細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型屬于生物材料保存【技術(shù)領(lǐng)域】，提供了一種細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其包括用于承載細(xì)胞組織的網(wǎng)狀載體以及用于夾持網(wǎng)狀載體的夾持件，網(wǎng)狀載體包括用于承載細(xì)胞組織的承載部以及用于與夾持件夾接的夾持部，夾持部與承載部連接，夾持件夾持于夾持部上。網(wǎng)狀載體為金屬篩網(wǎng)。夾持件包括套筒、芯桿及活塞，套筒具有筒腔且其兩端分別設(shè)有容芯桿插入筒腔的入口以及容夾持部插入的插孔，插孔的孔徑小于筒腔的內(nèi)徑，芯桿插設(shè)于筒腔內(nèi)，活塞的側(cè)壁與筒腔適配，活塞設(shè)于筒腔內(nèi)且其一端與芯桿連接；夾持部插設(shè)于插孔內(nèi)，活塞擠壓夾持部。本實(shí)用新型在冷凍和蘇醒細(xì)胞組織時(shí)具有升降溫速度快的特點(diǎn)，且其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作方便、制作成本低。
【專利說(shuō)明】細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于生物材料保存【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件。

【背景技術(shù)】
[0002]在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域通常需要采用低溫冷凍技術(shù)對(duì)生物材料進(jìn)行保存，其中，玻璃化冷凍技術(shù)在輔助生殖【技術(shù)領(lǐng)域】的應(yīng)用尤為廣泛和重要。
[0003]玻璃化冷凍技術(shù)的基本原理是使高濃度的玻璃化冷凍液/冷凍保護(hù)劑在超低溫環(huán)境下迅速降溫凝固，形成非晶體的玻璃狀固體，保存其液態(tài)時(shí)分子和離子的分布狀態(tài)。玻璃化冷凍細(xì)胞/組織通常是先對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行玻璃化冷凍液/冷凍保護(hù)劑處理，然后將其放入液氮中進(jìn)行快速降溫，使其內(nèi)部液體由液態(tài)迅速轉(zhuǎn)化為玻璃化固態(tài)，該方法除了能夠達(dá)到冷凍保護(hù)的效果外，還能夠避免細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，可顯著提高細(xì)胞/組織冷凍后的存活力和發(fā)育能力。玻璃化冷凍技術(shù)具有簡(jiǎn)單、高效、省時(shí)、安全、費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)。
[0004]近年來(lái)，卵巢組織的玻璃化冷凍已成為了研究的焦點(diǎn)。卵巢是雌性哺乳動(dòng)物生殖系統(tǒng)的重要組成部分。卵巢或卵巢組織的冷凍保存在物種保存、人類醫(yī)學(xué)、畜禽育種與繁殖等方面具有重要意義。人類卵巢組織的冷凍保存是隨著癌癥治療技術(shù)和生殖醫(yī)學(xué)的發(fā)展而發(fā)展起來(lái)的。眾所周知，隨著社會(huì)的進(jìn)步和癌癥治療技術(shù)的日趨完善，年輕女性腫瘤患者的生存率得到了很大提高，但是放療以及多數(shù)的抗腫瘤藥物治療會(huì)導(dǎo)致女性患者卵巢功能早衰及不孕。因此，在治療前進(jìn)行卵巢組織冷凍保存，待疾病緩解后再行自體移植，可以有效地保存患者的生育能力及內(nèi)分泌功能。這樣，既不耽誤癌癥治療，又可恢復(fù)患者自然生育力，而且無(wú)倫理問(wèn)題。可見，在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，冷凍卵巢組織將成為解決癌癥患者保存生育力最有希望的方案，同時(shí)，在保存女性內(nèi)分泌功能方面也具有巨大潛力。
[0005]經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，影響卵巢組織玻璃化冷凍效果的主要因素有:卵巢組織切片大小、玻璃化冷凍液/冷凍保護(hù)劑(CPA)濃度、滲透平衡時(shí)間和溫度、冷凍載體等。其中，增加冷凍保護(hù)劑(CPA)濃度可提高冷凍效率，但受生理因素限制，CPA濃度不能太高，否則會(huì)產(chǎn)生較大毒性。冷凍載體是冷凍保存時(shí)承載細(xì)胞/組織的工具，玻璃化冷凍成功的關(guān)鍵之一就是選擇合適的冷凍載體，提高冷凍速率，因此，為了提高冷凍效果，減少冷凍損傷，可以從改進(jìn)冷凍載體方面入手，以獲得較高的冷凍速率。但是，目前細(xì)胞/組織(例如卵巢組織)玻璃化冷凍承載工具還較少見，而且，在現(xiàn)有技術(shù)中，已有的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體存在升降溫速度慢、結(jié)構(gòu)復(fù)雜、操作不便、制作成本高等缺點(diǎn)。
