本發(fā)明屬于野生菌人工栽培技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種依賴兩種白蟻的荔枝菌人工栽培方法。
背景技術(shù)：
荔枝菌，素有嶺南菌王之稱，每年農(nóng)歷五月初一開始生長到夏至?xí)r節(jié)、荔枝成熟結(jié)果之時段，但總是曇花一現(xiàn)，生長期不長，僅一個月左右，十分珍貴。荔枝菌在荔枝林潮濕的白蟻窩上，經(jīng)過高溫多雨、驟出太陽驟降大雨的催谷，迅速生長起來。一趟摘完，只要不毀壞白蟻窩，過幾天又會新長一批荔枝菌。荔枝菌一般在午夜生長，略呈紡紗綞形狀，長達(dá)10-20厘米，菌尖似一把收緊的小雨傘，味道極之清鮮、爽口。由于荔枝菌對生長條件要求極為苛刻，其與白蟻的共生互作分子機制亦不清楚，尚無其人工培植技術(shù)報道。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種依賴兩種白蟻的荔枝菌人工栽培方法，在人工構(gòu)建白蟻窩的基礎(chǔ)上通過兩種白蟻的協(xié)同作用，在保持荔枝菌野生口味的同時增加其菌體的氨基酸含量。
為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：
一種依賴兩種白蟻的荔枝菌人工栽培方法，所述方法包括以下步驟：
(1)白蟻養(yǎng)殖：采用白蟻蹤跡信息素誘集黑翅土白蟻和海南土白蟻，脫翅，以3～5:1的比例混合黑翅土白蟻、海南土白蟻，然后置于飼養(yǎng)池，飼養(yǎng)池中含有木屑土，其中木屑土由木屑、松散土壤以5～7：1混合而成，育種至蟻巢成形，將巢室轉(zhuǎn)移至預(yù)先分隔好蟻窩的育種池中定植；
(2)荔枝菌栽培：將母種塊發(fā)育成的菌絲球移植到飼養(yǎng)池的蟻窩中，平均每個蟻窩定植12～16株，覆蓋木屑土，遮光，保持木屑土含水量為60～75％，培育至菌株的菌蓋完全撐開，采收地面成熟菌株。
所述方法步驟(1)中的白蟻蹤跡信息素為十二碳烯醇、2-苯氧乙醇、脂肪酸、十二碳三烯醇或β-甜沒藥烯。
所述方法步驟(1)中的白蟻蹤跡信息素的濃度為0.6～1.0ng/cm2。
所述方法中木屑土的木屑為柚木屑、杉木屑、橡木屑、楝木屑、樺木屑、櫸木屑、松木屑或楊梅木屑。
所述方法中木屑土還含有12～15％的白砂糖。
所述方法步驟(2)中培養(yǎng)菌絲球的培養(yǎng)基配方包括以下重量份比的原料：木屑50～60份，碎雜草10～14份，麥芽糖1～3份，草酸銨0.8～1.2份；所述培養(yǎng)基的pH值為6.8。
所述方法步驟(2)荔枝菌培育期間每隔2～4d補充1次木屑土。
荔枝菌(Litchi chinensis Bacterium)為廣州地區(qū)荔枝收獲時期上市的一種野生菌。荔枝菌子實體中蛋白質(zhì)含量較高，含有人體所需的8種必需氨基酸，特別是我國主糧中缺少的賴氨酸和亮氨酸含量較高。
白蟻作為社會性昆蟲，與同為社會性昆蟲的螞蟻一樣，其種間存在社群封閉性:即社群內(nèi)相互合作和利它，而社群間相互排斥，甚至有強烈的進(jìn)攻性。同時白蟻屬昆蟲綱等翅目，是最古老的社會性昆蟲，大多數(shù)種類營地下隱蔽生活且視覺退化，需要依靠信息素來調(diào)節(jié)種群生活和進(jìn)行相關(guān)通訊。通過對白蟻信息素的研究，以掌握白蟻的通訊方法，進(jìn)而用人工合成的信息素及其類似物來引誘白蟻。蹤跡信息素是動物分泌的用于標(biāo)記同種個體行進(jìn)路線，也可標(biāo)記集體行動時的行進(jìn)路線。白蟻蹤跡信息素主要為醇、醛、烴類物質(zhì)。
黑翅土白蟻(Odontotermes formosanus)是一種筑大型巢的土棲性白蟻，它廣泛分布于我國南方，常對土質(zhì)堤壩、林木、綠地和農(nóng)作物等造成嚴(yán)重危害。海南土白蟻[Odontotermes hainanensis(Light)]是廣東省土質(zhì)堤壩和林業(yè)的主要白蟻危害種。在荔枝菌的菌圃中黑翅土白蟻和海南土白蟻均有發(fā)現(xiàn)。
