本發(fā)明涉及一種昆蟲(chóng)的人工繁殖方法，特別是涉及一種刺吸式口器昆蟲(chóng)-用活體寄主植物擴(kuò)繁中黑盲蝽的方法。

背景技術(shù)：

隨著棉花種植，刺吸式口氣昆蟲(chóng)棉盲蝽、棉蚜等種群數(shù)量逐年上升，并呈現(xiàn)災(zāi)變的趨勢(shì)。其中，對(duì)棉田破壞最嚴(yán)重的害蟲(chóng)之一是昆蟲(chóng)綱半翅目盲蝽科苜蓿盲蝽屬的中黑盲蝽，體型中小，體長(zhǎng)6-7mm，寬3-4mm。前胸背板中央具2個(gè)小圓黑點(diǎn)，小盾片、爪片大部為黑褐色。

中黑盲蝽在長(zhǎng)江流域棉區(qū)5—6代，黃河流域棉區(qū)1年生4代，以卵在棉葉柄中越冬。下年4月，越冬卵孵化，初孵若蟲(chóng)課在苜蓿、苕子、篙類(lèi)雜草上活動(dòng)。一代成蟲(chóng)于5月上旬出現(xiàn)、二代6月下旬、三代8月上旬、四代9月上旬。

中黑盲蝽在1982年以前只有零星發(fā)生，為偶發(fā)性害蟲(chóng)。近年來(lái)，中黑盲蝽的發(fā)生和危害程度日趨加重，上升為棉花主要害蟲(chóng)的優(yōu)勢(shì)種,減產(chǎn)損失一般的30—40％，嚴(yán)重的70—80％。

近些年來(lái)，抗蟲(chóng)性轉(zhuǎn)基因棉花的推廣在很大程度上減少了中黑盲蝽的蟲(chóng)害，但隨著轉(zhuǎn)基因棉花的大面積推廣種植，可能會(huì)出現(xiàn)抗轉(zhuǎn)基因棉花對(duì)其毒性的變種。

中黑盲蝽還能夠寄生于艾蒿、苜蓿等植物，形成交叉?zhèn)鞑ィ@也增加了對(duì)中黑盲蝽控制的難度。

近期的研究發(fā)現(xiàn)中黑盲蝽對(duì)不同抗性和蟲(chóng)害處理棉花具有選擇趨性，這進(jìn)一步給棉田中黑盲蝽的蟲(chóng)害防治帶來(lái)了復(fù)雜性。

因此，研究中黑盲蝽的必要條件之一就是在室內(nèi)繁殖中黑盲蝽以獲得充足的試蟲(chóng)。

目前中黑盲蝽的飼養(yǎng)主要以四季豆為食料，但該方法很難達(dá)到多代連續(xù)飼養(yǎng)的目的，多數(shù)只能維持到第三代，則開(kāi)始出現(xiàn)產(chǎn)卵量明顯下降，甚至所產(chǎn)卵不能孵化，孵化的昆蟲(chóng)活力明顯下降，最后造成試蟲(chóng)斷代，給試驗(yàn)研究帶來(lái)較大的困難。因此，如何獲得穩(wěn)定的、健壯的中黑盲蝽蟲(chóng)源且可以周年多代飼養(yǎng)的人工擴(kuò)繁體系，是目前急需解決的問(wèn)題。

另一方面，畢竟中黑盲蝽寄生于棉花與寄生于四季豆的生理、病理機(jī)制不同，以四季豆為食療培養(yǎng)中黑盲蝽在一定程度上提供了蟲(chóng)源，但不能夠用于研究中黑盲蝽對(duì)棉花的侵害作用。

室內(nèi)研究中黑盲蝽在棉花中的生活史和生物學(xué)特性是研究棉田防治技術(shù)的手段之一，而進(jìn)行該研究的基礎(chǔ)是要能讓中黑盲蝽在棉花苗上生長(zhǎng)。當(dāng)然，未見(jiàn)用棉花植株部分做中黑盲蝽培養(yǎng)用的食物的報(bào)道，在研究棉田蟲(chóng)害防治的工作中，用棉花植株培養(yǎng)中黑盲蝽必然比四季豆更貼近天然宿主，具有更好的研究?jī)?yōu)勢(shì)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供一種穩(wěn)定的可以周年多代飼養(yǎng)的人工擴(kuò)繁方法。

本發(fā)明提供了一種用活體寄主植物擴(kuò)繁中黑盲蝽的方法，以棉花苗和動(dòng)物蛋白為飼養(yǎng)中黑盲蝽的食物。

在一些實(shí)施方式中，所述動(dòng)物蛋白為棉蚜。

在一些實(shí)施方式中，所述棉花苗是盆栽棉花苗。

在一些實(shí)施方式中，將所述棉花苗放入若蟲(chóng)繁殖籠內(nèi)，每3-5天更換一批新鮮的所述棉花苗，并添加動(dòng)物蛋白，同時(shí)將取食過(guò)的所述棉花苗從培養(yǎng)皿內(nèi)取出并放置在所述若蟲(chóng)繁殖籠內(nèi)待自然萎蔫，其上的中黑盲蝽完全轉(zhuǎn)移到新鮮所述棉花苗上后，取出丟棄。

