富貴榕組培快繁育苗方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種富貴榕組培快繁育苗方法，其通過外植體培育、外植體誘導、無菌材料馴化與繼代擴繁、壯苗生根培養(yǎng)和溫室種植五個步驟實現(xiàn)。其選擇具有優(yōu)良母本性狀多年生、優(yōu)良、健壯、無病蟲害的富貴榕為母株；各步驟中的MS改良培養(yǎng)基是將標準MS培養(yǎng)基中KNO3的用量改為950mg.L-1，NH4NO3的用量改為825mg.L-1，并在培育過程中及時剔出純黃的芽和純綠的芽。本發(fā)明的富貴榕組培快繁育苗方法，育苗成活率98％以上,變異率≤1.0％，在短期內(nèi)即可獲得大量優(yōu)質(zhì)苗木。
【專利說明】富貴榕組培快繁育苗方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及植物無性繁殖【技術領域】，具體為富貴格[Ficus altissimacv.’ Yellow Gem’ ]組培快繁育苗方法。
技術背景
[0002]富貴榕又稱金葉榕、馬榕、雞榕、大青樹、大葉榕(海南島)，為?？崎艑?，多年生常木本觀葉植物。原產(chǎn)中國海南、廣西、云南(南部至中部、西北部)、江西南部、四川及印度(安達曼群島)、緬甸、越南、泰國、馬來西亞、印度尼西亞、菲律賓等國。其性喜高溫多濕氣候，耐貧瘠和干旱，抗風、污染能力強。生長迅速，移栽容易成活。
[0003]富貴榕葉片上散布黃色斑塊，適合用作行道樹、風景樹和遮蔭樹。又為優(yōu)良的紫膠蟲寄主樹。目前頗受廣大消費者喜愛，市場上對于富貴榕優(yōu)質(zhì)苗木的需求不斷增長。
[0004]現(xiàn)有的富貴榕組織培養(yǎng)中存在無菌體獲得率低、外植體易褐化死亡、增殖繁殖系數(shù)低、組培變異高等影響種苗產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)等核心技術現(xiàn)象。
[0005]要加速富貴榕的產(chǎn)業(yè)開發(fā)，必須建立規(guī)模化生產(chǎn)基地，如何使富貴榕優(yōu)良母株的各種優(yōu)良性狀在后代個體中遺傳性穩(wěn)定，提高成活率和生長整齊度，是實現(xiàn)富貴榕種苗產(chǎn)業(yè)開發(fā)、生產(chǎn)關鍵技術。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明目的在于提供一種富貴榕組培快繁育苗方法，其可有效解決富貴榕組織培養(yǎng)中存在無菌體獲得率低、外植體易褐化死亡、增殖繁殖系數(shù)低、組培變異高等現(xiàn)象，在短期內(nèi)獲得大量優(yōu)質(zhì)的富貴榕種苗。
[0007]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案:
[0008]富貴榕組培快繁育苗方法，通過如下步驟實現(xiàn):
[0009]一、外植體培育
[0010]選擇具有優(yōu)良母本性狀多年生、優(yōu)良、健壯、無病蟲害的富貴榕為母株，在生長旺季4-8月份新芽萌動時先用20-200PPMM的GA3按常規(guī)用量進行葉面噴施，隔天一次共3次后，去頂芽，防止水分進入，光強控制在5-10 μ mo I.πΓ2.s4，母株停止饒肥；約10-20天后從枝條新長出小芽，待新芽長至2-5cm且芽葉片有黃綠斑即可剪下l-2cm作為外植體；
[0011]二、外植體誘導
