本發(fā)明涉及食用菌培育技術(shù)領域，具體而言，涉及一種工廠化黑牛肝菌栽培方法。
背景技術(shù)：
黑牛肝菌Phlebopus marginatus(Drum.ex Beak.)Wating&Greg是一種稀有的熱帶食用菌，主要分布于斯里蘭卡、越南、印度尼西亞、泰國、巴西、墨西哥、澳大利亞、新西蘭及我國云南、廣西和海南等地。黑牛肝菌品質(zhì)鮮嫩、味道鮮美、營養(yǎng)價值豐富、高蛋白、低脂肪，富含17種人體必需氨基酸及豐富的磷、鉀、鈣、鎂、鐵和鋅等人體必須的礦質(zhì)元素，是較好的健康食品并具有很好的藥用價值，深受消費者喜愛。
黑牛肝菌雖然可以離開宿主樹營腐生生活，并已經(jīng)用栽培腐生菌的方法成功培育且實現(xiàn)了工廠化栽培，但由于其腐生能力不強，比一般的腐生菌如金針菇、木耳、平菇、雙孢菇等差很多。在黑牛肝菌的栽培過程中，無論是袋栽或瓶栽，雖然每個菌袋或菌瓶都可以出很多的菇蕾，但只能長出并發(fā)育成熟的1或2個子實體，且無論子實體數(shù)量為何，其總重量差異不大。
由于黑牛肝菌特殊的生活習性，黑牛肝菌工廠化栽培存在以下問題：①培養(yǎng)料含水量偏低；②出菇面積大、出菇數(shù)量太多，但黑牛肝菌栽培基質(zhì)的營養(yǎng)只夠供給1～2個子實體長大，出菇數(shù)太多反而影響成品菇品質(zhì)；③養(yǎng)菌期及子實體生長期通風損耗了培養(yǎng)料及覆土材料中大量水分，水是營養(yǎng)運輸?shù)慕橘|(zhì)，培養(yǎng)中水分含量減少即是減少了營養(yǎng)運輸，進而影響了子實體生長，降低單菇重，嚴重影響了產(chǎn)量。因此在滿足菌絲正常生長的情況下，最大限度保持培養(yǎng)料及覆土材料的含水量，是增加子實體重量、提高產(chǎn)量的重要措施；④養(yǎng)菌期瓶口生長的爬壁菌絲，在覆土后形成早出菇，消耗營養(yǎng)且導致出菇不整齊，增加了生育管理的難度。
有鑒于此，特提出本發(fā)明。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種黑牛肝菌栽培方法以解決上述問題。
為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：
一種黑牛肝菌栽培方法，包括以下步驟：
1)、將黑牛肝菌菌種接種到菌瓶的培養(yǎng)基中進行菌絲培養(yǎng)至菌絲長滿所述培養(yǎng)基；
2)、向所述培養(yǎng)基表面覆蓋覆土材料形成覆土層，在所述菌瓶的瓶口處加蓋瓶蓋；所述瓶蓋的中間部分開孔；
3)、對所述覆土層進行保濕，避光培養(yǎng)至所述覆土層長滿菌絲；
4)、對菌絲進行培養(yǎng)使菌絲扭結(jié)、形成原基，至瓶蓋開孔處菇蕾長出；
5)、經(jīng)疏蕾后進行子實體生長期培養(yǎng)并采收。
優(yōu)選的，菌絲長滿培基后不用抹除瓶口爬壁菌絲直接進行覆土，此時覆土材料結(jié)構(gòu)松散使機械覆土運行順暢，覆土及加蓋由機械化操作連續(xù)完成，以適應工廠化栽培的效率要求。
黑牛肝菌又叫暗褐網(wǎng)柄牛肝菌，拉丁學名為Phlebopus marginatus(Drum.ex Beak.)Wating&Greg，本發(fā)明提供的栽培方法可抑制早出菇、減少出菇數(shù)量、增加培養(yǎng)基的利用率，并有利于栽培期間的保濕。
具體的，現(xiàn)有技術(shù)通常不加蓋瓶蓋，本發(fā)明加蓋后瓶蓋與瓶口緊扣在一起，瓶蓋中間開孔，方便于保持濕度，一方面加蓋后水分的蒸發(fā)量大大減少，另一方面水分從瓶蓋中間開孔處滲入覆土層，覆土材料含水量大為提高，使菌絲在含水量最適宜的覆土材料中旺盛生長；
