本發(fā)明屬于水產(chǎn)類動物攝食領(lǐng)域，具體涉及一種測定單環(huán)刺螠攝食節(jié)律的方法。

背景技術(shù)：

目前測定水產(chǎn)動物攝食節(jié)律的方法有胃腸充塞度法、日攝食率法、自適應(yīng)投喂法、觀察法。但對于濾食性、渣食性的單環(huán)刺螠來說，這些方法都不適用。

胃腸充塞度法借助于化學(xué)試劑對目標(biāo)進(jìn)行固定，繼而解剖，隨后目測腸胃食物的充塞度。日攝食率法的測定是建立在胃腸充塞度法的基礎(chǔ)上，過測定同一天各次飽滿指數(shù)求得其平均值，以及食物通過消化道所需要的時間來進(jìn)行日攝食率的測定方法。自適應(yīng)投喂法是通過養(yǎng)殖對象咬食觸控自動裝置來記錄其攝食活動的一種方法。觀察法主要通過直接或間接的手段對養(yǎng)殖對象的攝食行為強(qiáng)度進(jìn)行人工觀察。

現(xiàn)有的測量方法都是以人工目測判斷為主，精確度不高，需要大量人力資源和時間的投入，研究成本較高。本發(fā)明中采用水樣吸光度的變化得出單環(huán)刺螠在某一時段的攝食強(qiáng)度，進(jìn)而得到單環(huán)刺螠的攝食節(jié)律。方法簡單，實(shí)用，精確度高。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明實(shí)施例提供一種測定單環(huán)刺螠攝食節(jié)律的方法，得到各個時段的單環(huán)刺螠強(qiáng)度。本測定方法可以測定準(zhǔn)確的數(shù)值，更加直觀準(zhǔn)確。

本發(fā)明實(shí)施例是這樣實(shí)現(xiàn)的，一種測定單環(huán)刺螠攝食節(jié)律的方法，包括以下步驟：

(1)、標(biāo)準(zhǔn)液配置：將粉末飼料與水混合直到形成懸濁液，得到標(biāo)準(zhǔn)液；

(2)、標(biāo)準(zhǔn)液測定：將標(biāo)準(zhǔn)液用分光光度計(jì)掃描，波長190～1100nm處的吸收情況，從而確定最大吸收波長與標(biāo)準(zhǔn)吸光度；

(3)、分組：將養(yǎng)殖箱分為3-9組，每組2-3個養(yǎng)殖箱，將單環(huán)刺螠分成4-24組，然后將每組的單環(huán)刺螠分別置入一個養(yǎng)殖箱內(nèi)，保證2-3個養(yǎng)殖箱內(nèi)空置，為對照箱；

(4)、投喂：每日分成3-5次，將等量的飼料投喂在每個養(yǎng)殖箱內(nèi)，其中對照箱中將飼料與水均勻混合；

(5)、取樣：投喂飼料一個小時之后，分別在每個單環(huán)刺螠的養(yǎng)殖箱內(nèi)吸取2-3毫升的測定水樣，再從對照箱內(nèi)吸取等量的第一對照水樣；

(6)、測定：將測定水樣與對照水樣移入比色皿中，再用分光光度計(jì)分別在最大吸收波長處測定吸光度，分別得到測定吸光度與對照吸光度；

(7)、數(shù)據(jù)處理：將測定吸光度與標(biāo)準(zhǔn)吸光度進(jìn)行比較，得到測定吸光度改變量，將對照吸光度與標(biāo)準(zhǔn)吸光度進(jìn)行比較，得到對照吸光度改變量，再將測定吸光度改變量與對照吸光度進(jìn)行差值比較，得到該時間段內(nèi)單環(huán)刺螠的攝食強(qiáng)度。

發(fā)明實(shí)施例還提供，所述步驟(4)中在實(shí)驗(yàn)之前，停止投喂1-2日。

發(fā)明實(shí)施例還提供，所述步驟(4)中在投喂之前2-6小時，對水體進(jìn)行更換。

發(fā)明實(shí)施例還提供，所述養(yǎng)殖箱的中央設(shè)有充氣石。

發(fā)明實(shí)施例還提供，所述步驟(5)中取樣的位置為養(yǎng)殖箱或?qū)φ障涞乃膫€半角線處，即養(yǎng)殖箱或?qū)φ障潆x充氣石25cm、水深1cm處。