[0012]將采集好的外植體清潔漂洗后，切去全部葉片或切去枝條末梢的0.5-1.0cm，用消毒液進行消毒后，再用無菌水漂洗，然后切去截面變色部分立即接種于經(jīng)滅菌好的培養(yǎng)基中進行第一代無菌材料的培養(yǎng)，此培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加有6-芐基腺嘌吟(6-BA) 0.1-5.0mg.L \ a-萘乙酸(NAA) 0.1-0.5mg.L \益培靈 0.01-2.0mg.L \鹿糖20-35g.L—1 和卡拉膠 6.5g.L ―1，調(diào)整 pH 值為 5.7-6.3 ；
[0013]培養(yǎng)條件:溫度26 ± I °C，光照 14土 1H/D，光強 10-20 μ mol.πΓ2.s—1，濕度40-65%，培養(yǎng)周期 35±3D ;
[0014]三、無菌材料馴化與繼代擴繁
[0015](一)無菌材料的馴化
[0016]第一代無菌材料培養(yǎng)后當新芽葉片展開，待芽長到1mm時從芽基部切除，保留頂芽5-8_，如有叢生芽按1-3芽/團進行方向性切割，只保留芽葉片黃綠相間的芽，純黃的芽和純綠的芽淘汰；
[0017]將切割好的芽/團接種于經(jīng)滅菌好的培養(yǎng)基中，此培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加維生素C 30-100mg.L'6-芐基腺嘌呤(6-BA) 0.1-3.0mg.L'氯吡脲(CPPU) 0.1-2.0mg.L'萘乙酸(NAA) 0.1-0.4mg.L-1、鹿糖 20_30g.L-1 和卡拉膠 6.5g.L調(diào)整pH值為5.7-6.3 ；
[0018]培養(yǎng)條件:溫度26± I °C，光照 14± 1H/D，光強 35-70 μ mol.πΓ2.s—1，濕度40-65%，培養(yǎng)周期 30±3D ;
[0019]經(jīng)上述4-5次(代)馴化培養(yǎng)后，即完成馴化進入擴繁階段；
[0020]( 二)無菌材料的繼代擴繁
[0021]進入擴繁階段的材料長成6-10芽/團，按2-3芽/團切害U，若團塊芽高度大于10mm，則去頂留5-8mm;只保留芽葉片黃綠相間的芽，純黃的芽和純綠的芽淘汰，將切割好的芽團接種于培養(yǎng)基中，此培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加6-芐基腺嘌呤(6-BA)0.1-3.0mg.L—1、氯吡脲(CPPU)0.01-0.1.0mg.L'萘乙酸(NAA)0.01-0.3mg.L'蔗糖20-35g.L—1和卡拉膠6.5g.L -1，調(diào)整pH值為5.7-6.3，擴繁倍率3.0-6.0 ；
[0022]培養(yǎng)條件:溫度26± I °C，光照 14± 1H/D，光強 35-70 μ mol.πΓ2.s—1，濕度40-65%，培養(yǎng)周期30 土 ;
[0023]四、壯苗生根培養(yǎng)
[0024](一 )壯苗培養(yǎng)
[0025]將經(jīng)擴繁培養(yǎng)后的芽團按3-4芽/團方向性切割后，接種到壯苗培養(yǎng)基中，壯苗培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加萘乙酸(NAA)0.1-1g.L'活性炭0.5g.L'蔗糖15-35g.L—1 和卡拉膠 6.5g.L ―1，調(diào)整 pH 值為 5.7-6.3 ；
[0026]培養(yǎng)條件:溫度24±1°〇，光強14±!1/1)，光照60-12(^11101.πΓ2.s'濕度40-65%，培養(yǎng)周期25±3D ;
[0027]( 二)生根培養(yǎng)