此外，瓶蓋開孔的部分有充足的氧氣使菌絲正常生長及出菇，而被瓶蓋覆蓋的部分菌絲不能或難于扭結(jié)分化成原基及形成子實體，徹底抑制了養(yǎng)菌期瓶口爬壁菌絲形成的早出菇；
出菇僅在瓶蓋開孔處，其余料面均不能出菇，減少了出菇面積，從而減少了出菇量，提高了優(yōu)勢菇的營養(yǎng)利用率，減少了無意義的營養(yǎng)消耗，還降低疏菇人工成本。
菇蕾多自覆土層表面下土壤中生長，出菇整齊，受環(huán)境影響小。
優(yōu)選的，如上所述黑牛肝菌栽培方法，在步驟1)中，所述菌絲培養(yǎng)的培養(yǎng)條件包括：
溫度25℃～30℃，空氣濕度50％～80％，CO2濃度1500ppm～3000ppm。此條件下培養(yǎng)35～40天菌絲長滿培養(yǎng)基；
所述培養(yǎng)基的配方以重量份數(shù)計包括如下組份：木屑和/或木片40～60份、紅壤15～25份、小麥粒5～15份、谷子5～15份、米糠5～11份、玉米粉5～15份、石膏粉1～3份、MgSO40.1～0.3份，KH2PO4 0.1～0.3份、ZnSO4 1～3份。
可進入覆土階段。
優(yōu)選的，如上所述黑牛肝菌栽培方法，在步驟2)中，所述覆土材料的含水量為30％～50％，所述覆土層的厚度為2cm～5cm。
更為優(yōu)選的，本發(fā)明所采用的覆土材料選自申請?zhí)?01110355384.5的專利申請文件實施例2中提供的覆土材料，該專利申請文件的公布日為2012.05.30。
優(yōu)選的，如上所述黑牛肝菌栽培方法，在步驟2)中，瓶蓋的中間部分所開孔的直徑為4cm～6cm，減少出菇面積80％～56％。
本發(fā)明所用的菌瓶為1400ml～1800ml菌瓶，瓶口直徑9.0cm，瓶口面積63.58cm2瓶蓋開孔直徑為4.0cm～6.0cm，孔口面積19.68cm2～28.26cm2，此開孔直接減少了80％～56％的出菇面積，從而減少80％～56％的出菇量。且在此開孔直徑下，通氣量和濕度的調(diào)節(jié)都更適宜。
優(yōu)選的，如上所述黑牛肝菌栽培方法，在步驟3)中，在對所述覆土層進行保濕之前還包括：
在所述菌瓶表面蓋一層無紡布作為保濕層。
無紡布是一種非織造布，直接利用高聚物切片、短纖維或長絲通過各種纖網(wǎng)成形方法和固結(jié)技術(shù)形成的具有柔軟、透氣和平面結(jié)構(gòu)的新型纖維制品，它的特點是不產(chǎn)生纖維屑，強韌、耐用。無紡布使用時具有非常好的保濕性能。
優(yōu)選的，如上所述黑牛肝菌栽培方法，在步驟3)中，所述保濕的具體操作為：
在所述保濕層的表面噴水，保持所述覆土層濕度50％～65％，空氣濕度90％～98％。
加蓋后培養(yǎng)覆土層菌絲生長期間，每天在菌瓶表面噴水1次，水分從瓶蓋中間開孔處滲入瓶內(nèi)周圍土壤，保持覆土材料最適宜含水量50％～55％培養(yǎng)覆土層菌絲旺盛生長。一般覆土后培養(yǎng)7～8天，菌絲即可長滿覆土層，且無早出菇。
優(yōu)選的，如上所述黑牛肝菌栽培方法，在步驟4)中，所述對菌絲進行培養(yǎng)至瓶蓋開孔處菇蕾長出的培養(yǎng)條件包括：
CO2濃度1000ppm～3000ppm，溫度25℃～30℃，覆土層濕度50％～65％，空間濕度90％～98％，光照度200lx～600lx，光照時間8h～10h。
此培養(yǎng)期具體是指菌絲長滿覆土層后至舒蕾期間。
優(yōu)選的，如上所述黑牛肝菌栽培方法，在步驟5)中，所述疏蕾操作具體為：
在所述菇蕾長至菌蓋直徑1cm～3cm、柄粗1cm～2cm時疏除多余的菇蕾，留1～2個菇蕾。
優(yōu)選的，如上所述黑牛肝菌栽培方法，在步驟5)中，所述子實體生長期培養(yǎng)的培養(yǎng)條件包括：
CO2濃度800ppm～2000ppm，溫度24℃～29℃，覆土層濕度50％～65％，空間濕度80％～95％，光照度200lx～600lx，光照時間8h～10h；
