本發(fā)明屬于花卉栽培繁殖領(lǐng)域，尤其涉及非洲紫羅蘭的組織培養(yǎng)快繁方法。
背景技術(shù)：
非洲紫羅蘭(Saintpaulia ionantha)又名非洲堇、圣包羅花，為苦苣苔科非洲堇屬多年生草本常綠宿根花卉，此花美麗非凡，品種繁多，有的高雅純潔，有的繽紛綺麗，有的夢幻多彩，有的妖嬈迷人，有的熱烈燦爛，有“室內(nèi)花卉皇后”之稱，也被種植者親切的稱為室內(nèi)小精靈。
非洲紫羅蘭在亞洲的日本和韓國早已風(fēng)靡，每年對非洲紫羅蘭有著大量的需要，但市場上非洲紫羅蘭品種和數(shù)量很少，國內(nèi)非洲紫羅蘭的品種和產(chǎn)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場需要，因此，利用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行非洲紫羅蘭離體快速繁殖，短期內(nèi)生產(chǎn)出大量的優(yōu)質(zhì)種苗，實現(xiàn)工廠化規(guī)?；唐飞a(chǎn)具有重要意義。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明旨在提出非洲紫羅蘭的組織培養(yǎng)快繁方法，通過用白砂糖或綿白糖代替常規(guī)組織培養(yǎng)使用的蔗糖，使用自來水作為水源替代常規(guī)組織培養(yǎng)使用的蒸餾水和純凈水，提高非洲紫羅蘭組織培養(yǎng)快繁生產(chǎn)的經(jīng)濟效益，降低生產(chǎn)成本。
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的：非洲紫羅蘭的組織培養(yǎng)快繁方法，包括初代培養(yǎng)、不定芽繼代增殖培養(yǎng)、壯苗生根培養(yǎng)、試管苗的馴化移栽步驟；
(1)初代培養(yǎng)，以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，使用自來水作為水源，分 別加入0.2mg/L的NAA、0.4mg/L的6-BA、15g/L的白砂糖或綿白糖、6.3g/L的瓊脂，剪取非洲紫羅蘭葉片，用流動水沖洗后，在超凈工作臺中進(jìn)行表面滅菌，然后用無菌水沖洗5-6次，將表面滅菌后的葉片剪切成1cm2的葉塊，葉表面向上接入培養(yǎng)基，培養(yǎng)30天；
(2)不定芽繼代增殖培養(yǎng)，以MS為基本培養(yǎng)基，使用自來水作為水源，添加0.3mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、15g/L的白砂糖或綿白糖、6.3g/L的瓊脂，將初代培養(yǎng)獲得的不定芽，接入培養(yǎng)基，培養(yǎng)20-30天；
(3)壯苗生根培養(yǎng)，以1/2MS為基本培養(yǎng)基，使用自來水作為水源，添加0.1mg/L的NAA、15g/L的白砂糖或綿白糖、6.3g/L的瓊脂，將繼代培養(yǎng)的芽苗接種至壯苗生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)50天；
(4)試管苗的馴化移栽，當(dāng)壯苗生根后出現(xiàn)有3-5條根時，將生根試管苗移至溫室期煉苗3-7天，再開瓶煉苗1-2天，洗去所粘附的培養(yǎng)基，移植于蛭石、珍珠巖、腐葉土比例為1：1：1的基質(zhì)中，覆膜控溫保濕。
作為優(yōu)選的，步驟(1)-(3)的培養(yǎng)條件：溫度為25±2℃，光照為2000Lx。
作為優(yōu)選的，步驟(4)管理期間要多噴水、少澆水，溫度保持在20-25℃，相對溫度保持在80-95％，基質(zhì)保持濕潤；7-10天后將塑料布逐漸打開，待長出新根、葉展達(dá)2cm時，或3周后定植于盆中，進(jìn)行常規(guī)管理；移栽場所的溫度宜在20℃左右，幼苗不宜受到直射陽光。