實(shí)用新型內(nèi)容
[0006]本實(shí)用新型的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，提供了一種升降溫速度快、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作方便、制作成本低的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件。
[0007]本實(shí)用新型是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其包括用于承載細(xì)胞組織的網(wǎng)狀載體以及用于夾持所述網(wǎng)狀載體的夾持件，所述網(wǎng)狀載體包括用于承載細(xì)胞組織的承載部以及用于與所述夾持件夾接的夾持部，所述夾持部與所述承載部連接，所述夾持件夾持于所述夾持部上。
[0008]進(jìn)一步地，所述網(wǎng)狀載體的夾持部與承載部一體成型。
[0009]更進(jìn)一步地，所述夾持部連接于所述承載部的邊緣。
[0010]具體地，所述網(wǎng)狀載體包括一個(gè)所述承載部及一個(gè)所述夾持部，所述承載部及所述夾持部均呈矩形，所述夾持部連接于所述承載部的一邊上，所述網(wǎng)狀載體呈“凸”形。
[0011 ] 優(yōu)選地，所述網(wǎng)狀載體為金屬篩網(wǎng)。
[0012]進(jìn)一步地，所述夾持件包括套筒、芯桿及活塞，所述套筒具有筒腔且其兩端分別設(shè)有容所述芯桿插入所述筒腔的入口以及容所述夾持部插入的插孔，所述插孔的孔徑小于所述筒腔的內(nèi)徑，所述芯桿插設(shè)于所述筒腔內(nèi)，所述活塞的側(cè)壁與所述筒腔適配，所述活塞設(shè)于所述筒腔內(nèi)且其一端與所述芯桿連接；所述夾持部插設(shè)于所述插孔內(nèi)，所述活塞擠壓所述夾持部。
[0013]更進(jìn)一步地，所述活塞的另一端設(shè)有側(cè)壁與所述插孔的孔壁適配的凸起，所述凸起插設(shè)于所述插孔內(nèi)且擠壓所述夾持部，所述夾持部夾設(shè)于所述凸起與所述插孔的孔壁之間。
[0014]優(yōu)選地，所述活塞的側(cè)面設(shè)有環(huán)壁溝槽。
[0015]特別地，所述套筒設(shè)有所述插孔的一端呈漏斗狀，所述活塞設(shè)有所述凸起的一端呈與所述漏斗狀適配的錐臺(tái)狀。
[0016]具體地，所述網(wǎng)狀載體為金屬篩網(wǎng)。
[0017]本實(shí)用新型具有以下技術(shù)效果:
[0018]本實(shí)用新型通過(guò)選用網(wǎng)狀載體，使得細(xì)胞組織在投入液氮進(jìn)行玻璃化冷凍前，能夠使用紗布在網(wǎng)狀載體的底部網(wǎng)格及其周邊迅速吸走附在細(xì)胞組織上的液體(冷凍液/冷凍保護(hù)劑)，保證細(xì)胞組織在投入液氮后能夠迅速有效地降溫，達(dá)到玻璃化冷凍的效果。另夕卜，本實(shí)用新型采用夾持件對(duì)網(wǎng)狀載體進(jìn)行夾持，使得操作人員可以通過(guò)夾持件間接操作網(wǎng)狀載體，避免人手直接接觸網(wǎng)狀載體而使細(xì)胞組織受污染。同時(shí)，由于網(wǎng)狀載體專門設(shè)置了夾持部，從而保證夾持件能夠準(zhǔn)確穩(wěn)固地夾持和輕易地松放網(wǎng)狀載體。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0019]圖1為本實(shí)用新實(shí)施例中夾持件的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0020]圖2為本實(shí)用新實(shí)施例中網(wǎng)狀載體的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0021]圖3為本實(shí)用新實(shí)施例中細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件的示意圖，其中，夾持件未夾持網(wǎng)狀載體；
[0022]圖4為本實(shí)用新實(shí)施例中細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件的另一狀態(tài)示意圖，其中，夾持件已夾持網(wǎng)狀載體。

