本發(fā)明涉及一種大型藥用真菌的栽培技術(shù)，尤其涉及一種豬苓的全人工栽培技術(shù)。

背景技術(shù)：

豬苓Polyporus umbellatus （Pers.） Fr.或Grifola umbellata Pilat，別名豬屎菌、楓苓、烏桃等，為多孔真菌豬苓的菌核，豬苓含有豬苓多糖、麥甾醇、生物素、水溶性多聚糖和蛋白質(zhì)等，以菌核供藥用，為我國(guó)著名的中藥材。藥用歷史長(zhǎng)達(dá)2000年以上，我國(guó)古醫(yī)書(shū)籍中對(duì)豬苓的藥用價(jià)值就有許多論述，如《神農(nóng)本草經(jīng)》、《本草衍義》、《本草綱目》等，為利用與栽培豬苓提供了珍貴的歷史素材。

在傳統(tǒng)的半人工栽培豬苓方法中，人工栽培豬苓的菌棒由周邊森林中的青杠提供，人們將從青杠樹(shù)上砍下的青杠樹(shù)枝加工成適當(dāng)長(zhǎng)度的青杠木段，用于豬苓的栽培。大多半人工栽培豬苓者在附近林中取材獲得青杠木段，然后在林中根據(jù)光照、雨水、土壤、溫度及遮陰等條件選擇適應(yīng)豬苓生長(zhǎng)的區(qū)域半人工種植豬苓，所以半人工栽培豬苓的區(qū)域在是否具備豐富的菌棒資源和是否具備豬苓的生長(zhǎng)條件等因素的共軛下，在我國(guó)符合半人工栽培豬苓條件的區(qū)域非常有限。這種受到嚴(yán)格限制下屈指可數(shù)的豬苓栽培區(qū)域無(wú)疑滿足不了豬苓市場(chǎng)嚴(yán)重不足的補(bǔ)給，甚至為杯水車薪，解決不了豬苓國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上嚴(yán)重供不應(yīng)求的市場(chǎng)矛盾，非但如此，傳統(tǒng)的半人工栽培不僅無(wú)助于解決豬苓市場(chǎng)的供給矛盾，而且人們頻繁的在林中活動(dòng)會(huì)對(duì)野生資源造成嚴(yán)重的破壞，更為重要的是長(zhǎng)期在林中取材會(huì)大量消耗森林資源，造成對(duì)森林資源的過(guò)度消費(fèi)從而使生態(tài)失衡而破壞生態(tài)環(huán)境。

所以傳統(tǒng)的半人工栽培豬苓方法受到菌棒資源和豬苓的生長(zhǎng)條件等因素的限制僅有很少的區(qū)域符合種植條件，豬苓產(chǎn)量?jī)H占豬苓市場(chǎng)中豬苓產(chǎn)品的2%，這樣不僅無(wú)助于解決豬苓市場(chǎng)的供求矛盾而且對(duì)森林資源過(guò)度消費(fèi)違背森林資源保護(hù)原則和生態(tài)環(huán)境保護(hù)原則，可謂是得不償失。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的就在于為了解決上述問(wèn)題而提供一種豬苓的全人工栽培技術(shù)。

本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)上述目的：

本發(fā)明包括菌種的準(zhǔn)備和豬苓的全人工栽培方法，

所述菌種的準(zhǔn)備：

（1）母種的活化及方法

取出冰箱保存的蜜環(huán)菌和豬苓試管菌種放置在室溫條件下數(shù)小時(shí)，等試管溫度恢復(fù)到室溫后，挑取菌絲接到準(zhǔn)備好的已滅菌改良PDA培養(yǎng)基上，25℃下恒溫培養(yǎng)，然后挑選長(zhǎng)勢(shì)好的菌種分別接入試管做成蜜環(huán)菌、豬苓母種待用，

（2）原種培養(yǎng)

按上述在蜜環(huán)菌、豬苓原種培養(yǎng)基的配方準(zhǔn)備好原料，裝入菌種瓶封口后121℃下高壓滅菌30min，待冷卻到室溫之后分別接入已經(jīng)活化好的蜜環(huán)菌、豬苓母種，封口后分別在25℃和18℃條件下避光培養(yǎng)兩周左右，白色菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶，待用，