[0028]當團塊上的芽長度達15-25mm、莖粗度多1mm、具有3片完整葉時，按單芽進行切害J，切下來的單芽接種到生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加吲哚丁酸(IBA) l-3mg.L—1、萘乙酸(NAA) 0.01-0.5mg.L'活性炭 0.Hg.L'蔗糖 15_35g.卡拉膠6.5g.ΙΛ調(diào)整pH值為5.7-6.3 ；
[0029]培養(yǎng)條件:溫度23±1°C，光照 14±1D，光照 70-150 μ mol.πΓ2.s'濕度 40-65%,培養(yǎng)周期15±2D ;
[0030]生根培養(yǎng)7-10D后長根，2周后長根率達99.5%，根數(shù)2_8條，植株高度25_55mm，植物株健壯、葉片黃綠相間即可用于種植；
[0031]五、溫室種植
[0032]將生根苗放置溫室煉苗，煉苗場所要求光強80-160 μ mol.πΓ2.s_\濕度60_80%，溫度20-30°C，煉苗3-7天后取出苗，去除葉片純黃的苗和葉片純綠的苗，留下的苗將其上的培養(yǎng)基清洗干凈并消毒后即可種植，基質(zhì)采用體積比為3-5:0.5-1.5的泥炭土和珍珠巖的混合物，種植后做好遮陰、保濕，控制溫度22-30°C，濕度80-95%，種植4_8個月，得到株高45-70mm，具有4片以上黃綠相間的完整植株，達到出貨標準；
[0033]上述各步驟中的MS改良培養(yǎng)基是將標準MS培養(yǎng)基中KNO3的用量改為950mg.廠1，NH4NO3的用量改為825mg.L '
[0034]上述步驟二中，對外植體的清潔漂洗采用如下方式:將采集好的外植體讓其汁液流干后裝于無菌容器中，用醫(yī)用棉花沾質(zhì)量百分比為0.01-0.03%的洗潔精輕擦芽上灰塵，再用無菌水沖洗干凈。
[0035]上述步驟二中，切去全部葉片或切去枝條末梢的0.5-1.0cm后對外植體的消毒、漂洗采用如下方式:用質(zhì)量百分比為1-3%的NaHClO溶液消毒3_5分鐘后，再用無菌水漂洗3-5次，每次1-3分鐘。
[0036]采用上述方案后，本發(fā)明的富貴榕組培快繁育苗方法，育苗成活率98%以上，變異率< 1.0%，在短期內(nèi)即可獲得大量優(yōu)質(zhì)苗木。其優(yōu)點如下:
[0037]A、外植體的培育
[0038]選擇具有優(yōu)良母本性狀多年生、優(yōu)良、健壯、無病蟲害的富貴榕為母株，在生長旺季4-8月份新芽萌動時先用20-200PPMM的GA3按常規(guī)用量進行葉面噴施，隔天一次共3次后，去頂芽，防止水分進入，光強控制在5-10 μ mol.πΓ2 *s?母株停止饒肥；約10-20天后從枝條新長出小芽，待新芽長至2-5cm且芽葉片有黃綠斑剪下l-2cm作為外植體；這樣保證母株遺傳性狀穩(wěn)定，可大大提高無菌外植體獲得率，克服了采用常規(guī)采用頂芽或莖段為外植體導致其褐化或細菌污染死亡率，同時這樣處理品的外植體到產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，內(nèi)生菌污染極低，這是組培關鍵的培育措施。
[0039]B、外植體培育季節(jié)
[0040]本發(fā)明在生長季節(jié)即4-8月份采集外植體，有利于縮短馴化周期，無菌材料生長相對較快，及時發(fā)現(xiàn)培育過程中葉色的分離或變異，剔出純黃的芽和純綠的芽，保證誘導芽的品種特性，容易提高擴繁系數(shù)穩(wěn)定。
[0041]C、各階段培養(yǎng)基
[0042]本發(fā)明對誘導、擴繁、壯苗、生根的培養(yǎng)基改良及各類激素的合理利用，有效保證各階段芽的穩(wěn)定生長，芽團均勻，枝條變異低，各階段系數(shù)穩(wěn)定，保證了產(chǎn)業(yè)化快繁的需求。
