本發(fā)明涉及一種簡易草莓脫毒種苗繁育方法，屬于草莓種苗繁育技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

草莓是重要的漿果類果樹，果實外觀鮮艷，風(fēng)味獨特，營養(yǎng)價值高，用途廣，素有“水果皇后”之美譽；其生產(chǎn)周期短、見效快、收益高等特點，在國內(nèi)外被廣泛種植，其栽培面積和產(chǎn)量在世界小漿果生產(chǎn)中一直居于首位。據(jù)世界糧農(nóng)組織(FAO)統(tǒng)計資料顯示：2013年全世界草莓栽培面積為542.49萬畝，產(chǎn)量達到773.96萬噸；其中，我國草莓的種植面積和總產(chǎn)量分別為164.91萬畝和299.75萬噸，各占世界草莓總面積和總產(chǎn)量的30.40％和38.73％，雙雙位居世界第一。

我國每年需脫毒原種苗1.6億株以上，據(jù)不完全統(tǒng)計我國脫毒原種苗年生產(chǎn)約0.15億株，脫毒原種苗的市場缺口達到98％。目前國內(nèi)草莓脫毒原種苗主要利用生物技術(shù)組培快繁，技術(shù)要求難掌握，不易普及，數(shù)量受限制，遠遠不能滿足市場需求。此外草莓是無性繁殖，繁育市場混亂，脫毒原種苗、脫毒種苗、普通種苗以及生產(chǎn)苗混淆不清，加之種苗繁育技術(shù)落后，導(dǎo)致品種退化，病菌率高，質(zhì)量差，因此培育健壯優(yōu)質(zhì)的脫毒種苗，破解制約草莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展瓶頸的對策是普及推廣脫毒種苗繁育技術(shù)。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的針對制約草莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸，目的提供一種簡易草莓脫毒種苗繁育方法。

為實現(xiàn)上述目標(biāo)，本發(fā)明提供了一種簡易草莓脫毒種苗繁育方法，其步驟包括：

(1)脫毒原種苗的獲得：4月份從植株上剪取新長出來的匍匐莖莖尖，流水沖洗、消毒、接種，生長25±2天獲得無菌苗；取上述無菌苗繼代增殖、生根移栽促活，生長70±8天獲得脫毒原種苗；

(2)苗圃準(zhǔn)備：

2.1)選址、整地：選擇的地址要求遠離草莓、蔬菜茄果類的水田，平整地面,穴盤填充并夯實基質(zhì)后平鋪地表，使穴盤邊緣略低于周圍土壤，排灌方便，將預(yù)留脫毒原種苗位置和管理通道；

2.2)搭建大棚：在苗圃上搭建大棚，要求冬季能保溫，夏季能避雨防蟲，通風(fēng)透光，光照強烈時，可加蓋遮陽網(wǎng)防護，同時安裝自動微噴灌設(shè)施，可微噴補水，可精確施肥；

2.3)在定植前20天將基質(zhì)澆足水燜棚高溫消毒至定植前打開通風(fēng)降溫；

(3)換盆移栽定植：7月下旬將原種苗脫毒后置大棚內(nèi)煉苗，集中管理1個星期后移栽,脫毒原種苗采用盆栽方式，盆口邊緣與穴盤平齊，周圍預(yù)留穴盤繁育種苗，常規(guī)管理肥水，大棚要求通風(fēng)透光，光照強烈時，加蓋遮陽網(wǎng)防護；

(4)促進脫毒原種苗匍匐莖抽生：采用合適的管理模式以促進脫毒原種苗匍匐莖抽生；

(5)種苗整理固定：脫毒原種苗抽生匍匐莖后，頂端幼苗開始生根進行整理固定，幼苗在穴盤中生長形成獨立種苗。

作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，所述脫毒原種苗獲取方法為：4月份從植株上剪取新長出來的匍匐莖莖尖經(jīng)流水沖洗1.5-2h，在無菌操凈工作臺上，先用75％醫(yī)用酒精消毒30s，然后再用0.1％升汞水消毒8min，最后無菌水沖洗3-4次后剝?nèi)ネ鈱影?，將莖尖接種在培養(yǎng)基一上進行誘導(dǎo)初代培養(yǎng)，25±2天獲得無菌苗；將上述無菌苗繼代在培養(yǎng)基一上進行繼代增殖擴繁，25±2天將增殖獨立成苗的轉(zhuǎn)接于培養(yǎng)基二進行生根培養(yǎng)；上述操作是在25±2℃、光照強度約2400±200lx、每天光照時間14～16h的培養(yǎng)室中進行，培養(yǎng)基一是指MS+0.5mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+30g/L蔗糖+6.2g/L瓊脂，pH＝5.8的培養(yǎng)基，用于誘導(dǎo)初代和繼代增殖；培養(yǎng)基二是指1/2MS+30g/L蔗糖+6.2g/L瓊脂，pH＝5.8的培養(yǎng)基，用于生根；25±2天將萌發(fā)完整根系的脫毒原種苗移出組培室，在室內(nèi)打開生根組培苗的封口膜進行馴化，常溫條件下放置1～2天，將根部培養(yǎng)基清洗干凈，移栽到體積配比泥炭∶珍珠巖∶蛭石為3∶2∶1，基質(zhì)上保濕促活，約18±2天獲得脫毒原種苗。