（3）栽培種培養(yǎng)

按栽培種的培養(yǎng)基配方將準(zhǔn)備好的配料拌勻，裝瓶或裝袋，松緊適度，中間插孔，用蓋子封口，滅菌，分別接入培養(yǎng)好的豬苓、蜜環(huán)菌原種，22℃置于黑暗條件下培養(yǎng)30d，

所述豬苓的全人工栽培方法：

（1）對(duì)栽培原料的初步處理

取櫟屬植物的枝干，粉碎成木屑；玉米芯粉碎；棉籽殼備用，將棉籽殼、玉米芯、和櫟屬植物一起作為栽培料，棉籽殼、櫟屬植物木屑、玉米芯，按4:4:1混合，總量占栽培料的90%、堆漚處理之后的腐殖土占10%的比例混勻待用，

（2）對(duì)栽培原料的處理

將上述原料原料處理池中經(jīng)過(guò)24h的浸泡處理，處理過(guò)程中要保持液面沒(méi)過(guò)料面1cm左右；處理過(guò)后，裝袋要疏松，袋子40cm×80cm，裝袋后扎袋口，滅菌，120℃，3h，

（3）裝框及栽培過(guò)程

處理好的原料，在無(wú)菌車間中打開(kāi)，裝框，裝筐的同時(shí)撒上豬苓栽培種和蜜環(huán)菌栽培種，具體方法是先裝一層原料（厚度大約10cm）然后混合撒上豬苓栽培種和蜜環(huán)菌栽培種，注意在筐子的四個(gè)角上都要接上菌種，接下來(lái)再覆蓋一層原料然后在表面均勻接上豬苓和蜜環(huán)菌栽培種，每處理干原料1000kg，大約裝500筐，保持在溫度20℃--22℃、相對(duì)空氣濕度70%、黑暗條件下培養(yǎng)，每隔一周灑水，并觀察長(zhǎng)勢(shì)，如有蠅蚊及時(shí)噴灑驅(qū)蟲(chóng)藥劑，

（4）收獲豬苓菌核

培養(yǎng)120d后收獲，挑出顏色呈深褐色或黑褐色的成熟菌核，在肥沃的腐殖質(zhì)土壤中繼續(xù)堆埋一個(gè)月，取出豬苓菌核晾曬至干燥，通常1000g濕豬苓可以出600g干豬苓。

本發(fā)明的有益效果在于：

本發(fā)明是一種豬苓的全人工栽培技術(shù)，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：

優(yōu)勢(shì)一：新型的豬苓人工栽培法擺脫了森林地域條件的限制，可以不在林中栽培。或在林中栽培主要是利用林中較大的濕度、較大的空間、偏低的溫度和較凈的環(huán)境。

優(yōu)勢(shì)二：新型的豬苓人工栽培法中采用多種廢棄物料為豬苓栽培的菌棒輔料，用到的青杠資源大大減少，可以節(jié)省大量的森林資源，利于人類長(zhǎng)久的可持續(xù)發(fā)展。

優(yōu)勢(shì)三：新型的豬苓人工栽培法中采用了多種農(nóng)林業(yè)的廢棄物料，不僅減少了對(duì)寶貴資源的浪費(fèi)而且利用了大量農(nóng)林業(yè)的廢棄物料，減少了垃圾廢棄物的存在，對(duì)當(dāng)今社會(huì)的環(huán)保意義巨大。

優(yōu)勢(shì)四：新型的豬苓人工栽培方法中縮短了豬苓的生長(zhǎng)周期，且豬苓菌核品質(zhì)優(yōu)異，可以為豬苓市場(chǎng)補(bǔ)給豬苓產(chǎn)品，有望為解決當(dāng)今豬苓市場(chǎng)上嚴(yán)重供不應(yīng)求的市場(chǎng)矛盾提供巨大幫助。

具體實(shí)施方式

下面對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明：

包括菌種的準(zhǔn)備和豬苓的全人工栽培方法，

所述菌種的準(zhǔn)備：

（1）母種的活化及方法

取出冰箱保存的蜜環(huán)菌和豬苓試管菌種放置在室溫條件下數(shù)小時(shí)，等試管溫度恢復(fù)到室溫后，挑取菌絲接到準(zhǔn)備好的已滅菌改良PDA培養(yǎng)基上，25℃下恒溫培養(yǎng)，然后挑選長(zhǎng)勢(shì)好的菌種分別接入試管做成蜜環(huán)菌、豬苓母種待用，