[0043]D、切割方法
[0044]繼代團塊切割方法決定了后期材料長勢與擴繁系數(shù)，本發(fā)明在組培快繁各階段都有淘汰或剔出純黃和純綠的枝芽、芽團，增殖切割對芽數(shù)控制，過高芽去頂，芽團方向性切割等均影響到芽團的質(zhì)量，降低變異增加及提升有效擴繁系數(shù)，如芽過高不去頂，主芽頂端優(yōu)勢明顯，擴繁系數(shù)也會降低，純黃或純綠葉不及時去除會在增殖過渡中隨代數(shù)增加，無效增殖芽產(chǎn)生更多，最終導致變異大，不具有母本性狀。
[0045]E、組培苗各階段培養(yǎng)條件，保證其能夠穩(wěn)定生長，尤其是植物有效光合作用光照度值、溫度值確認，避免有效光照不足導致植株玻璃化，徒長，變異等，反之則不利于后期的種植，保證生根苗具有母本特性，提升其篩苗的成活率。

【具體實施方式】
[0046]本發(fā)明的富貴榕組培快繁育苗方法，通過如下步驟實現(xiàn):
[0047]1、外植體培育
[0048]選擇具有優(yōu)良母本性狀多年生、優(yōu)良、健壯、無病蟲害的富貴榕為母株，在生長旺季4-8月份新芽萌動時先用20-200PPMM的GA3按常規(guī)用量進行葉面噴施，隔天一次共3次后，去頂芽，防止水分進入，光強控制在5-10 μ mo I.πΓ2.s4，母株停止饒肥；約10-20天后從枝條新長出小芽，待新芽長至2-5cm且芽葉片有黃綠斑即可剪下l-2cm作為外植體；
[0049]2、外植體誘導
[0050]將采集好的外植體讓其汁液流干后裝于無菌容器中，用醫(yī)用棉花沾質(zhì)量百分比為0.01-0.03%的洗潔精輕擦芽上灰塵，再用無菌水沖洗干凈后轉(zhuǎn)入凈化工作臺切去切去全部葉片或切去枝條末梢的0.5-1.0cm，用質(zhì)量百分比為1-3%的NaHClO溶液消毒3_5分鐘后，再用無菌水漂洗3-5次，每次1-3分鐘；
[0051]將漂洗好的外植體切去截面變色部分立即接種于經(jīng)滅菌好的培養(yǎng)基中進行第一代無菌材料的培養(yǎng)，此培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加有6-芐基腺嘌呤(6-BA) 0.1-5.0mg.L \ a_ 萘乙酸(NAA) 0.1-0.5mg.L \ 益培靈 0.01-2.0mg.L \ 鹿糖20-35g.L—1 和卡拉膠 6.5g.L ―1，調(diào)整 pH 值為 5.7-6.3 ；
[0052]培養(yǎng)條件:溫度26± I °C，光照 14± 1H/D，光強 10-20 μ mol.πΓ2.s—1，濕度40-65%，培養(yǎng)周期 35±3D。
[0053]經(jīng)過多次測試采用此方法培育外植體，污染相對少，外植體培養(yǎng)后褐化程度輕，可縮短后期的馴化周期，多次測試按上述方法最高無菌材料獲得率65%以上。
[0054]3、無菌材料馴化與繼代擴繁
[0055]3.1無菌材料的馴化
[0056]第一代無菌材料培養(yǎng)后當新芽葉片展開，待芽長到1mm時從芽基部切除，保留頂芽5-8_，如有叢生芽按1-3芽/團進行方向性切割，只保留芽葉片黃綠相間的芽，純黃的芽和純綠的芽淘汰；
[0057]將切割好的芽/團接種于經(jīng)滅菌好的的培養(yǎng)基中，此培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加維生素C 30-100mg.L'6-芐基腺嘌呤(6-BA) 0.1-3.0mg.L'氯吡脲(CPPU) 0.1-2.0mg.L'萘乙酸(NAA) 0.1-0.4mg.L-1、鹿糖 20_30g.L-1 和卡拉膠 6.5g.L調(diào)整pH值為5.7-6.3 ；