【具體實(shí)施方式】
[0023]為了使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本實(shí)用新型，并不用于限定本實(shí)用新型。
[0024]參見圖3與圖4，本實(shí)用新型實(shí)施例提供了一種細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其包括用于承載細(xì)胞組織的網(wǎng)狀載體I以及用于夾持所述網(wǎng)狀載體I的夾持件2，參見圖2，所述網(wǎng)狀載體I包括用于承載細(xì)胞組織的承載部11以及用于與所述夾持件2夾接的夾持部12，所述夾持部12與所述承載部11連接，所述夾持件2夾持于所述夾持部12上。
[0025]對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行玻璃化冷凍的過(guò)程中，需要先對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行清洗和浸泡，清洗和浸泡完畢的細(xì)胞/組織放置于網(wǎng)狀載體I的承載部11上，然后使用無(wú)菌紗布吸走細(xì)胞/組織周邊的液體(冷凍液/冷凍保護(hù)劑)，接著立即將該承載有細(xì)胞/組織的網(wǎng)狀載體I置入液氮中，使其迅速降溫進(jìn)行玻璃化冷凍，再將網(wǎng)狀載體I及細(xì)胞組織一并移入保存容器(例如離心管)中，最后將保存容器放入液氮罐中，進(jìn)行長(zhǎng)期保存。需要指出的是，本實(shí)用新型所稱“細(xì)胞組織”實(shí)際上包括細(xì)胞、組織、器官等生物材料，而不僅限于細(xì)胞或者組織。在本【具體實(shí)施方式】中為了更清楚明了地說(shuō)明“細(xì)胞組織”不僅限于細(xì)胞或者組織，還出現(xiàn)若干“細(xì)胞/組織”一詞，該詞的含義實(shí)際與“細(xì)胞組織”等同，其同樣包括細(xì)胞、組織、器官等生物材料。
[0026]本實(shí)用新型實(shí)施例通過(guò)選用網(wǎng)狀載體1，使得細(xì)胞組織在投入液氮進(jìn)行玻璃化冷凍前，能夠使用紗布在網(wǎng)狀載體I的底部網(wǎng)格及其周邊迅速吸走附在細(xì)胞組織上的液體(冷凍液/冷凍保護(hù)劑)，保證細(xì)胞組織在投入液氮后能夠迅速有效地降溫，達(dá)到玻璃化冷凍的效果。另外，本實(shí)用新型采用夾持件2對(duì)網(wǎng)狀載體I進(jìn)行夾持，使得操作人員可以通過(guò)夾持件2間接操作網(wǎng)狀載體1，避免人手直接接觸網(wǎng)狀載體I而使細(xì)胞組織受污染。同時(shí)，由于網(wǎng)狀載體I專門設(shè)置了夾持部12，從而保證夾持件2能夠準(zhǔn)確穩(wěn)固地夾持和輕易地松放網(wǎng)狀載體I。
[0027]參見圖2，為了便于網(wǎng)狀載體I的制作，本實(shí)用新型實(shí)施例中的所述網(wǎng)狀載體I的夾持部12與承載部11可以一體成型。一體成型的網(wǎng)狀載體1，還可保證夾持部12與承載部11之間能夠穩(wěn)固連接。
[0028]具體地，所述夾持部12連接于所述承載部11的邊緣，這樣的結(jié)構(gòu)不但能夠便于網(wǎng)狀載體I的制作，而且還便于夾持件2對(duì)其的操作。
[0029]繼續(xù)參見圖2，作為本實(shí)用新型關(guān)于所述網(wǎng)狀載體I的一種實(shí)施方式，所述網(wǎng)狀載體I包括一個(gè)所述承載部11及一個(gè)所述夾持部12，所述承載部11及所述夾持部12均呈矩形，所述夾持部12連接于所述承載部11的一邊上，所述網(wǎng)狀載體I呈“凸”形。上述形狀的網(wǎng)狀載體1，結(jié)構(gòu)形狀簡(jiǎn)單，便于制作，而且還便于多塊網(wǎng)狀載體I的疊置。具體地，在本實(shí)施例中，承載部11的長(zhǎng)度可為lcm-5cm，寬度可為0.5cm_2cm ;夾持部12的長(zhǎng)度可為0.5cm-l.5cm,寬度可為0.lcm-0.2cm ;夾持部12位于承載部11寬邊的1/2處。當(dāng)然，承載部11及夾持部12的大小還可根據(jù)細(xì)胞/組織切塊的大小具體而定。