（2）原種培養(yǎng)

按上述在蜜環(huán)菌、豬苓原種培養(yǎng)基的配方準(zhǔn)備好原料，裝入菌種瓶封口后121℃下高壓滅菌30min，待冷卻到室溫之后分別接入已經(jīng)活化好的蜜環(huán)菌、豬苓母種，封口后分別在25℃和18℃條件下避光培養(yǎng)兩周左右，白色菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶，待用，

（3）栽培種培養(yǎng)

按栽培種的培養(yǎng)基配方將準(zhǔn)備好的配料拌勻，裝瓶或裝袋，松緊適度，中間插孔，用蓋子封口，滅菌，分別接入培養(yǎng)好的豬苓、蜜環(huán)菌原種，22℃置于黑暗條件下培養(yǎng)30d，

所述豬苓的全人工栽培方法：

（1）對(duì)栽培原料的初步處理

取櫟屬植物的枝干，粉碎成木屑；玉米芯粉碎；棉籽殼備用，將棉籽殼、玉米芯、和櫟屬植物一起作為栽培料，棉籽殼、櫟屬植物木屑、玉米芯，按4:4:1混合，總量占栽培料的90%、堆漚處理之后的腐殖土占10%的比例混勻待用，

（2）對(duì)栽培原料的處理

將上述原料原料處理池中經(jīng)過(guò)24h的浸泡處理，處理過(guò)程中要保持液面沒(méi)過(guò)料面1cm左右；處理過(guò)后，裝袋要疏松，袋子40cm×80cm，裝袋后扎袋口，滅菌，120℃，3h，

（3）裝框及栽培過(guò)程

處理好的原料，在無(wú)菌車間中打開(kāi)，裝框，裝筐的同時(shí)撒上豬苓栽培種和蜜環(huán)菌栽培種，具體方法是先裝一層原料（厚度大約10cm）然后混合撒上豬苓栽培種和蜜環(huán)菌栽培種，注意在筐子的四個(gè)角上都要接上菌種，接下來(lái)再覆蓋一層原料然后在表面均勻接上豬苓和蜜環(huán)菌栽培種，每處理干原料1000kg，大約裝500筐，保持在溫度20℃--22℃、相對(duì)空氣濕度70%、黑暗條件下培養(yǎng)，每隔一周灑水，并觀察長(zhǎng)勢(shì)，如有蠅蚊及時(shí)噴灑驅(qū)蟲(chóng)藥劑，

（4）收獲豬苓菌核

培養(yǎng)120d后收獲，挑出顏色呈深褐色或黑褐色的成熟菌核，在肥沃的腐殖質(zhì)土壤中繼續(xù)堆埋一個(gè)月，取出豬苓菌核晾曬至干燥，通常1000g濕豬苓可以出600g干豬苓。

產(chǎn)品質(zhì)量鑒定

（1）全人工栽培豬苓菌核的質(zhì)量鑒定分析

豬苓的有效成分是可溶性多糖，也就是通常說(shuō)的豬苓多糖。豬苓多糖具有抗腫瘤和提高機(jī)體免疫力的作用，其免疫刺激作用與TLR4信號(hào)通路的激活有關(guān)。豬苓多糖對(duì)白血病患者可減少出血和感染，減輕化療的某些不良反應(yīng)，并可延長(zhǎng)患者的生存期。本技術(shù)是以棉籽殼和櫟屬植物木屑、玉米芯等為原料，通過(guò)全人工栽培獲得菌核；為了驗(yàn)證經(jīng)人工栽培的豬苓質(zhì)量如何，我們將全人工栽培所得的豬苓和野生條件下生長(zhǎng)了4年的豬苓一起進(jìn)行了高效液相色譜（HPLC）多糖成分及其含量測(cè)定。

HPLC具有高準(zhǔn)確度，能準(zhǔn)確地對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行定量和定性測(cè)定。