[0058]培養(yǎng)條件:溫度26± I °C，光照 14± 1H/D，光強 35-70 μ mol.πΓ2.s—1，濕度40-65 %，培養(yǎng)周期 30 ± 3D。
[0059]經(jīng)上述4-5次(代)馴化培養(yǎng)后，即完成馴化進入擴繁階段。
[0060]3.2無菌材料的繼代擴繁
[0061]進入擴繁階段的材料長成6-10芽/團，按2-3芽/團切害U，若團塊芽高度大于10mm，則去頂留5-8mm，只保留芽葉片黃綠相間的芽，純黃的芽和純綠的芽淘汰，將切割好的芽團接種于培養(yǎng)基中，此培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加6-芐基腺嘌呤(6-BA)0.1-3.0mg.L—1、氯吡脲(CPPU)0.01-0.1.0mg.L'萘乙酸(NAA)0.01-0.3mg.L'蔗糖20-35g.L—1和卡拉膠6.5g.L -1，調(diào)整pH值為5.7-6.3，擴繁倍率3.0-6.0。
[0062]繼代團塊切割方法以及純黃純綠芽的淘汰決定后期有效擴繁系數(shù)，如不去掉純黃或綠芽，則培養(yǎng)芽團葉色會變成純綠或純黃，這樣的芽或芽團培養(yǎng)后代所新抽芽不具有母本品種特性，如未去干凈，后代變異隨著代數(shù)增加影響其快繁效率。
[0063]培養(yǎng)條件:溫度26± I °C，光照 14± 1H/D，光強 35-70 μ mol.πΓ2.s—1，濕度40-65 %，培養(yǎng)周期30 土 。
[0064]4、壯苗生根培養(yǎng)
[0065]4.1壯苗培養(yǎng)
[0066]將經(jīng)擴繁培養(yǎng)后的芽團按3-4芽/團方向性(芽的生長方向一致性)切割后，接種到壯苗培養(yǎng)基中，壯苗培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加萘乙酸(NAA)0.1-1g.L'活性炭 0.5g.L-1、蔗糖 15-35g.L—1 和卡拉膠 6.5g.L -1，調(diào)整 pH 值為 5.7-6.3 ；
[0067]培養(yǎng)條件:溫度24±1°〇，光強14±!1/1)，光照60-12(^11101.πΓ2.s'濕度40-65%，培養(yǎng)周期25±3D。
[0068]4.2生根培養(yǎng)
[0069]當團塊上的芽長度達15-25mm、莖粗度多1mm、具有3片完整葉，按單芽(純黃和純綠芽淘汰)進行切割，切下來的單芽接種到生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加吲哚丁酸(IBA) l-3mg.L—1、萘乙酸(NAA)0.01-0.5mg.L—1、活性炭 0.Hg.L-1、蔗糖15-35g.L—1 和卡拉膠 6.5g.L ―1，調(diào)整 pH 值為 5.7-6.3 ；
[0070]培養(yǎng)條件:溫度23±1°C，光照 14±1D，光照 70-150 μ mol.πΓ2.s'濕度 40-65%,培養(yǎng)周期15±2D。
[0071]生根培養(yǎng)7-10D后長根，2周后長根率達99.5%，根數(shù)2_8條，植株高度25_55mm，植物株健壯、葉片黃綠相間即可用于種植。
[0072]5、溫室種植