[0030]作為本實(shí)用新型關(guān)于所述網(wǎng)狀載體I的一種優(yōu)選實(shí)施方式，所述網(wǎng)狀載體I為金屬篩網(wǎng)。在本實(shí)用新型實(shí)施例中，網(wǎng)狀載體I由金屬篩網(wǎng)剪切而成，其制作非常簡(jiǎn)易，而且，經(jīng)過(guò)相同模型下不同材質(zhì)的冷凍速率測(cè)試，得出如下不同材質(zhì)的冷凍速率排序:金〉銅〉鐵>玻璃〉石英〉聚氯乙烯，可見，本實(shí)施例選用金屬篩網(wǎng)制作網(wǎng)狀載體1，在相同條件下，可顯著提高細(xì)胞/組織的玻璃化冷凍速率。在解凍復(fù)蘇細(xì)胞/組織的過(guò)程中，由于金屬篩網(wǎng)具有柔韌性，其可加快細(xì)胞/組織的復(fù)蘇。另外，金屬篩網(wǎng)還具有取材方便、價(jià)格便宜(每平方米約為1.0元)、可滅菌、可重復(fù)使用等優(yōu)點(diǎn)。[0031 ] 參見圖1，所述夾持件2包括套筒21、芯桿22及活塞23，所述套筒21具有筒腔211且其兩端分別設(shè)有容所述芯桿22插入所述筒腔211的入口 212以及容所述夾持部12插入的插孔213，所述插孔213的孔徑小于所述筒腔211的內(nèi)徑，所述芯桿22插設(shè)于所述筒腔211內(nèi)，所述活塞23的側(cè)壁與所述筒腔211適配，所述活塞23設(shè)于所述筒腔211內(nèi)且其一端與所述芯桿22連接；所述夾持部12插設(shè)于所述插孔213內(nèi)，所述活塞23擠壓所述夾持部12。夾持件2在夾持網(wǎng)狀載體I前，先稍微往入口 212外拉拔芯桿22，使活塞23前端留有一定間隙，接著將網(wǎng)狀載體I的夾持部12插入插孔213中，然后再往套筒21的筒腔211內(nèi)推壓芯桿22，使活塞23擠壓夾持部12，夾持部12被夾置于活塞23與套筒21內(nèi)壁之間，實(shí)現(xiàn)夾持件2對(duì)網(wǎng)狀載體I的夾持。該夾持件2不但便于夾持網(wǎng)狀載體1，而且還便于松放網(wǎng)狀載體I，有效提高本實(shí)用新型的操作效率，降低操作難度。在本實(shí)施例中，夾持件2可為塑料材料，其成本低廉(約為0.2元)。另外，套筒21的側(cè)壁還可用于貼附標(biāo)記和標(biāo)簽，用于識(shí)別不同夾持件2。
[0032]具體地，所述活塞23的另一端設(shè)有側(cè)壁與所述插孔213的孔壁適配的凸起231，所述凸起231插設(shè)于所述插孔213內(nèi)且擠壓所述夾持部12，所述夾持部12夾設(shè)于所述凸起231與所述插孔213的孔壁之間。凸起231的設(shè)置，可將夾持部12夾置于凸起231與插孔213的孔壁之間，進(jìn)一步穩(wěn)固夾持網(wǎng)狀載體I。
[0033]繼續(xù)參見圖1，所述活塞23的側(cè)面設(shè)有環(huán)壁溝槽232?？梢岳斫?，活塞23實(shí)際上呈兩頭大、中間小的啞鈴狀，這樣，可以減小活塞23側(cè)壁與筒腔211內(nèi)壁之間的接觸面積，減小其相對(duì)摩擦力，使得活塞23能夠在筒腔211內(nèi)更靈活地滑動(dòng)，另外，該結(jié)構(gòu)還可以保證活塞23及芯桿22能夠沿套筒21的軸向準(zhǔn)確平穩(wěn)滑動(dòng)。
[0034]具體地，所述套筒21設(shè)有所述插孔213的一端呈漏斗狀，所述活塞23設(shè)有所述凸起231的一端呈與所述漏斗狀適配的錐臺(tái)狀。漏斗狀與錐臺(tái)狀能夠緊密配合，加大活塞23前端與筒腔211內(nèi)壁之間的接觸面積，可更完全地?cái)D出筒腔211內(nèi)的氣體，可更穩(wěn)固地加壓夾持網(wǎng)狀載體I。
[0035]可以理解，本實(shí)施例中的夾持件2實(shí)際上是一個(gè)類似注射器的構(gòu)件，在實(shí)施本實(shí)用新型時(shí)，實(shí)際上可以選用注射器作為夾持件2，在本實(shí)施例中推薦使用lml、2ml及5ml的注射器。選用一次性注射器作為夾持件2具有無(wú)菌衛(wèi)生等優(yōu)點(diǎn)。
[0036]本實(shí)用新型實(shí)施例所提供的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件是由以下步驟制作而成的:
[0037]選用一次性無(wú)菌注射器(Iml)，打開包裝，去掉注射器針頭及筒帽(管帽)，作為夾持件2 ；
[0038]選用不銹鋼細(xì)胞篩網(wǎng)(100目)，將其剪切為圖2所示的形狀，作為網(wǎng)狀載體I ;
[0039]稍微拉動(dòng)注射器的芯桿22，使活塞23的前端留出一定間隙；
[0040]將網(wǎng)狀載體I的夾持部12插入注射器的乳頭(即插孔213)內(nèi)，并使其緊貼內(nèi)壁；
[0041]推壓芯桿22，使活塞23將夾持部12擠壓在內(nèi)壁上，形成細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件。