荔枝菌與白蟻相互共生是為了去適應(yīng)外界多變的環(huán)境條件。在這一共生的相互關(guān)系中，白蟻通過分泌蟻酸，可以選擇性的抑制蟻巢內(nèi)細(xì)菌和其他真菌的生長，為真菌的生長提供一個良好的微環(huán)境，此外，蟻巢內(nèi)白蟻搬回的植物碎片是真菌生長最好的菌圃材料；作為回報，雞樅菌為白蟻提供氮源豐富的由其次生菌絲扭結(jié)而成的小白球作為食物。一般蟻巢中的小白球的數(shù)量與白蟻的數(shù)量是平衡的，但是每年雨季蟻巢進(jìn)行分飛之后，蟻巢中白蟻的生物量會下降一半，這時大量剩余的小白球發(fā)育成為雞樅菌原基而長出子實體。同時荔枝菌可以完全分解蟻巢內(nèi)的植物碎片，為白蟻的生存提供豐富的碳源。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明通過白蟻蹤跡信息素引誘、收集黑翅土白蟻、海南土白蟻，構(gòu)建含兩種白蟻的蟻窩，利用黑翅土白蟻、海南土白蟻社群內(nèi)相互合作和利它的作用，協(xié)同促進(jìn)荔枝菌的生長，可顯著提高荔枝菌中氨基酸含量，尤其賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸含量，栽培方法簡易，成本低，經(jīng)濟價值大。
具體實施方式
為使本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員能更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合實施例對本發(fā)明技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)說明。
下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
1.荔枝菌菌絲球培養(yǎng)基配方及pH值
實施例1
木屑50份，碎雜草12份，麥芽糖3份，草酸銨1份；pH值6.8。
實施例2
木屑55份，碎雜草10份，麥芽糖1份，草酸銨0.8份；pH值6.8。
實施例3
木屑60份，碎雜草14份，麥芽糖2份，草酸銨1.2份；pH值6.8。
2.荔枝菌人工栽培
實施例4
一種依賴兩種白蟻的荔枝菌人工栽培方法，所述方法包括以下步驟：
(1)白蟻養(yǎng)殖：采用濃度為0.6ng/cm2白蟻蹤跡信息素十二碳烯醇誘集黑翅土白蟻和海南土白蟻，脫翅，以5:1的比例混合黑翅土白蟻、海南土白蟻，然后置于飼養(yǎng)池，飼養(yǎng)池中含有木屑土，其中木屑土由柚木屑、松散土壤以7：1混合而成，同時添加12％的白砂糖，育種至蟻巢成形，將巢室轉(zhuǎn)移至預(yù)先分隔好蟻窩的育種池中定植；
(2)荔枝菌栽培：將母種塊發(fā)育成的用實施例1培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲球移植到飼養(yǎng)池的蟻窩中，平均每個蟻窩定植12株，覆蓋木屑土，遮光，保持木屑土含水量為60％，培育至菌株的菌蓋完全撐開，采收地面成熟菌株，培育期間每隔2d補充1次木屑土。
實施例5
一種依賴兩種白蟻的荔枝菌人工栽培方法，所述方法包括以下步驟：
(1)白蟻養(yǎng)殖：采用濃度為0.8ng/cm2白蟻蹤跡信息素2-苯氧乙醇誘集黑翅土白蟻和海南土白蟻，脫翅，以4:1的比例混合黑翅土白蟻、海南土白蟻，然后置于飼養(yǎng)池，飼養(yǎng)池中含有木屑土，其中木屑土由杉木屑、松散土壤以6：1混合而成，同時添加13.5％的白砂糖，育種至蟻巢成形，將巢室轉(zhuǎn)移至預(yù)先分隔好蟻窩的育種池中定植；
(2)荔枝菌栽培：將母種塊發(fā)育成的用實施例2培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲球移植到飼養(yǎng)池的蟻窩中，平均每個蟻窩定植14株，覆蓋木屑土，遮光，保持木屑土含水量為67.5％，培育至菌株的菌蓋完全撐開，采收地面成熟菌株，培育期間每隔3d補充1次木屑土。
實施例6
一種依賴兩種白蟻的荔枝菌人工栽培方法，所述方法包括以下步驟：