[0073]將生根苗放置溫室煉苗，煉苗場所要求:光強80-160 μ mol.m_2.s_\濕度60-80%,溫度20-30°C，煉苗3-7D后取出苗，去除葉片純黃或純綠的苗，留下的苗將其上的培養(yǎng)基清洗干凈，并用800倍百菌清或多菌靈浸泡5-8分鐘進行消毒，消毒后撈起種植，基質(zhì)采用體積比為3-5:0.5-1.5的丹麥品氏泥炭土(粒度O-1Omm)和珍珠巖的混合物，種植后做好遮陰、保濕，控制溫度22-30°C，濕度80-95%，種植4_8個月，育苗成活率98%以上，變異率< 1.0% (變異是指植株主要葉片是純黃或純綠)，株高45-70mm，4片以上黃綠相間的完整植株，與品種特性一致，根系完整，達到出貨標準。
[0074]本發(fā)明上述各步驟中，MS改良培養(yǎng)基是將標準MS培養(yǎng)基中KNO3的用量改為950mg.1/1，NH4NO3的用量改為 825mg.L '
【權利要求】
1.富貴榕組培快繁育苗方法，其特征在于，富貴榕組培快繁育苗方法，通過如下步驟實現(xiàn): 一、外植體培育 選擇具有優(yōu)良母本性狀多年生、優(yōu)良、健壯、無病蟲害的富貴榕為母株，在生長旺季4-8月份新芽萌動時先用20-200PPMM的GA3按常規(guī)用量進行葉面噴施，隔天一次共3次后，去頂芽，防止水分進入，光強控制在5-10 μ mo I.πΓ2.s4，母株停止饒肥；約10-20天后從枝條新長出小芽，待新芽長至2-5cm且芽葉片有黃綠斑即可剪下l-2cm作為外植體； 二、外植體誘導 將采集好的外植體清潔漂洗后，切去全部葉片或切去枝條末梢的0.5-1.0cm，用消毒液進行消毒后，再用無菌水漂洗，然后切去截面變色部分立即接種于經(jīng)滅菌好的培養(yǎng)基中進行第一代無菌材料的培養(yǎng)，此培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加有6-芐基腺嘌呤(6-BA) 0.1-5.0mg.L \ a_ 萘乙酸(NAA) 0.1-0.5mg.L \ 益培靈 0.01-2.0mg.L \ 鹿糖20-35g.L—1 和卡拉膠 6.5g.L ―1，調(diào)整 pH 值為 5.7-6.3 ； 培養(yǎng)條件:溫度 26± I°C，光照 14+ 1H/D,光強 10-20 μ mol.m_2.s-1，濕度 40-65%，培養(yǎng)周期35±3D ； 三、無菌材料馴化與繼代擴繁 (一)無菌材料的馴化 第一代無菌材料培養(yǎng)后當新芽葉片展開，待芽長到1mm時從芽基部切除，保留頂芽5-8_，如有叢生芽按1-3芽/團進行方向性切割，只保留芽葉片黃綠相間的芽，純黃的芽和純綠的芽淘汰； 將切割好的芽/團接種于經(jīng)滅菌好的培養(yǎng)基中，此培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加維生素C 30-100mg.L_\6-芐基腺嘌呤(6-BA) 0.1-3.0mg.L-1、氯吡脲(CPPU) 0.1-2.0mg.L'萘乙酸(NAA) 0.1-0.4mg.L-1、鹿糖 20_30g.L-1 和卡拉膠 6.5g.L調(diào)整pH值為5.7-6.3 ； 培養(yǎng)條件:溫度 26± I°C，光照 14+ 1H/D,光強 35-70 μ mol.m_2.s-1，濕度 40-65%，培養(yǎng)周期30±3D ； 經(jīng)上述4-5次(代)馴化培養(yǎng)后，即完成馴化進入擴繁階段； (二)無菌材料的繼代擴繁 進入擴繁階段的材料長成6-10芽/團，按2-3芽/團切割，若團塊芽高度大于10mm，則去頂留5-8mm;只保留芽葉片黃綠相間的芽，純黃的芽和純綠的芽淘汰，將切割好的芽團接種于培養(yǎng)基中，此培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加6-芐基腺嘌呤(6-BA)0.1-3.0mg噸'氯P比脲(CPPU)0.01-0.1.0mg.L'萘乙酸(NAA)0.01-0.3mg.L'鹿糖 