相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明所述的非洲紫羅蘭的組培快繁方法，以白砂糖或綿白糖代替常規(guī)組織培養(yǎng)使用的蔗糖，使用自來水作為水源替代常規(guī)組織培養(yǎng)使用的蒸餾水和純凈水，繁殖速度快，易于操作，可實現(xiàn)工廠化、規(guī)?；a(chǎn)，大大降低生產(chǎn)成本，提高非洲紫羅蘭組織培養(yǎng)快繁生產(chǎn)的經(jīng)濟效益。
具體實施方式
需要說明的是，在不沖突的情況下，本發(fā)明中的實施例及實施例中的特征可以相互組合。
下面將結(jié)合實施例來詳細(xì)說明本發(fā)明。
實施例一
非洲紫羅蘭的組織培養(yǎng)快繁方法，包括初代培養(yǎng)、不定芽繼代增殖培養(yǎng)、壯苗生根培養(yǎng)及試管苗的馴化移栽步驟。
非洲紫羅蘭的快繁方法步驟為(1)初代培養(yǎng)，以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，使用自來水作為水源，加入0.2mg/L的NAA、0.4mg/L的6-BA、15g/L的白砂糖或綿白糖、6.3g/L的瓊脂，剪取非洲紫羅蘭葉片，用流動水沖洗40min，在超凈工作臺中進(jìn)行表面滅菌。表面滅菌采用0.1％的HgCl2浸泡6min，然后用無菌水沖洗5-6次。
將表面滅菌后葉片在無菌培養(yǎng)皿中剪切成1cm2帶主葉脈的葉塊，葉表面向上接入培養(yǎng)基，使葉塊貼合于培養(yǎng)基表面。經(jīng)過30天培養(yǎng)后，非洲紫羅蘭葉片不定芽誘導(dǎo)率可達(dá)84％，培養(yǎng)條件為溫度25±2℃，光照2000Lx，培養(yǎng)50天誘導(dǎo)率可達(dá)90％以上。
(2)不定芽繼代增殖培養(yǎng)，MS為基本培養(yǎng)基，使用自來水作為水源，添加0.3mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、15g/L的白砂糖或綿白糖、6.3g/L的瓊脂，將初代培養(yǎng)獲得的不定芽接入培養(yǎng)基，培養(yǎng)20-30天后，新芽分化率達(dá)到95.24％，增殖倍數(shù)達(dá)到5.42，培養(yǎng)50-60天增殖倍數(shù)達(dá)到8.5以上，培養(yǎng)條件為溫度25±2℃，光照2000Lx。
(3)壯苗生根培養(yǎng)，以繼代增殖培養(yǎng)獲得的芽苗為材料；1/2MS為基本培養(yǎng)基，使用自來水作為水源，添加0.1mg/L的NAA、15g/L的白砂糖或綿白糖、6.3g/L的瓊脂，將芽苗接種至壯苗生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)50天后，生根率達(dá)到95.83％，培養(yǎng)條件為溫度25±2℃，光照2000Lx。
(4)試管苗的馴化移栽，待生根試管苗長有3-5條根時，即可進(jìn)行煉 苗移栽，將生根試管苗移至溫室期煉苗3-7天，再開瓶煉苗1-2天，將苗洗去所粘附的培養(yǎng)基，移植于蛭石、珍珠巖、腐葉土比例為1：1：1的基質(zhì)中，覆膜控溫保濕。
管理期間要多噴水，少澆水，溫度20-25℃，相對溫度保持在80-95％，基質(zhì)保持濕潤，7-10天后將塑料布逐漸打開，待長出新根、葉展達(dá)2cm時或3周后定植于盆中，進(jìn)行常規(guī)管理，移栽場所的溫度宜在20℃左右，幼苗不宜受到陽光直射，成活率在95％以上。
實施例二：效果試驗
將常規(guī)方法和實施例一進(jìn)行對比，實施例一使用一片非洲紫羅蘭葉片一年內(nèi)即可繁殖種苗380萬株，定植3-4個月后即可開花，且花期同步，實施例一與傳統(tǒng)方法相比可縮短繁育時間半年以上；以一年生產(chǎn)15-30萬株非洲紫羅蘭為例，每年可獲得經(jīng)濟效益97.5-195萬元，與傳統(tǒng)方法相比可節(jié)約成本20萬元以上。
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。