本發(fā)明屬于花卉栽培領(lǐng)域，更具體地說，本發(fā)明涉及一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
：蝴蝶蘭，蘭科蝴蝶蘭屬，是單莖性熱帶附生蘭，分布于亞洲、大洋洲熱帶和亞熱帶地區(qū)，多生長在陰濕多霧高溫森林中的樹干和濕石上，因其花形別致，花色艷麗，開花期長，成為當今國際、國內(nèi)花卉市場上最受歡迎的花卉之一，素有“蘭花皇后”之美稱。通過無菌播種與組織培養(yǎng)，獲得大量優(yōu)良植株，可以保持優(yōu)良品質(zhì)特征，是進行大規(guī)模商品生產(chǎn)和新品種選育的關(guān)鍵。目前蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法存在著發(fā)芽緩慢以及成苗數(shù)量不高的問題。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的問題是提供一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，包括如下步驟：（1）采種首先選取授粉后95-105天的的蝴蝶蘭果莢，所選取的果莢為外部光滑飽滿，顏色由綠轉(zhuǎn)黃；（2）接種先用稀釋的洗潔精溶液擦洗蒴果表面，然后沖洗，再用8--12%NaClO浸泡10-20min，然后在超凈工作臺上，用75%酒精消毒1-3min，并用0.05-0.15%升汞消毒3min，用無菌水沖洗2-4遍，取出蒴果放在無菌的培養(yǎng)皿中，切開蒴果將種子移入有無菌水的培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動使之分散均勻；（3）萌發(fā)采用種子無菌萌發(fā)培養(yǎng)基對種子進行萌發(fā)，接種后10-20天，胚萌發(fā)，20天后轉(zhuǎn)入半母瓶培養(yǎng)，分初代、繼代和生根培養(yǎng)3階段形成帶根小苗；（4）煉苗與移栽當小苗出現(xiàn)3-5片葉、2-4條根時即可出瓶移栽；（5）移栽介質(zhì)的選擇移栽的介質(zhì)為水苔、椰糠、磚塊和木炭的混合體為基質(zhì)，所述水苔、椰糠、磚塊和木炭的比例為0.5:0.5:0.3:1-1:1:0.5:2；（6）溫度管理在播種期、育苗期的溫度控制在20-24℃，幼苗期的溫度控制在16-18℃。優(yōu)選的，所述步驟（2）中接種的密度為200-300粒/m2。優(yōu)選的，所述步驟（3）中無菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成包括胰蛋白胨、香蕉汁、活性炭和瓊脂。優(yōu)選的，所述胰蛋白胨、香蕉汁、活性炭和瓊脂的含量分別為1-3g/l、50-150g/l、0.5-1.5g/l、8-10g/l。優(yōu)選的，所述步驟（3）中萌發(fā)的同時添加激素，所述激素的組成為細胞分裂素BA與NAA，所述BA與NAA的配比為4-6mg/l和0.04-0.06mg/l。優(yōu)選的，所述步驟（3）中萌發(fā)的同時添加有機添加物，所述有機添加物為蔗糖，所述蔗糖的濃度為2-4%。有益效果：本發(fā)明提供了一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，所述步驟接種的密度，播種密度可以產(chǎn)生“群體效應(yīng)”，從而使種子的發(fā)芽增快，所述無菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成包括胰蛋白胨、香蕉汁、活性炭和瓊脂以及配比可以提供種子生長所需要的營養(yǎng)，促進種子的萌發(fā)，所述萌發(fā)的同時添加激素，可以使成苗數(shù)量增加，所述萌發(fā)的同時添加有機添加物，所述有機添加物為蔗糖，所述蔗糖的濃度為2-4%，可以對蝴蝶蘭種子發(fā)芽、原球莖形成以及葉片生長具有促進作用。采用此種組織培養(yǎng)方法培養(yǎng)出來的蝴蝶蘭具有發(fā)芽率高以及生長優(yōu)良的優(yōu)點，市場潛力巨大，前景廣闊。具體實施方式實施例1：一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，包括如下步驟：（1）采種首先選取授粉后95天的的蝴蝶蘭果莢，所選取的果莢為外部光滑飽滿，顏色由綠轉(zhuǎn)黃；（2）接種先用稀釋的洗潔精溶液擦洗蒴果表面，然后沖洗，再用8%NaClO浸泡10min，然后在超凈工作臺上，用75%酒精消毒1min，并用0.05%升汞消毒3min，用無菌水沖洗2遍，取出蒴果放在無菌的培養(yǎng)皿中，切開蒴果將種子移入有無菌水的培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動使之分散均勻，接種的密度為200粒/m2；（3）萌發(fā)采用種子無菌萌發(fā)培養(yǎng)基對種子進行萌發(fā)，接種后10天，胚萌發(fā)，20天后轉(zhuǎn)入半母瓶培養(yǎng)，分初代、繼代和生根培養(yǎng)3階段形成帶根小苗，所述無菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成以及配比為胰蛋白胨、香蕉汁、活性炭和瓊脂的含量分別為1g/l、50g/l、0.5g/l、8g/l，所述萌發(fā)的同時添加激素，所述激素的組成為細胞分裂素BA與NAA，所述BA與NAA的配比為4mg/l和0.04mg/l，所述萌發(fā)的同時添加有機添加物，所述有機添加物為蔗糖，所述蔗糖的濃度為2%；（4）煉苗與移栽當小苗出現(xiàn)3片葉、2條根時即可出瓶移栽；（5）移栽介質(zhì)的選擇移栽的介質(zhì)為水苔、椰糠、磚塊和木炭的混合體為基質(zhì)，所述水苔、椰糠、磚塊和木炭的比例為0.5:0.5:0.3:1；（6）溫度管理在播種期、育苗期的溫度控制在20℃，幼苗期的溫度控制在16℃。