù)達(dá) 4.2。
[0024]生根培養(yǎng)改良1/2MS+6BA 0.3mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L+ 白糖 20g+ 卡拉膠 7g生根率86%。
[0025]實施例二(以種子立體培養(yǎng)為例)
[0026]種子離體培養(yǎng)洗衣粉溶液沖洗種子1-2次，清水沖洗干凈后，在超凈工作臺用75%酒精消毒10秒鐘，無菌水沖洗1-2次后用0.1%氯化汞溶液消毒3分鐘，無菌水沖洗4-5次，吸干后接種到萌發(fā)培養(yǎng)基l/2MS+30g白糖+6.5g瓊脂；
[0027]培養(yǎng)結(jié)果:
[0028]改良MS+6BAlmg/L+NAA0.5mg/L+30g白糖+6.5g瓊脂20d后叢生芽開始分化；
[0029]改良MS+6BA2mg/L+NAA0.5mg/L+30g白糖+6.5g瓊脂叢生芽增殖增殖倍數(shù)3.630d繼代一次；
[0030]改良1/2MS+6BA 0.3mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L+ 白糖 20g+ 卡拉膠 7g 生根率86%0
[0031]對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實施例的細(xì)節(jié)，而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其它的具體形式實現(xiàn)本發(fā)明。因此，無論從哪一點來看，均應(yīng)將實施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本發(fā)明內(nèi)。不應(yīng)將權(quán)利要求中的任何標(biāo)記視為限制所涉及的權(quán)利要求。
[0032]以上所述，僅為本發(fā)明的較佳實施例，并不用以限制本發(fā)明，凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何細(xì)微修改、等同替換和改進(jìn)，均應(yīng)包含在本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種頂果木組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟:步驟一，外植體選擇；步驟二，外植體處理；步驟三，接種；步驟四，誘導(dǎo)培養(yǎng)基制定；步驟五，繼代培養(yǎng)基制取；步驟六，壯苗培養(yǎng)；其特征在于: .51.其中在步驟一中:采用半年生幼苗的幼嫩葉芽作為外植體進(jìn)行組培； .52.在步驟二中:將步驟一選擇的外植體剪掉多余的葉片后用洗衣粉浸泡10分鐘，沖洗干凈后置于超凈工作臺上，用75%酒精消毒20秒，無菌水沖洗1-2次后再用0.1%氯化汞加吐溫802-3滴，混合溶液震蕩消毒7分鐘，無菌水沖洗4-5次后吸干； .53.在步驟三中:由步驟二處理好的外植體接種于啟動培養(yǎng)基中暗培養(yǎng)7天后轉(zhuǎn)到光照下培養(yǎng)每天12小時燈光，光照強度1500?2000Lux，20°C?30°C，25?30天繼代一次； . 54.在步驟四中:誘導(dǎo)培養(yǎng)基制作配方為，MS+6BAlmg/L+NAA0.2mg/L白糖+30g+瓊脂.6.5g ； . 55.在步驟五中:繼代培養(yǎng)制作選取配方，MS+6BA0.6mg/L+NAA0.2mg/L+白糖30g+瓊脂 6.5g ； .56.在步驟六中:狀苗培養(yǎng)，選用培養(yǎng)基配方為改良1/2MS+6BA0.3mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L+ 白糖 20g+ 卡拉膠 7g。
【文檔編號】A01H4/00GK104429960SQ201410726928
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年11月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月27日
【發(fā)明者】王立 申請人:王立