本發(fā)明涉及中藥材人工種植技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種通過根尖培育良種玄參的方法。

背景技術(shù)：

玄參，又叫元參、浙玄參、黑參，為玄參科植物，拉丁名為FigwortRoot。主治:溫熱病熱和營血、身熱、煩渴、舌絳、發(fā)斑、骨蒸勞嗽、虛煩不寤、津傷便秘、目澀昏花、咽喉喉腫痛、瘰疬痰核、癰疽瘡毒。由于人們對該類藥物的需求不斷增長，而野生資源又不足，因此，采取人工種植的方法培育加工玄參是一種有效途徑。

人工栽培玄參有利用種子進行有性繁殖方式和利用植物細胞的全能性無性繁殖方式，無性繁殖方式能保存優(yōu)質(zhì)品種和縮短栽培時間，但是由于缺乏品種的提純復(fù)壯，多年來無性繁殖下來病毒累積嚴重，使得玄參的病蟲害發(fā)生率上升，產(chǎn)量下降。所以需要對玄參進行無害化處理，培育出良種玄參進行栽培。莖尖和根尖的分生組織中一般是無毒或僅含極低濃度的病毒粒子，利用細胞的全能性，通過莖尖或者根尖分裂分化可產(chǎn)生完整的、無病毒的植株。發(fā)明專利申請CN105309311A（申請?zhí)柺?01510747917.2）公開了一種通過莖尖培育的玄參良種繁育方法，對于通過根尖分裂分化培育的方法則沒有提及。同時，通過根尖分裂分化培育植株的方法幾乎沒有文獻記載。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種通過根尖培育良種玄參的方法，它可以解決玄參由于長期無性繁殖引起的病毒累計嚴重的問題。

為了解決上述問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：這種通過根尖培育良種玄參的方法，包括如下步驟：

A、植株篩選：在玄參成熟時或者萌芽時，選擇無病蟲害的植株；

B、預(yù)處理和消毒：取步驟A所得植株的根尖1～2cm，用清水清洗干凈，再用70%的酒精漂洗30s，然后用0.1%的HgCl2溶液滅菌3min，無菌水洗3遍及以上；

C、將步驟B所得的根尖置于顯微鏡下，用酒精浸泡后，再用灼燒冷卻的鑷子和剪刀將根尖分生區(qū)細胞切成3～7個根尖小段，再用無菌水清洗3遍及以上；

D、培育：將步驟C所得根尖小段放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)15～25天，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L +萘乙酸1.0mg/L，得到預(yù)生根，將所述預(yù)生根的根尖1～2cm切成3～7個根尖小段接入所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)15～25天，重復(fù)上述步驟至得到適當數(shù)量的預(yù)生根后，將所述預(yù)生根25～30個為一批，分批接入增殖培養(yǎng)基，所述增殖培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.5mg/L，培養(yǎng)至長出3～4 cm叢生芽；

E、將步驟D所得長葉長根的幼苗放入陽光下3～5天，取出幼苗，將其移栽至育苗床，行距5～6cm、株距5～6cm，開深3～4cm，每處栽種一株幼苗，保持育苗床濕潤；所述育苗床是由甘蔗葉作為基質(zhì)，混合有蔗糖廠濾泥和/或者魚塘淤泥、磷酸氫二鉀、花生麩、腐殖質(zhì)、硫酸錳、硫酸鋅發(fā)酵而得；當幼苗長出6～7片復(fù)葉，60%植株出現(xiàn)五出復(fù)葉時，將其移栽至大田，即可。

上述技術(shù)方案中，更具體的技術(shù)方案還可以是：所述培育階段的培養(yǎng)條件為溫度23～28℃，光照強度1500～1800LUX。

進一步的：所述育苗床的各成分比重為甘蔗葉60～75重量份、蔗糖廠濾泥和/或者魚塘淤泥20～25重量份、磷酸氫二鉀5～10重量份、腐殖質(zhì)5～10重量份、硫酸錳1～5重量份、硫酸鋅1～5重量份、花生麩1～2重量份。

由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下有益效果：

1、本發(fā)明提出了根尖培養(yǎng)的方式，獲得優(yōu)良無病毒的玄參幼苗，將其進行種植，植株生長健壯，長勢一致，病蟲害發(fā)生率只有8%左右，遠遠低于普通無性繁殖35%左右的病蟲害發(fā)生率。

2、用本發(fā)明培育的良種幼苗進行栽種，玄參的產(chǎn)量能增加30%左右，并能保持野生玄參的所有優(yōu)良特性及有效中藥成分含量。

具體實施方式

以下結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步詳述：

這種通過根尖培育玄參良種的方法如下：

A、植株篩選：在在9月底至11月上旬玄參成熟時或者3月份萌芽時，選擇無病蟲害的植株；

B、預(yù)處理和消毒：取步驟A所得植株的根尖1～2cm，用清水清洗干凈，再用70%的酒精漂洗30s，然后用0.1%的HgCl2溶液滅菌3min，無菌水洗3遍；

C、將步驟B所得的根尖置于顯微鏡下，用酒精浸泡后，再用灼燒冷卻的鑷子和剪刀將根尖分生區(qū)細胞切成5個根尖小段，再用無菌水清洗3遍；

D、培育：將步驟C所得根尖小段放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)15天，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L +萘乙酸1.0mg/L，得到預(yù)生根，將所述預(yù)生根的根尖1～2cm切成5個根尖小段接入所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)15～25天，重復(fù)上述步驟至得到適當數(shù)量的預(yù)生根后，將所述預(yù)生根30個為一批，分批接入增殖培養(yǎng)基，所述增殖培養(yǎng)基是MS+6-芐基嘌呤1.5mg/L+萘乙酸1.5mg/L，培養(yǎng)至長出3～4 cm叢生芽；

以上培養(yǎng)條件為溫度23～28℃，光照強度1500～1800LUX；

E、將步驟D所得長葉長根的幼苗放入陽光下3～5天，取出幼苗，將其移栽至育苗床，行距5～6cm、株距5～6cm，開深3～4cm，每處栽種一株幼苗，保持育苗床濕潤；所述育苗床是由甘蔗葉作為基質(zhì)，混合有濾泥、磷酸氫二鉀、腐殖質(zhì)、硫酸錳、硫酸鋅、花生麩發(fā)酵而得；其中甘蔗葉60～75重量份、魚塘淤泥20～25重量份、磷酸氫二鉀5～10重量份、腐殖質(zhì)5～10重量份、硫酸錳1～5重量份、硫酸鋅1～5重量份、花生麩1～2重量份；當幼苗長出6～7片復(fù)葉，60%植株出現(xiàn)五出復(fù)葉時，將其移栽至大田，即可。