本發(fā)明涉作物抗性育種
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體地指一種蠶豆對(duì)豌豆蚜抗性的快速鑒定方法。
背景技術(shù)：
：蠶豆(ViciafabaL.)是世界上重要的豆科作物，因具有糧食、蔬菜、飼料和綠肥兼用等特點(diǎn)，且適應(yīng)性廣及具有較高的固氮量，在世界范圍內(nèi)種植蠶豆的國家超過70個(gè)，種植面積高達(dá)260萬hm2。中國的蠶豆種植面積和產(chǎn)量均居世界首位，分別占世界的42.76％和46.94％。豌豆蚜(AcyrthosiphonpisumHarris)屬于半翅目蚜科，是世界范圍內(nèi)豆科作物及牧草的主要害蟲，其寄主范圍十分廣泛，該蟲能為害豌豆、蠶豆、苜蓿、大豆等豆科作物，以各齡若蟲和成蟲聚集在植物幼嫩部分取食為害，以刺吸性口器吸取汁液，被害植株葉子卷縮，蕾和花變黃脫落，影響生長發(fā)育、開花結(jié)實(shí)和產(chǎn)量，大發(fā)生時(shí)田間植株大量枯死。豌豆蚜的防治研究是近年來比較關(guān)注的方面，通常情況下采用化學(xué)防治方法進(jìn)行防治，也有采用農(nóng)業(yè)防治方法進(jìn)行防治的研究報(bào)道。近年來選育抗蟲品種成為一種重要的農(nóng)業(yè)防治措施，對(duì)于抗蟲品種的選育在苜蓿和豌豆上較多。從現(xiàn)有研究看出，種植抗性品種對(duì)豌豆蚜的發(fā)生有很大程度的抑制作用，同時(shí)減少了化學(xué)農(nóng)藥的使用，降低對(duì)天敵的影響，加大了天敵的自然控制作用。因此，選育有抗性的品種進(jìn)行種植，是防治豌豆蚜的根本途徑之一。優(yōu)異抗性種質(zhì)資源是進(jìn)行抗蟲育種的物質(zhì)基礎(chǔ)，然而，國內(nèi)外迄今尚無蠶豆抗豌豆蚜鑒定的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)抗性鑒定的報(bào)道，所以，建立蠶豆抗豌豆蚜種質(zhì)資源的鑒定方法，對(duì)于開展蠶豆抗豌豆蚜資源的篩選以及抗性育種研究具有重要的意義。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明目的在于針對(duì)蠶豆抗蟲育種的特點(diǎn)和現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種蠶豆對(duì)豌豆蚜抗性的快速鑒定方法，該方法能重復(fù)、快速準(zhǔn)確鑒定蠶豆資源對(duì)豌豆蚜的抗性。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的一種蠶豆對(duì)豌豆蚜抗性的快速鑒定方法，包括以下步驟：1)挑選顆粒飽滿的蠶豆種子，用清水洗凈，浸泡至完全膨脹；2)將蠶豆種子均勻擺在托盤內(nèi)，托盤內(nèi)噴灑清水保濕，光照黑暗交替下培養(yǎng)，并觀察蠶豆苗發(fā)芽生長情況；3)待蠶豆長到2～3葉期時(shí)，接種2-3頭無翅豌豆蚜蟲于正面葉片上；4)接種蚜蟲10～15d，采用計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)每株蠶豆植株上的蚜蟲數(shù)量，求相同品種蠶豆植株上蚜蟲數(shù)量的平均值，從而按以下分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行抗性評(píng)價(jià)，以每株的平均單株蚜量比值定級(jí)，共分5級(jí)：1)0級(jí)：平均蠶豆單株蚜蟲量比值為0-0.25；2)1級(jí)：平均蠶豆單株蚜量比值為0.26-0.50；3)2級(jí)：平均蠶豆單株蚜量比值為0.51-0.90；4)3級(jí)：平均單株蚜量比值為0.91-1.25；5)4級(jí)：平均蠶豆單株蚜量比值為＞1.25；經(jīng)上統(tǒng)計(jì)得知，0級(jí)屬于高抗蟲型，記以HR，1級(jí)屬于抗蟲型，記以R，2級(jí)屬于中抗蟲型，記以MR，3級(jí)屬于感蟲型，記以S，4級(jí)屬于高感蟲型，記以HS。進(jìn)一步地，所述步驟2中，培養(yǎng)環(huán)境的溫度為23±1℃。再進(jìn)一步地，所述步驟2中，培養(yǎng)環(huán)境的濕度為70～80％。再進(jìn)一步地，所述步驟2中，培養(yǎng)環(huán)境的濕度為75％。再進(jìn)一步地，所述步驟2中，培養(yǎng)環(huán)境為恒溫恒濕。本發(fā)明的有益效果在于1、本發(fā)明可在較短時(shí)間內(nèi)連續(xù)鑒定較大數(shù)量的蠶豆苗，有利于大規(guī)模篩選蠶豆抗豌豆蚜品種。2、本發(fā)明可以讓豌豆蚜在一個(gè)可控、密閉的環(huán)境中繁殖，保證了鑒定結(jié)果的重復(fù)性和可靠性。