作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，所述填充基質(zhì)的穴盤邊緣略低于周圍土壤，保溫保水；大棚具備保溫，避雨，防蟲，通風(fēng)功能，基質(zhì)高溫消毒。

作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，所述合適的管理模式為：盆栽定植半個月后，間隔10天左右噴施2‰水溶性磷酸二氫鉀和氮肥混合液促進抽生，早晚各微噴水一次，基質(zhì)保持半濕潤，此模式管理至10月中旬；11月份后氣溫下降，閉棚保溫夜間不低于12℃，白天開棚通風(fēng)保持25-30℃，預(yù)防植株抽生緩慢，間隔15天左右噴施2‰水溶性磷酸二氫鉀和氮肥混合液，此模式管理至3月中旬種苗出庫。

作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案，所述原種苗換盆移栽時所用盆口徑20cm，盆深20cm。

本發(fā)明工藝流程簡單、易掌握，操作性強，與本領(lǐng)域的現(xiàn)有技術(shù)知識和常用手段具有如下優(yōu)點和效果：

本發(fā)明通過步驟(1)(2)獲得脫毒原種苗，隔離苗圃，消毒繁育媒介基質(zhì)，有效杜絕病蟲害的來源及侵染。

本發(fā)明在步驟(3)(4)脫毒原種苗增殖生根，7月下旬移栽后，不使用生長調(diào)節(jié)劑，保證了母體營養(yǎng)生長和品種純度，又延長繁育時間促進增大繁育系數(shù)。

本發(fā)明所提供的方法用于草莓脫毒種苗繁育方法，該方法不僅突破常規(guī)實驗室生物繁育技術(shù)不易普及的難題，還防止常規(guī)實驗室多次繼代后造成的種性退化及交叉污染引發(fā)遺傳變異的安全風(fēng)險，同時減少繁重的繼代工作，減少勞動力、降低材料成本。

本發(fā)明所提供的方法用于草莓脫毒種苗繁育方法，合理利用大棚防蟲，避雨和保溫的功能促進母體生長和匍匐莖抽生，又避免露地繁育病蟲害帶來的風(fēng)險。

本發(fā)明所提供的方法用于草莓脫毒種苗繁育方法，該方法至3月中旬出庫既獲得脫毒種苗數(shù)量，繁育系數(shù)達42～53棵，又很好銜接生產(chǎn)上清明前后草莓種苗定植時間。

具體實施方式

實施例1

(1)脫毒原種苗的獲得：2015年4月20從植株上剪取新長出來的匍匐莖莖尖流水沖洗、消毒、接種，5月14日獲得無菌苗；取上述無菌苗繼代增殖、生根移栽促活，7月23日獲得原種苗；

(2)苗圃準(zhǔn)備：1)選擇遠離草莓、蔬菜茄果類的水田，平整地面，將32孔穴盤填充并夯實草莓基質(zhì)后平鋪地表，使穴盤邊緣略低于周圍土壤，排灌方便，預(yù)留脫毒原種苗和管理通道；2)在苗圃上搭建大棚，棚膜采用四塊聚乙烯膜，頂部為兩塊壓接，另兩塊為兩側(cè)裙膜，打開通風(fēng)，閉合避雨，四周安裝防蟲網(wǎng)和自動微噴灌設(shè)施；3)在6月26日將基質(zhì)澆足水燜棚高溫消毒，7月17日打開通風(fēng)降溫；

(3)換盆移栽：7月27日將脫毒原種苗置大棚內(nèi)，集中管理1個星期后移栽,采用盆栽方式，盆口徑20cm，盆深20cm，盆口邊緣與穴盤平齊，周圍預(yù)留穴盤48孔繁育種苗，常規(guī)管理肥水，大棚打開通風(fēng)，并加蓋遮陽網(wǎng)防護至9月上旬；

(4)促進脫毒原種苗抽生：定植半個月后，間隔10天左右噴施2‰水溶性磷酸二氫鉀和氮肥混合液促進抽生，早晚各微噴水一次，基質(zhì)保持半濕潤，此模式管理至10月中旬；11月份后氣溫下降，閉棚保溫夜間不低于12℃，白天開棚通風(fēng)保持25-30℃，，預(yù)防植株抽生緩慢，間隔15天左右噴施2‰水溶性磷酸二氫鉀和氮肥混合液，此模式管理至3月中旬；

(5)種苗整理固定：脫毒原種苗抽生匍匐莖后，頂端幼苗開始生根進行整理固定，幼苗在穴盤中生長形成獨立種苗。

統(tǒng)計種苗的繁育系數(shù)：參試品種的平均繁育系數(shù)為：紅頰36.68、紫金久紅53.16。品種來源為：紅頰是1999年引進的日本品種，紫金久紅是2015通過江蘇省鑒定，是江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院自主選育的新品種。