停止噴水并增加通風量。
由于本發(fā)明覆土后加蓋瓶蓋，減少暴露于空氣中的料面面積，減少水分蒸發(fā)量，從而最大限度保持了培養(yǎng)料及覆土材料含水量，子實體生長期不用給栽培基質(zhì)及覆土材料補水。在現(xiàn)有技術(shù)中，子實體生長期給培養(yǎng)料及覆土材料補水的同時水分噴灑到菇體表面被菇體吸收，使菌蓋變黑、顏色加深、菇體含水量增加，菇柄發(fā)泡，中空，肉質(zhì)松軟不緊實，保鮮期短(1～2天)，只能在產(chǎn)地銷售，不能遠距離運輸。
優(yōu)選的，如上所述黑牛肝菌栽培方法，在步驟5)中，所述采收在子實體成熟度達75％～80％時進行。
當子實體菌蓋平展，蓋緣伸展或稍卷，菌管橄欖褐色，成熟度達75％～80％時及時采收，整株連柄基拔下，此時子實體肉質(zhì)緊實彈性好、柄硬，平均重90g～110g。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：
1)、本發(fā)明于瓶蓋中間開孔，至少具有以下優(yōu)點：
保證覆土材料良好的通氣性，使菌絲正常生長；
方便于補足覆土時不足的水分，覆土材料含水量從40％～45％提高至50％～65％，使菌絲在含水量最適宜的覆土材料中旺盛生長；且由于保水能力強，子實體生長期不用額外給栽培基質(zhì)及覆土材料補水，培養(yǎng)出的牛肝菌菇形好、菇體淺橄欖褐色、菌蓋表面被粉狀物、顏色鮮亮、菌柄硬、肉質(zhì)緊實、菇體含水量低(含水量85％～87％)，耐貯存(4℃～8℃冷庫條件下可貯存6-8天)；
開孔部分有充足的氧氣使菌絲正常生長及出菇，被瓶蓋覆蓋的部分菌絲不能或難于扭結(jié)分化成原基及形成子實體，徹底抑制了養(yǎng)菌期瓶口爬壁菌絲形成的早出菇；
出菇在開孔處，其余料面均不能出菇，減少了56％～80％的出菇面積，從而減少56％～80％的出菇量，進而減少營養(yǎng)消耗，降低疏菇人工成本。
2)、菇蕾多自覆土層表面下土壤中生長，出菇整齊，受環(huán)境影響小。
3)、限定了各培養(yǎng)期的培養(yǎng)條件，保證了黑牛肝菌的高產(chǎn)。
具體實施方式
下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術(shù)人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應視為限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
實施例1
一種黑牛肝菌栽培方法，包括以下步驟：
1)、接種養(yǎng)菌步驟：將預先培養(yǎng)好的黑牛肝菌菌種接種到已滅菌的瓶裝的培養(yǎng)基質(zhì)中，在溫度25℃，濕度50％，CO2濃度1500ppm的條件下進行菌絲培養(yǎng)，此條件下培養(yǎng)40天菌絲長滿培養(yǎng)基質(zhì)，可進入覆土階段。
所述培養(yǎng)基的配方以重量份數(shù)計，包括如下組份：木屑40份、紅壤25份、小麥粒15份、谷子5份、米糠11份、玉米粉5份、石膏粉1份、MgSO40.1份，KH2PO4 0.3份、ZnSO4 1份。
2)、覆土步驟：在已長滿菌絲的培養(yǎng)基的表面覆蓋覆土材料，形成覆土層，覆土材料的含水量為30％，覆土層厚2cm，隨后在瓶口加蓋瓶蓋，瓶蓋的中間部分開孔，孔直徑4cm，減少80％的出菇面積，進而減少80％的出菇量；
覆土、加蓋完成后進入出菇房培養(yǎng)菌覆土層菌絲生長，在菌瓶表面噴水，讓水分從瓶蓋中間開孔處緩慢滲入周圍土壤，保持覆土層濕度50％，空氣濕度90％，CO2濃度2000ppm，避光，培養(yǎng)6天菌絲長滿覆土層，可以進入催原基形成及催蕾階段。