發(fā)明實(shí)施例還提供，所述步驟(4)與步驟(5)之間，在對照箱的飼料混合完畢后，立即吸取與所述第一對照水樣等量的第二對照水樣。

發(fā)明實(shí)施例還提供，所述取樣器為無菌注射器。

本發(fā)明通過分光光度計(jì)對水樣的吸光度進(jìn)行測定，得到各個時段的單環(huán)刺螠強(qiáng)度。本測定方法可以測定準(zhǔn)確的數(shù)值，更加直觀準(zhǔn)確。同時根據(jù)測定的單環(huán)刺螠的攝食節(jié)律，可以為單環(huán)刺螠的投喂管理和水質(zhì)調(diào)控等提供依據(jù)，本方法也適用于其他濾食性動物的攝食節(jié)律的測定。

附圖說明

圖1是本發(fā)明一種單環(huán)刺螠在不同時段單環(huán)刺螠的攝食強(qiáng)度的折線圖。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

本發(fā)明出示一種測定單環(huán)刺螠攝食節(jié)律的方法的具體實(shí)施方式：一種測定單環(huán)刺螠攝食節(jié)律的方法，采用三月齡體質(zhì)健康、規(guī)格齊整的單環(huán)刺螠進(jìn)行試驗(yàn)。單環(huán)刺螠體長在完全收縮狀態(tài)為4.25±0.50cm，體重在自然排掉直腸和肛門囊中的水后為5.69±0.60g。投喂飼料為海參成參料，海參成參料為粉末狀，60目，粗蛋白14.0％，粗纖維12.0％，粗脂肪4.0％，鈣5.0％，總磷0.8％，灰分35％，賴氨酸1.1％。27個70*50*45cm的塑料箱養(yǎng)殖，塑料箱內(nèi)鋪沙15cm，海水5cm，通氧，塑料箱中央放置充氣石，充氣石高3.5cm，底面直徑為3.0cm。實(shí)驗(yàn)用分光光度計(jì)為TU-1810型紫外分光光度計(jì)，用水為充分曝氣的自然海水，其鹽度為30％。實(shí)驗(yàn)用沙來自出產(chǎn)單環(huán)刺螠的潮間帶，使用前用海水充分洗凈。實(shí)驗(yàn)期間，水溫22±1℃，pH8.0±0.2，溶氧量5.0±0.5mg/L。光照周期為自然光周期，夜間操作時用紅燈照明。

實(shí)驗(yàn)步驟如下：(1)、配置標(biāo)準(zhǔn)液：本試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)采用自然海水即可，也可以將粉末飼料與水混合直到形成懸濁液。

分組：將塑料箱分為9組，每組3個，將塑料箱按照1、2、3···27編號。并將采購的單環(huán)刺螠隨機(jī)分成24組，每組80只，養(yǎng)殖密度為228只/平方米，隨機(jī)放入1-24號箱，作為養(yǎng)殖箱。25-27號箱作為空白對照組，作為對照箱。

投喂：單環(huán)刺螠暫養(yǎng)兩周，以充分適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境，暫養(yǎng)期間每日多次均等少量投餌，實(shí)現(xiàn)馴化。對照箱內(nèi)不投餌。實(shí)驗(yàn)開始前停食1天。每組日投餌1次，測量單環(huán)刺螠的攝食情況，進(jìn)行連續(xù)5天的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取后3天數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。投喂時間為：1-3號箱0:00；4-6號箱3:00；7-9號箱6:00；10-12號箱9:00；13-15號箱12:00；16-18號箱15:00；19-21號箱18:00；22-24號箱21:00。投喂方式為：每個時段投餌前6小時，對水體進(jìn)行徹底更換。每個時間點(diǎn)將10.00g(約為體重2.2％)飼料用100ml海水溶解，沿養(yǎng)殖箱對角線均勻倒入。對照箱(25-27號箱)進(jìn)行一天的實(shí)驗(yàn)，在8:00按養(yǎng)殖箱的方法和用量投餌。

取樣：在實(shí)驗(yàn)開始后的第三天，每個時段投餌1小時后用潔凈注射器(容量5.00ml)在每個養(yǎng)殖箱4個半角線(離充氣石25cm、水深1cm)處，吸取3.00ml水樣，立即移入比色皿中。測得的該組水樣吸光度的平均值，作為此組投餌1小時后的末吸光度(A1)。對照組在飼料混合均勻后立即取一組水樣，此組水樣吸光度平均值作為本實(shí)驗(yàn)剛投餌時的初吸光度(A0)。對照組投餌1小時后再取一組水樣,作為對照組的末吸光度(A2)。