3、本發(fā)明可以直接觀察蠶豆苗的感蟲情況4、本發(fā)明能夠使蠶豆保持正常生長，蠶豆抗豌豆蚜鑒定技術(shù)可以準(zhǔn)確統(tǒng)計(jì)蚜蟲的繁殖數(shù)量，鑒定區(qū)分蠶豆品種的抗蚜性5、用本發(fā)明提供的方法鑒定蠶豆品種的抗豌豆蚜性，能夠大量、快速、準(zhǔn)確的區(qū)分品種間抗豌豆蚜性間的差異，為抗蟲親本選擇提供依據(jù)，是選育抗豌豆蚜蠶豆品種資源最經(jīng)濟(jì)有效的方法，進(jìn)而從根本上減少豌豆蚜對(duì)蠶豆產(chǎn)量和質(zhì)量的損失。具體實(shí)施方式為了更好地解釋本發(fā)明，以下結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的主要內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于以下實(shí)施例。實(shí)施例1供試豌豆蚜的準(zhǔn)備1)豌豆蚜的室內(nèi)大量飼養(yǎng)：豌豆蚜為蠶豆上田間采集，在本實(shí)驗(yàn)室種植的蠶豆苗上繼代飼養(yǎng)，溫度為(23±1)℃，光照周期為16L:8D，濕度為75％。2)供試豌豆蚜的準(zhǔn)備：采用改進(jìn)的葉子圓片法，在人工光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)供試若蚜。具體為：將新鮮的蠶豆葉片用巴斯消毒液浸泡10min后放在含有瓊脂層(1.5％)的培養(yǎng)皿內(nèi)，挑選健康的成蚜置于葉片上，蓋上蓋子，并用封口膜封上以防止豌豆蚜爬出。24h后，將培養(yǎng)皿內(nèi)的成蚜取出。第4天后取4日齡若蚜進(jìn)行人工接蟲實(shí)驗(yàn)。蚜蟲培養(yǎng)條件為：溫度為(23±1)℃，光照周期為16L:8D，濕度為75％。實(shí)施例2室內(nèi)抗蟲性鑒定將各蠶豆資源為實(shí)驗(yàn)材料，待蠶豆長到2-3葉期時(shí)，接種2-3頭無翅蚜蟲于正面葉片。接種豌豆蚜蟲10d后采用計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)蚜蟲數(shù)量，求得各相同品種蠶豆植株上蚜蟲數(shù)量的平均值，從而按以下分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行抗性評(píng)價(jià)，以每株的平均單株蚜量比值定級(jí)，共分5級(jí)：1)0級(jí)：平均蠶豆單株蚜蟲量比值為0-0.25；2)1級(jí)：平均蠶豆單株蚜量比值為0.26-0.50；3)2級(jí)：平均蠶豆單株蚜量比值為0.51-0.90；4)3級(jí)：平均單株蚜量比值為0.91-1.25；5)4級(jí)：平均蠶豆單株蚜量比值為＞1.25；經(jīng)上統(tǒng)計(jì)得知，0級(jí)屬于高抗蟲型，記以HR，1級(jí)屬于抗蟲型，記以R，2級(jí)屬于中抗蟲型，記以MR，3級(jí)屬于感蟲型，記以S，4級(jí)屬于高感蟲型，記以HS。實(shí)施例3綠豆資源抗性鑒定結(jié)果利用上述方法對(duì)生產(chǎn)上應(yīng)用的4份蠶豆資源進(jìn)行了抗豌豆蚜的鑒定評(píng)價(jià)，鑒定結(jié)果見表1。表1蠶豆室內(nèi)抗蚜性鑒定結(jié)果品種平均單株蚜量比值抗性程度成都大白0.4176R臨蠶5號(hào)0.7848MR鄂蠶1號(hào)1.0609S靖蠶豆1302.4280HS由上表可知，供試各蠶豆資源抗蚜性表現(xiàn)顯著的差異，證明應(yīng)用本發(fā)明提供的鑒定方法能夠快速、準(zhǔn)確地區(qū)分蠶豆抗豌豆蚜品種和感豌豆蚜品種。由此可見，關(guān)于品種抗蚜性鑒定，利用室內(nèi)人工接蟲的方法，使材料感蟲。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蠶豆的抗蚜性存在差異，其中培養(yǎng)條件對(duì)感蟲程度有很大的影響。因此以后在對(duì)育種材料進(jìn)行抗蚜性鑒定時(shí)，應(yīng)控制溫度和濕度，提供具有實(shí)際育種意義的抗性評(píng)價(jià)。該方法可以用來快速地篩選出抗豌豆蚜的蠶豆品種，為以后的蠶豆生產(chǎn)上種子品系的選擇提供參考。其它未詳細(xì)說明的部分均為現(xiàn)有技術(shù)。盡管上述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做出了詳盡的描述，但它僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部實(shí)施例，人們還可以根據(jù)本實(shí)施例在不經(jīng)創(chuàng)造性前提下獲得其他實(shí)施例，這些實(shí)施例都屬于本發(fā)明保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3