3)、生育步驟：
①菌絲長滿覆土層后，在CO2濃度1000ppm，溫度25℃，空間濕度95％，光照度200lx培養(yǎng)3天，光照時間10h，菌絲扭結(jié)并形成大量原基；
②催蕾：原基形成后，在CO2濃度1000ppm，溫度26℃，空間濕度95％，光照度300lx，光照時間10h，催蕾培養(yǎng)2天，原基的頂部分化出菌蓋，形成幼蕾，出菇率98％；
③疏蕾：在子實體菌蓋直徑為1cm、柄粗1cm時疏除多余的菇蕾，可以留1～2個菇蕾；
④子實體生長：疏蕾后，降低CO2至800ppm，溫度降至25℃，控制空間濕度80％，光照度200lx，光照時間10h，保持培養(yǎng)料及覆土材料含水量50％，同時增加通風量，促進營養(yǎng)自培養(yǎng)料吸收向上輸送至子實體地上部分，增加子實體重量；
⑤采收：當子實體菌蓋平展，蓋緣伸展或稍卷，菌管橄欖褐色，成熟度達75％時及時采收，整株連柄基拔下，此時子實體肉質(zhì)緊實彈性好、柄硬。
實施例2
1)、接種養(yǎng)菌步驟：將黑牛肝菌菌種接種到已滅菌的瓶裝的培養(yǎng)基中，在溫度28℃，濕度70％，CO2濃度2500ppm進行菌絲培養(yǎng)，此條件下培養(yǎng)38天菌絲長滿培養(yǎng)基質(zhì)，可進入覆土階段。
所述培養(yǎng)基的配方以重量份數(shù)計，包括如下組份：木片60份、紅壤15份、小麥粒5份、谷子15份、米糠5份、玉米粉15份、石膏粉3份、MgSO40.3份，KH2PO4 0.1份、ZnSO43份。
2)、覆土步驟：在已長滿菌絲的培養(yǎng)基的表面覆蓋覆土材料，形成覆土層，覆土材料的含水量為42.5％，覆土層厚3cm，隨后在瓶口加蓋瓶蓋，瓶蓋的中間部分開孔，孔直徑5cm，覆土、加蓋完成后進入出菇房，在菌瓶表面噴水，讓水分從瓶蓋中間開孔處緩慢滲入周圍土壤，保持覆土層濕度60％，空氣濕度95％，避光，培養(yǎng)7天覆土層菌絲長滿。
3)、生育步驟為：
①菌絲長滿覆土層后，在CO2濃度2000ppm，溫度28℃，空間濕度95％，光照度250lx，光照時間8h，培養(yǎng)2天，菌絲扭結(jié)并形成大量原基；
②催蕾：原基形成后，在CO2濃度1500ppm，溫度27℃～29℃，空間濕度97％，光照度400lx，光照時間8h，催蕾培養(yǎng)1天，原基的頂部分化出菌蓋，形成幼蕾，出菇率98％；
③疏蕾：在子實體菌蓋直徑為2cm、柄粗1.5cm時疏除多余的菇蕾，可以留1個菇蕾；
④子實體生長：疏蕾后，降低CO2至1500ppm，溫度降至27℃，控制空間濕度90％，光照度300lx，光照時間9h，保持培養(yǎng)料及覆土材料含水量55％，同時增加通風量，促進營養(yǎng)自培養(yǎng)料吸收向上輸送至子實體地上部分，增加子實體重量；
⑤采收：當子實體菌蓋平展，蓋緣伸展或稍卷，菌管橄欖褐色，成熟度達78％時及時采收，整株連柄基拔下，此時子實體肉質(zhì)緊實彈性好、柄硬，每瓶采收的平均菇重110g。
實施例3
1)、接種養(yǎng)菌步驟：將黑牛肝菌菌種接種到已滅菌的瓶裝的培養(yǎng)基中，在溫度30℃，濕度80％，CO2濃度3000ppm進行菌絲培養(yǎng)，此條件下培養(yǎng)40天菌絲長滿培養(yǎng)基質(zhì)，可進入覆土階段。
所述培養(yǎng)基的配方以重量份數(shù)計包括如下組份：木屑20份、木片30份、紅壤20份、小麥粒10份、谷子10份、米糠7份、玉米粉10份、石膏粉2份、MgSO4 0.2份，KH2PO4 0.2份、ZnSO4 2份。
2)、覆土步驟為：在已長滿菌絲的培養(yǎng)基的表面覆蓋覆土材料，形成覆土層，覆土材料的含水量為50％，覆土層厚5cm，隨后在瓶口加蓋瓶蓋，瓶蓋的中間部分開孔，孔直徑6cm，覆土、加蓋完成后進入出菇房，在菌瓶表面噴水，讓水分從瓶蓋中間開孔處緩慢滲入周圍土壤，保持覆土層濕度65％，空氣濕度98％，避光，培養(yǎng)8天覆土層菌絲長滿。