（2）兩種豬苓中多糖成分含量測(cè)定結(jié)果

表1 豬苓多糖成分及其含量測(cè)定結(jié)果（單位：%，n=2）

Table 1 The identified result of the Polyporusus bellatus composition and contents

注：ND表示未測(cè)出。

表中數(shù)據(jù)表明，野生豬苓的可溶性多糖中主要有葡萄糖、木糖和阿拉伯糖；其含量分別為13.27±0.33%、3.15±0.21%、1.21±0.16%，粗多糖中含有葡萄糖和木糖，其含量分別為9.54±0.78%、0.73±0.04%，阿拉伯糖未測(cè)出。

全人工栽培豬苓的可溶性多糖主要成分與野生種相同，葡萄糖、木糖和阿拉伯糖的含量分別為14.30±0.07%、0.75±0.16%、0.13±0.07%，粗多糖的主要成分是葡萄糖，含量9.09±0.27%。通過(guò)測(cè)量結(jié)果可知全人工栽培的豬苓與野生豬苓質(zhì)量相當(dāng)。

2.本發(fā)明的有益性

豬苓是一種市場(chǎng)需求量不斷上升的藥用真菌，大家的種植熱情也越來(lái)越高，然而在豬苓的主要種植方法與技術(shù)上普遍過(guò)于落后；一般都是依賴于自然條件的半人工栽培法，在半人工栽培方法中所用的原料是青岡木與蜜環(huán)菌，通過(guò)蜜環(huán)菌浸染木段、接種幼苓埋于濕潤(rùn)肥沃的林下坡地，任其自然生長(zhǎng)約3年多到4年后開(kāi)挖采收，種植者在此期間僅是保護(hù)種植區(qū)不被人畜踩踏破壞，豬苓菌核的生長(zhǎng)主要決定于自然因素，生長(zhǎng)周期漫長(zhǎng)，人為作用很少；這樣使得豬苓菌核的生產(chǎn)效率低下。

而此技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)便是解決了這一主要的效率問(wèn)題，我們通過(guò)全人工技術(shù)種植豬苓，不受時(shí)間、地點(diǎn)的限制，主要方法：①模擬豬苓生長(zhǎng)最快時(shí)的條件狀態(tài)，并讓豬苓持續(xù)的處于這種最適生長(zhǎng)環(huán)境下，減少自然環(huán)境中因環(huán)境變化造成的豬苓菌絲生長(zhǎng)遲滯。②我們的栽培技術(shù)不再是直接用幼苓而是選育出健壯的豬苓菌種，從試管菌不斷擴(kuò)大，最后做成菌袋用于大規(guī)模的豬苓菌核栽培，為避免長(zhǎng)期用一個(gè)菌種栽培導(dǎo)致菌種退化，每栽培幾代都需重新選育母種，擴(kuò)大成栽培種再進(jìn)行大規(guī)模栽培。

3.本發(fā)明的特點(diǎn)

（1）新型的豬苓人工栽培法擺脫了森林地域條件的限制，可以不在林中栽培?；蛟诹种性耘嘀饕抢昧种休^大的濕度、較大的空間、偏低的溫度和干凈的環(huán)境。

（2）新型的豬苓人工栽培法中采用多種廢棄物料為豬苓栽培的菌棒輔料，用到的青?木資源大大減少，可以節(jié)省大量的森林資源，利于人類長(zhǎng)久的可持續(xù)發(fā)展。

（3）新型的豬苓人工栽培法中采用了多種農(nóng)林業(yè)的廢棄物料，不僅減少了對(duì)寶貴資源的浪費(fèi)而且利用了大量農(nóng)林業(yè)的廢棄物料，減少了垃圾廢棄物的存在，對(duì)當(dāng)今社會(huì)的環(huán)保意義巨大。

（4）新型的豬苓人工栽培方法中縮短了豬苓的生長(zhǎng)周期，且豬苓菌核品質(zhì)優(yōu)異，可以為豬苓市場(chǎng)補(bǔ)給豬苓產(chǎn)品，有望為解決當(dāng)今豬苓市場(chǎng)上嚴(yán)重供不應(yīng)求的市場(chǎng)矛盾提供巨大幫助。

以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征及本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說(shuō)明書(shū)中描述的只是說(shuō)明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書(shū)及其等效物界定。