本發(fā)明涉及組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種葡萄的組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)：

葡萄是廣受人們歡迎的水果，可直接食用，還可以做成葡萄干、葡萄酒等。葡萄的繁殖是葡萄種植中非常關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，目前，葡萄的繁殖方法主要是生物學(xué)的方法，包括扦插繁殖和嫁接繁殖。傳統(tǒng)的繁殖方法周期非常的長(zhǎng)，成活率也不理想，因此，有必要提供一種高效快速的葡萄的繁殖方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明目的：針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供了一種葡萄的組織培養(yǎng)方法，繁殖系數(shù)高。

一種葡萄的組織培養(yǎng)方法，包括：

1)挑選生長(zhǎng)健壯、無病蟲害的葡萄植株，取當(dāng)年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的葉子，留取4cm長(zhǎng)的帶芽的莖段；

2)步驟1)取得的莖段用流水沖洗20分鐘，然后用75％的酒精中消毒30s后，再用0.2％的升汞消毒5min，最后用無菌水沖洗三次，每次30s；

3)將消毒后的莖段剪取2cm的帶芽莖段接種在配方為MS+GA₃0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L瓊脂的培養(yǎng)基上，25℃光照培養(yǎng)，45天左右分化成2cm左右的小苗，再將小苗接種到配方為MS+GA₃0.3mg/L+6-BA0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L瓊脂的培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，溫度為25℃，每天光照10個(gè)小時(shí)，50天后形成叢生苗；

4)取增殖培養(yǎng)后的小苗，對(duì)根部進(jìn)行修剪后接種到配方為1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L瓊脂的培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，溫度為25℃。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明葡萄的組織培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單、高效，大大縮短了繁殖周期，繁殖系數(shù)高。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡明本發(fā)明，應(yīng)理解這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明的各種等價(jià)形式的修改均落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求所限定的范圍。

實(shí)施例1

葡萄的組織培養(yǎng)方法，具體步驟如下：

(1)于每年的3月份，挑選生長(zhǎng)健壯、無病蟲害的“巨峰”葡萄植株，取 當(dāng)年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的葉子，留取4cm長(zhǎng)的帶芽的莖段。

(2)取得的莖段用流水沖洗20分鐘，再在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行消毒處理，消毒時(shí)，將莖段于75％的酒精中浸泡30s后，再用0.2％的升汞浸泡5min，浸泡結(jié)束后，再用無菌水沖洗三次，每次30s。

(3)將消毒后的莖段簡(jiǎn)單修剪后，留取2cm左右的帶芽莖段接種在培養(yǎng)基(MS+GA₃0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L瓊脂)上，25℃光照培養(yǎng)，45天左右分化成2cm左右的小苗，再將小苗接種到增殖培養(yǎng)基(MS+GA₃0.3mg/L+6-BA0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L瓊脂)上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，溫度為25℃，每天光照10個(gè)小時(shí)，50天后形成叢生苗。增殖系數(shù)為4.9。

(4)取增殖培養(yǎng)后的小苗，對(duì)根部進(jìn)行修剪后接種到生根培養(yǎng)基(1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L瓊脂)上進(jìn)行生根培養(yǎng)，溫度為25℃，一般15天左右生根，生根率可達(dá)95％。

實(shí)施例2

葡萄的組織培養(yǎng)方法，具體步驟如下：

(1)于每年的3月份，挑選生長(zhǎng)健壯、無病蟲害的“巨峰”葡萄植株，取當(dāng)年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的葉子，留取4cm長(zhǎng)的帶芽的莖段。

(2)取得的莖段用流水沖洗20分鐘，再在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行消毒處理，消毒時(shí)，將莖段于75％的酒精中浸泡30s后，再置于0.2％的升汞中浸泡5min，浸泡結(jié)束后，再用無菌水沖洗三次，每次30s。

(3)將消毒后的莖段簡(jiǎn)單修剪后，留取2cm左右的帶芽莖段接種在培養(yǎng)基(MS+GA₃0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L瓊脂)上，25℃光照培養(yǎng)，，45天左右分化成2cm左右的小苗，再將小苗接種到增殖培養(yǎng)基(MS+GA₃0.3mg/L+6-BA0.6mg/L+IBA0.3mg/L+30g/L蔗糖+10g/L瓊脂)上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，溫度為25℃，每天光照10個(gè)小時(shí)，50天后形成叢生苗。增殖系數(shù)為5.3。

(4)取增殖培養(yǎng)后的小苗，對(duì)根部進(jìn)行修剪后接種到生根培養(yǎng)基(1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L瓊脂)上進(jìn)行生根培養(yǎng)，溫度為25℃，一般15天左右生根，生根率可達(dá)95％。