[0042]可選地，若欲使夾持件2與網(wǎng)狀載體I之間永久連接，在上述步驟的基礎(chǔ)上，可增加以下步驟:
[0043]將注射器的乳頭(即插孔213)在火焰上熔融，再用鉗子壓封，形成熔合連接模式的載體套件。
[0044]需要說(shuō)明的是，上述制作方法僅為細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件的一種具體制作方式而已，該方法并不是制作本實(shí)用新型的唯一方法，該方法更不用于限制本實(shí)用新型。
[0045]本實(shí)用新型實(shí)施例還提供了細(xì)胞/組織玻璃化冷凍的方法，該方法使用了上述細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件。本領(lǐng)域技術(shù)人員通過(guò)閱讀本方法，可更清楚明白地理解細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件的使用方法及其技術(shù)效果。
[0046]上述方法需要準(zhǔn)備以下化學(xué)液體:
[0047]組織潤(rùn)洗液:DPBS+雙抗；
[0048]冷凍平衡液(ES): 10%乙二醇+10% 二甲基亞砜+20%血清替代物+M199+!fepes ；
[0049]玻璃化冷凍液(VS):20%乙二醇+20%二甲基亞砜+0.5M蔗糖+20%血清替代物+M199+Hepes ；
[0050]復(fù)蘇液(Tl溶液):1.0M蔗糖+20%血清替代物+M199+Hepes ；
[0051]復(fù)蘇液(T2溶液):0.5M蔗糖+20%血清替代物+M199+Hepes ；
[0052]復(fù)蘇液(T3溶液):0.25M蔗糖+20%血清替代物+M199+Hepes ；
[0053]復(fù)蘇液(T4溶液):20%血清替代物+M199+!fepes。
[0054]作為上述方法的一種實(shí)施方式，該方法中選用雌性C57小鼠卵巢組織作為玻璃化冷凍的對(duì)象。
[0055]上述細(xì)胞/組織玻璃化冷凍的方法包括以下步驟:
[0056]用環(huán)氧乙烷熏蒸法對(duì)細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件進(jìn)行消毒滅菌；
[0057]將小鼠卵巢組織在組織潤(rùn)洗液中清洗3-4遍；
[0058]將小鼠卵巢組織對(duì)半切塊，隨機(jī)分為A、B兩組，其中，A組作為組織學(xué)鑒定對(duì)象，B組作為玻璃化冷凍對(duì)象；
[0059]將A組放入4%多聚甲醛中，浸泡48h，做組織學(xué)鑒定；
[0060]在室溫下，將B組卵巢組織塊在冷凍平衡液(ES)中浸泡15min ；
[0061]將B組卵巢組織塊移入玻璃化冷凍液(VS)中浸泡1min ；
[0062]將B組卵巢組織塊移到網(wǎng)狀載體I的承載部11上；
[0063]用一次性無(wú)菌紗布沿網(wǎng)狀載體I下端吸走多余的玻璃化冷凍液(VS)；
[0064]將B組卵巢組織塊及網(wǎng)狀載體I置入液氮中；
[0065]在液氮中通過(guò)細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件的夾持件2將網(wǎng)狀載體I及B組卵巢組織塊移入保存容器(例如離心管)中；
[0066]將保存容器移入液氮罐中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。
[0067]值得注意的是，細(xì)胞/組織玻璃化冷凍的方法同樣是僅用于說(shuō)明細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件的使用方法及其技術(shù)效果，并不用于限定細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件。
[0068]本實(shí)施例還提供細(xì)胞/組織解凍復(fù)蘇的方法，該方法對(duì)上述已玻璃化冷凍的B組卵巢組織塊進(jìn)行解凍蘇醒，其包括以下步驟:
[0069]通過(guò)細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件的夾持件2從液氮中取出承載有B組卵巢組織塊的網(wǎng)狀載體I，并迅速將之移入Tl溶液(37°C )中，浸泡Imin ；
[0070]依次將承載有B組卵巢組織塊的網(wǎng)狀載體I移入T2、T3和T4溶液中，各浸泡5min ；
[0071]用組織潤(rùn)洗液清洗2-3遍，完成細(xì)胞/組織的解凍蘇醒。