20_35g.I71 和卡拉膠6.5g.L-1，調(diào)整pH值為5.7-6.3，擴繁倍率3.0-6.0 ； 培養(yǎng)條件:溫度 26± I°C，光照 14+ 1H/D,光強 35-70 μ mol.m_2.s-1，濕度 40-65%，培養(yǎng)周期30土； 四、壯苗生根培養(yǎng) (一)壯苗培養(yǎng) 將經(jīng)擴繁培養(yǎng)后的芽團按3-4芽/團方向性切割后，接種到壯苗培養(yǎng)基中，壯苗培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加萘乙酸(NAA)0.1-1g.L'活性炭0.5g.L'蔗糖15_35g.Γ1和卡拉膠6.5g.L-1，調(diào)整pH值為5.7-6.3 ； 培養(yǎng)條件:溫度 24±1°C，光強 14土H/D，光照 60-120 μ mol.m_2.s-1，濕度 40-65%，培養(yǎng)周期25±3D ； (二)生根培養(yǎng) 當團塊上的芽長度達15_25mm、莖粗度多1mm、具有3片完整葉時，按單芽進行切割，切下來的單芽接種到生根培養(yǎng)基中，生根培養(yǎng)基采用MS改良培養(yǎng)基，并添加吲哚丁酸(IBA) l-3mg.L—1、萘乙酸(NAA) 0.01-0.5mg.L'活性炭 0.Hg.L'蔗糖 15_35g.卡拉膠6.5g.ΙΛ調(diào)整pH值為5.7-6.3 ； 培養(yǎng)條件:溫度 23±1°C，光照 14±1D，光照 70-150 μπιο?.m_2.s—1，濕度 40_65%，培養(yǎng)周期15±2D ； 生根培養(yǎng)7-10D后長根，2周后長根率達99.5 %，根數(shù)2_8條，植株高度25_55mm，植物株健壯、葉片黃綠相間即可用于種植； 五、溫室種植 將生根苗放置溫室煉苗，煉苗場所要求光強80-160 μ mol.m_2.s_\濕度60-80%，溫度20-30°C，煉苗3-7天后取出苗，去除葉片純黃的苗和葉片純綠的苗，留下的苗將其上的培養(yǎng)基清洗干凈并消毒后即可種植，基質(zhì)采用體積比為3-5:0.5-1.5的泥炭土和珍珠巖的混合物，種植后做好遮陰、保濕，控制溫度22-30°C，濕度80-95 %，種植4_8個月，得到株高45-70_，具有4片以上黃綠相間的完整植株，達到出貨標準； 上述各步驟中的MS改良培養(yǎng)基是將標準MS培養(yǎng)基中KN03的用量改為950mg.L—1，NH4NO3的用量改為825mg.L '
2.根據(jù)權利要求1所述的富貴榕組培快繁育苗方法，其特征在于:上述步驟二中，對外植體的清潔漂洗采用如下方式:將采集好的外植體讓其汁液流干后裝于無菌容器中，用醫(yī)用棉花沾質(zhì)量百分比為0.01-0.03%的洗潔精輕擦芽上灰塵，再用無菌水沖洗干凈。
3.根據(jù)權利要求1所述的富貴榕組培快繁育苗方法，其特征在于:上述步驟二中，切去全部葉片或切去枝條末梢的0.5-1.0cm后對外植體的消毒、漂洗采用如下方式:用質(zhì)量百分比為1-3%的NaHClO溶液消毒3_5分鐘后，再用無菌水漂洗3_5次，每次1_3分鐘。
【文檔編號】A01H4/00GK104472365SQ201410795332
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月18日 優(yōu)先權日:2014年12月18日
【發(fā)明者】李雪, 葉清梅, 黃雨花, 陳慧麗, 王肖紅, 簡麗觀, 紀超群, 朱志勇 申請人:泉州市泉美生物科技有限公司