測定：將標(biāo)準(zhǔn)液與各水樣用分光光度計(jì)掃描波長190～1100nm處的吸收情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)液與水樣的最大吸收峰都在波長472nm處，且最大吸收峰周圍的干擾少，從而確定最大吸收波長為472nm。所取的水樣用分光光度計(jì)在472nm處測定吸光度。

數(shù)據(jù)處理：每個時段投餌1小時后養(yǎng)殖水體因單環(huán)刺螠攝食造成吸光度的改變值，并將此值作為該時段單環(huán)刺螠的攝食強(qiáng)度。攝食強(qiáng)度(Fi)的計(jì)算公式如下：Fi＝ΔA＝ΔA1–ΔA2；式中：ΔA1--實(shí)驗(yàn)組投餌1小時后因單環(huán)刺螠攝食和沉降造成的吸光度改變值；ΔA2--對照組投餌1小時后因沉降造成的吸光度改變值。

表1單環(huán)刺螠的攝食節(jié)律

所得數(shù)據(jù)在SPSS軟件上進(jìn)行單因素(時間)重復(fù)試驗(yàn)的方差分析統(tǒng)計(jì)分析，對不同時間段的攝食強(qiáng)度用LSD法進(jìn)行多重比較，可以得到表1的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

根據(jù)上述數(shù)據(jù)，不同時段的攝食強(qiáng)度有極顯著差異(F＝28.242，df1＝7,df2＝16,P<0.01)。

進(jìn)一步對不同時段的攝食強(qiáng)度作多重比較(LSD法)，結(jié)果表明：6:00,9:00,18:00的攝食強(qiáng)度顯著高于其他時段(P<0.05)，3:00,21:00顯著低于其他時段(P<0.05)。

如圖1的T-ΔA圖，研究發(fā)現(xiàn)：單環(huán)刺螠攝食最高峰出現(xiàn)在18:00，次高峰為6:00。單環(huán)刺螠攝食最弱的時間是3:00，較弱時間是21:00。

試驗(yàn)期間，單環(huán)刺螠6:00-18:00的攝食強(qiáng)度約占全天總攝食強(qiáng)度的53.99％，18:00-翌日6:00攝食強(qiáng)度約占全天總攝食強(qiáng)度的46.01％。晝、夜攝食強(qiáng)度假設(shè)檢驗(yàn)表明：兩者差異不顯著(t＝0.761<t0.05,6＝2.447，P>0.05)，說明單環(huán)刺螠攝食沒有明顯的晝夜節(jié)律。

基于上述，本方法可以獲得定性的攝食節(jié)律的結(jié)論，有助于養(yǎng)殖投餌策略的制定。

根據(jù)單環(huán)刺螠晨昏攝食的特性，人工養(yǎng)殖中投餌應(yīng)在白天進(jìn)行,夜間不投餌。目前單環(huán)刺螠人工養(yǎng)殖中，建議6:00,18:00各投餌一次，6:00投餌量略大于18:00投餌量。養(yǎng)殖者可以通過觀察投餌后養(yǎng)殖水體由渾濁變清澈的時間來確定投餌量，這樣既可以充分利用餌料、減少浪費(fèi)，又可以防止水質(zhì)惡化。

單環(huán)刺螠棲息于泥沙底質(zhì)，對環(huán)境溫度、鹽度、pH的變化有較大的耐受能力，對硫化物有較強(qiáng)的解毒能力,可以很好地改善池底的生態(tài)環(huán)境。單環(huán)刺螠的生活習(xí)性決定了其可與某些魚蝦品種混養(yǎng)。如具有連續(xù)攝食的特性的中國對蝦，以及表現(xiàn)出晨昏攝食的特性牙鲆等，很多養(yǎng)殖品種可與單環(huán)刺螠的攝食節(jié)律相匹配。王淑芬等在單環(huán)刺螠與日本對蝦混養(yǎng)的池塘養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)中，投入產(chǎn)出比達(dá)到1∶2.84，經(jīng)濟(jì)效益顯著。

因此，通過混養(yǎng)拉動單環(huán)刺螠養(yǎng)殖的發(fā)展。價值在于單環(huán)刺螠與合適的水產(chǎn)動物混養(yǎng)，可以充分利用水體空間，改善底質(zhì)，提高餌料利用率，增加產(chǎn)量，從而取得良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。