[0072]同樣道理，上述細(xì)胞/組織解凍蘇醒的方法同樣是僅用于說(shuō)明細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件的使用方法及其技術(shù)效果，并不用于限定細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件。
[0073]解凍蘇醒后的B組卵巢組織塊移入4%多聚甲醛中浸泡48h，做組織學(xué)鑒定，經(jīng)對(duì)t匕，B組卵巢組織塊與A組卵巢組織塊并無(wú)差異，其冷凍組織存活率較好。
[0074]本實(shí)施例中的玻璃化冷凍方法和解凍復(fù)蘇方法不但適用于小鼠卵巢組織，而且還適用于女性卵巢組織及其他細(xì)胞、組織和器官等生物材料。同理，細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件不但適用于小鼠卵巢組織，而且還適用于女性卵巢組織及其他細(xì)胞、組織和器官等生物材料。
[0075]以上所述僅為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本實(shí)用新型，凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換或改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其特征在于:包括用于承載細(xì)胞組織的網(wǎng)狀載體以及用于夾持所述網(wǎng)狀載體的夾持件，所述網(wǎng)狀載體包括用于承載細(xì)胞組織的承載部以及用于與所述夾持件夾接的夾持部，所述夾持部與所述承載部連接，所述夾持件夾持于所述夾持部上。
2.如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其特征在于:所述網(wǎng)狀載體的夾持部與承載部一體成型。
3.如權(quán)利要求2所述的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其特征在于:所述夾持部連接于所述承載部的邊緣。
4.如權(quán)利要求3所述的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其特征在于:所述網(wǎng)狀載體包括一個(gè)所述承載部及一個(gè)所述夾持部，所述承載部及所述夾持部均呈矩形，所述夾持部連接于所述承載部的一邊上，所述網(wǎng)狀載體呈“凸”形。
5.如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其特征在于:所述網(wǎng)狀載體為金屬篩網(wǎng)。
6.如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其特征在于:所述夾持件包括套筒、芯桿及活塞，所述套筒具有筒腔且其兩端分別設(shè)有容所述芯桿插入所述筒腔的入口以及容所述夾持部插入的插孔，所述插孔的孔徑小于所述筒腔的內(nèi)徑，所述芯桿插設(shè)于所述筒腔內(nèi)，所述活塞的側(cè)壁與所述筒腔適配，所述活塞設(shè)于所述筒腔內(nèi)且其一端與所述芯桿連接；所述夾持部插設(shè)于所述插孔內(nèi)，所述活塞擠壓所述夾持部。
7.如權(quán)利要求6所述的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其特征在于:所述活塞的另一端設(shè)有側(cè)壁與所述插孔的孔壁適配的凸起，所述凸起插設(shè)于所述插孔內(nèi)且擠壓所述夾持部，所述夾持部夾設(shè)于所述凸起與所述插孔的孔壁之間。
8.如權(quán)利要求7所述的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其特征在于:所述活塞的側(cè)面設(shè)有環(huán)壁溝槽。
9.如權(quán)利要求8所述的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其特征在于:所述套筒設(shè)有所述插孔的一端呈漏斗狀，所述活塞設(shè)有所述凸起的一端呈與所述漏斗狀適配的錐臺(tái)狀。
10.如權(quán)利要求6所述的細(xì)胞組織玻璃化冷凍載體套件，其特征在于:所述網(wǎng)狀載體為金屬篩網(wǎng)。
【文檔編號(hào)】A01N1/02GK203985779SQ201420380256
【公開日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2014年7月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月10日
【發(fā)明者】葛玉萍, 商周春, 王全磊, 董國(guó)藝, 劉聰, 吳亮 申請(qǐng)人:深圳華大基因科技有限公司