(1)白蟻養(yǎng)殖：采用濃度為1.0ng/cm2白蟻蹤跡信息素β-甜沒藥烯誘集黑翅土白蟻和海南土白蟻，脫翅，以3:1的比例混合黑翅土白蟻、海南土白蟻，然后置于飼養(yǎng)池，飼養(yǎng)池中含有木屑土，其中木屑土由楊梅木屑、松散土壤以5：1混合而成，同時添加15％的白砂糖，育種至蟻巢成形，將巢室轉(zhuǎn)移至預(yù)先分隔好蟻窩的育種池中定植；
(2)荔枝菌栽培：將母種塊發(fā)育成的用實施例3培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲球移植到飼養(yǎng)池的蟻窩中，平均每個蟻窩定植16株，覆蓋木屑土，遮光，保持木屑土含水量為75％，培育至菌株的菌蓋完全撐開，采收地面成熟菌株，培育期間每隔4d補充1次木屑土。
3.僅依賴一種白蟻的荔枝菌人工栽培，其中飼養(yǎng)池中白蟻投放量同實施例5栽培方法中白蟻投放量
對比例1
一種依賴一種白蟻的荔枝菌人工栽培方法，所述方法包括以下步驟：
(1)白蟻養(yǎng)殖：采用濃度為0.8ng/cm2白蟻蹤跡信息素2-苯氧乙醇誘集海南土白蟻，脫翅，然后置于飼養(yǎng)池，飼養(yǎng)池中含有木屑土，其中木屑土由杉木屑、松散土壤以6：1混合而成，同時添加13.5％的白砂糖，育種至蟻巢成形，將巢室轉(zhuǎn)移至預(yù)先分隔好蟻窩的育種池中定植；
(2)荔枝菌栽培：將母種塊發(fā)育成的用實施例2培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲球移植到飼養(yǎng)池的蟻窩中，平均每個蟻窩定植14株，覆蓋木屑土，遮光，保持木屑土含水量為67.5％，培育至菌株的菌蓋完全撐開，采收地面成熟菌株，培育期間每隔3d補充1次木屑土。
對比例2
一種依賴一種白蟻的荔枝菌人工栽培方法，所述方法包括以下步驟：
(1)白蟻養(yǎng)殖：采用濃度為0.8ng/cm2白蟻蹤跡信息素2-苯氧乙醇誘集黑翅土白蟻，脫翅，然后置于飼養(yǎng)池，飼養(yǎng)池中含有木屑土，其中木屑土由杉木屑、松散土壤以6：1混合而成，同時添加13.5％的白砂糖，育種至蟻巢成形，將巢室轉(zhuǎn)移至預(yù)先分隔好蟻窩的育種池中定植；
(2)荔枝菌栽培：將母種塊發(fā)育成的用實施例2培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲球移植到飼養(yǎng)池的蟻窩中，平均每個蟻窩定植14株，覆蓋木屑土，遮光，保持木屑土含水量為67.5％，培育至菌株的菌蓋完全撐開，采收地面成熟菌株，培育期間每隔3d補充1次木屑土。
4.實施例5、對比例1、對比例2采收的荔枝菌菌株中賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸含量測定，測定方法為常規(guī)氨基酸測量方法，結(jié)果見表1
表1實施例5、對比例1、2采收的荔枝菌菌株中賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸含量
從表1賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸的測量結(jié)果可知實施例5采收的荔枝菌菌株中氨基酸總量(3012.6ug/ml)、賴氨酸(250.6ug/ml)、亮氨酸(396.4ug/ml)、異亮氨(335.9ug/ml)的含量均顯著高于對比例1、2采收的荔枝菌菌株中氨基酸總量(2476.8ug/ml以下)、賴氨酸(130.2ug/ml以下)、亮氨酸(231.8ug/ml以下)、異亮氨酸含量(207.5ug/ml以下)，由此可見，本發(fā)明一種依賴兩種白蟻的荔枝菌人工栽培方法利用黑翅土白蟻、海南土白蟻社群內(nèi)相互合作和利它的作用，協(xié)同促進(jìn)荔枝菌的生長，可顯著提高荔枝菌中氨基酸含量，尤其賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸含量，栽培方法簡易，成本低，經(jīng)濟價值大。