3)、生育步驟為：
①菌絲長滿覆土層后，在CO2濃度3000ppm，溫度30℃，空間濕度98％，光照度600lx，光照時間8h，培養(yǎng)2天，菌絲扭結(jié)并形成大量原基；
②催蕾：原基形成后，在CO2濃度2500ppm，溫度30℃，空間濕度98％，光照度400lx，光照時間8h，催蕾培養(yǎng)2天，原基的頂部分化出菌蓋，形成幼蕾，出菇率98％～100％；
③疏蕾：在子實體菌蓋直徑為3cm、柄粗2cm時疏除多余的菇蕾，可以留1個菇蕾；
④子實體生長：疏蕾后，降低CO2至2000ppm，溫度降至29℃，控制空間濕度95％，光照度600lx，光照時間8h，保持培養(yǎng)料及覆土材料含水量65％，同時增加通風量，增加子實體蒸騰作用，促進營養(yǎng)自培養(yǎng)料吸收向上輸送至子實體地上部分，增加子實體重量，長大1個子實體；
⑤采收：當子實體菌蓋平展，蓋緣伸展或稍卷，菌管橄欖褐色，成熟度達80％時及時采收，整株連柄基拔下，此時子實體肉質(zhì)緊實彈性好、柄硬，每瓶采收的平均菇重115g。
實施例4
操作與實施例3一致，不同之處在于疏蕾時留2個菇蕾，長大后得到2個子實體。
實驗例
為更好地說明本發(fā)明的效果，在實施例2的基礎之上設置對比例1～3進行比較。
對照例1
接種養(yǎng)菌步驟、覆土步驟、生育步驟與實施例2基本一致，不同之處在于：覆土材料的含水量為40％，覆土層厚4cm，覆土層表面裸露于空氣中，覆土層菌絲培養(yǎng)期每天補水1次增加土壤含水量至60％，疏蕾后子實體生長期每天噴水1次以補充覆土層及基質(zhì)因通風散失的水分。
對照例2
接種養(yǎng)菌步驟、覆土步驟、生育步驟與實施例2基本一致，不同之處在于：覆土材料的含水量為45％，覆土層厚4cm，覆土層表面裸露于空氣中，覆土層菌絲培養(yǎng)期每天補水1次增加土壤含水量至60％，疏蕾后子實體生長期每天噴水1次以補充覆土層及基質(zhì)因通風散失的水分。
對照例3
接種養(yǎng)菌步驟、覆土步驟、生育步驟與實施例2基本一致，不同之處在于：覆土材料的含水量為50％，覆土層厚4cm，覆土層表面裸露于空氣中，覆土層菌絲培養(yǎng)期每天補水1次增加土壤含水量至60％，疏蕾后子實體生長期每天噴水1次以補充覆土層及基質(zhì)因通風散失的水分。
通過栽培觀察及記錄，比較了實施例1～4和對照例1～3黑牛肝菌工廠化栽培方法，從菌絲長滿覆土層時間、覆土層菌絲長勢、菌絲扭結(jié)整齊度、原基形成量、覆土至出菇時間、出菇整齊度、出菇百分率、采收期、平均每瓶子實體重、菇品質(zhì)、覆土至采收結(jié)束時間、菇體含水量、保鮮期等13個栽培性狀的差異，描述了實施例1～4和對照例1～3栽培性狀的差異(見表1)。從表中可以看出，所描述的13個栽培性狀中，覆土后加蓋方法均優(yōu)于覆土不加蓋，覆土層表面裸露于空氣中。
表1實施例及對照例栽培性狀比較
從表1可知，使用本申請?zhí)峁┑暮谂８尉耘喾椒ǎ纱蠓s短黑牛肝菌的培育時間，且出菇蒸汽，出菇率高。且由于保水能力強，子實體生長期不用額外給栽培基質(zhì)及覆土材料補水，培養(yǎng)出的牛肝菌菇形好、菇體淺橄欖褐色、菌蓋表面被粉狀物、顏色鮮亮、菌柄硬、肉質(zhì)緊實、菇體含水量低(含水量85％～87％)，耐貯存(4℃～8℃冷庫條件下可貯存6-8天)。
盡管已用具體實施例來說明和描述了本發(fā)明，然而應意識到，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權(quán)利要求中包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。