實施例2：一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，包括如下步驟：（1）采種首先選取授粉后100天的的蝴蝶蘭果莢，所選取的果莢為外部光滑飽滿，顏色由綠轉(zhuǎn)黃；（2）接種先用稀釋的洗潔精溶液擦洗蒴果表面，然后沖洗，再用10%NaClO浸泡15min，然后在超凈工作臺上，用75%酒精消毒2min，并用0.10%升汞消毒3min，用無菌水沖洗3遍，取出蒴果放在無菌的培養(yǎng)皿中，切開蒴果將種子移入有無菌水的培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動使之分散均勻，接種的密度為250粒/m2；（3）萌發(fā)采用種子無菌萌發(fā)培養(yǎng)基對種子進行萌發(fā)，接種后15天，胚萌發(fā)，20天后轉(zhuǎn)入半母瓶培養(yǎng)，分初代、繼代和生根培養(yǎng)3階段形成帶根小苗，所述無菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成以及配比為胰蛋白胨、香蕉汁、活性炭和瓊脂的含量分別為2g/l、100g/l、1.0g/l、9g/l，所述萌發(fā)的同時添加激素，所述激素的組成為細胞分裂素BA與NAA，所述BA與NAA的配比為5mg/l和0.05mg/l，所述萌發(fā)的同時添加有機添加物，所述有機添加物為蔗糖，所述蔗糖的濃度為3%；（4）煉苗與移栽當小苗出現(xiàn)4片葉、3條根時即可出瓶移栽；（5）移栽介質(zhì)的選擇移栽的介質(zhì)為水苔、椰糠、磚塊和木炭的混合體為基質(zhì)，所述水苔、椰糠、磚塊和木炭的比例為0.75:0.75:0.4:1.5；（6）溫度管理在播種期、育苗期的溫度控制在22℃，幼苗期的溫度控制在18℃。實施例3：一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，包括如下步驟：（1）采種首先選取授粉后105天的的蝴蝶蘭果莢，所選取的果莢為外部光滑飽滿，顏色由綠轉(zhuǎn)黃；（2）接種先用稀釋的洗潔精溶液擦洗蒴果表面，然后沖洗，再用12%NaClO浸泡20min，然后在超凈工作臺上，用75%酒精消毒3min，并用0.15%升汞消毒3min，用無菌水沖洗4遍，取出蒴果放在無菌的培養(yǎng)皿中，切開蒴果將種子移入有無菌水的培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動使之分散均勻，接種的密度為300粒/m2；（3）萌發(fā)采用種子無菌萌發(fā)培養(yǎng)基對種子進行萌發(fā)，接種后1020天，胚萌發(fā)，20天后轉(zhuǎn)入半母瓶培養(yǎng)，分初代、繼代和生根培養(yǎng)3階段形成帶根小苗，所述無菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成以及配比為胰蛋白胨、香蕉汁、活性炭和瓊脂的含量分別為3g/l、150g/l、1.5g/l、10g/l，所述萌發(fā)的同時添加激素，所述激素的組成為細胞分裂素BA與NAA，所述BA與NAA的配比為6mg/l和0.06mg/l，所述萌發(fā)的同時添加有機添加物，所述有機添加物為蔗糖，所述蔗糖的濃度為4%；（4）煉苗與移栽當小苗出現(xiàn)5片葉、4條根時即可出瓶移栽；（5）移栽介質(zhì)的選擇移栽的介質(zhì)為水苔、椰糠、磚塊和木炭的混合體為基質(zhì)，所述水苔、椰糠、磚塊和木炭的比例為1:1:0.5:2；（6）溫度管理在播種期、育苗期的溫度控制在24℃，幼苗期的溫度控制在18℃。經(jīng)過以上方法后，分別取出樣品，測量結(jié)果如下：檢測項目實施例1實施例2實施例3現(xiàn)有指標發(fā)芽（d）3125種子萌發(fā)率（%）97999690葉片生長快快快較快根據(jù)上述表格數(shù)據(jù)可以得出，當實施例2參數(shù)時組織培養(yǎng)后的蝴蝶蘭比現(xiàn)有技術(shù)組織培養(yǎng)后的蝴蝶蘭的種子萌發(fā)率高，且發(fā)芽時間短，葉片生長比現(xiàn)有技術(shù)組織培養(yǎng)的快，此時更有利于蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)。本發(fā)明提供了一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，所述步驟接種的密度，播種密度可以產(chǎn)生“群體效應(yīng)”，從而使種子的發(fā)芽增快，所述無菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成包括胰蛋白胨、香蕉汁、活性炭和瓊脂以及配比可以提供種子生長所需要的營養(yǎng)，促進種子的萌發(fā)，所述萌發(fā)的同時添加激素，可以使成苗數(shù)量增加，所述萌發(fā)的同時添加有機添加物，所述有機添加物為蔗糖，所述蔗糖的濃度為2-4%，可以對蝴蝶蘭種子發(fā)芽、原球莖形成以及葉片生長具有促進作用。采用此種組織培養(yǎng)方法培養(yǎng)出來的蝴蝶蘭具有發(fā)芽率高以及生長優(yōu)良的優(yōu)點，市場潛力巨大，前景廣闊。以上所述僅為本發(fā)明的實施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說明書內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運用在其他相關(guān)的
技術(shù)領(lǐng)域：
，均同理包括在本發(fā)明的專利保護范圍內(nèi)。當前第1頁1 2 3