在一些實(shí)施方式中，等到所述中黑盲蝽羽化24h后，用吸蟲(chóng)器收集成蟲(chóng)，并將所述成蟲(chóng)轉(zhuǎn)移至產(chǎn)卵籠內(nèi)。

在一些實(shí)施方式中，所述產(chǎn)卵籠內(nèi)放置2個(gè)產(chǎn)卵架。

在一些實(shí)施方式中，在無(wú)菌玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)平鋪3-5層濾紙，放置在所述產(chǎn)卵籠內(nèi)的所述產(chǎn)卵架上，所述濾紙上噴灑適量無(wú)菌水，每日2次，保持所述濾紙濕潤(rùn)，供盲蝽在其上產(chǎn)卵，每4天更換一批新鮮棉花苗供成蟲(chóng)取食，同時(shí)提供動(dòng)物蛋白。

在一些實(shí)施方式中，每2天更換1次所述培養(yǎng)皿及所述濾紙，將產(chǎn)卵后的所述濾紙取出，放置在人工氣候箱內(nèi)，5-7天后，卵孵化，隨即將濾紙轉(zhuǎn)移至所述若蟲(chóng)繁殖籠。

在一些實(shí)施方式中，所述人工氣候箱內(nèi)的條件為：T＝25℃±3℃，RH＝70％～80％。

在一些實(shí)施方式中，若暫時(shí)無(wú)需大量蟲(chóng)源，將產(chǎn)卵后的所述濾紙置于透氣紙盒中，3-5℃儲(chǔ)存。

該方法實(shí)現(xiàn)了室內(nèi)中黑盲蝽在棉花苗上的生長(zhǎng)，為中黑盲蝽的研究提供了蟲(chóng)源，且為室內(nèi)研究中黑盲蝽在棉花中的生活史和生物學(xué)特性奠定了基礎(chǔ)。

具體實(shí)施方式

為了更好的解釋本發(fā)明的技術(shù)方案，下面詳細(xì)介紹本發(fā)明的各個(gè)實(shí)施例。以下實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的固定或限制。若未特別指明，實(shí)施例中所用的技術(shù)特征可以替換為具有在不背離發(fā)明構(gòu)思前提下等同或相似功能或效果的其他本領(lǐng)域已知的技術(shù)特征。

為實(shí)現(xiàn)盲蝽生產(chǎn)的大規(guī)模、低成本和標(biāo)準(zhǔn)化，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

實(shí)施例1

不同寄主植物對(duì)中黑盲蝽生長(zhǎng)發(fā)育的影響

供試寄主植物：盆栽豇豆、棉花、四季豆，待成株后作為供試植物；水培綠豆苗待苗高8－10cm時(shí)作為供試植物。

供試?yán)ハx(chóng)：選取生長(zhǎng)健壯活潑的體型大小一致的初孵中黑盲蝽若蟲(chóng)作為供試?yán)ハx(chóng)。

動(dòng)物蛋白：棉蚜。

試驗(yàn)方法：試驗(yàn)采用直徑10cm的培養(yǎng)皿，每皿內(nèi)放置新鮮供試植物：綠豆苗、豇豆、棉花，根部或莖部用脫脂棉保濕，然后接入1頭初孵中黑盲蝽若蟲(chóng)，每種植物設(shè)置9個(gè)生物學(xué)重復(fù)，每日更換新鮮植物供其取食并記錄死亡率，羽化成蟲(chóng)稱(chēng)量體重；同樣方法在培養(yǎng)皿中綠豆苗、豇豆、棉花，另外添加足量動(dòng)物蛋白，然后接入1頭初孵中黑盲蝽，每種植物設(shè)置8個(gè)生物學(xué)重復(fù)，每日更換新鮮植物同時(shí)添加足量動(dòng)物蛋白，并記錄死亡率及成蟲(chóng)體重。

試驗(yàn)結(jié)果如表1所示：

表1不同寄主植物飼養(yǎng)中黑盲蝽的若蟲(chóng)死亡率及成蟲(chóng)體重

從表1數(shù)據(jù)可以得出棉花苗添加動(dòng)物蛋白后若蟲(chóng)死亡率從100％降到12.5％，成蟲(chóng)體重也有明顯增加且該重量大于用四季豆或四季豆加動(dòng)物蛋白組的結(jié)果。這將有利于研究中黑盲蝽與棉花的相互作用。

綠豆苗添加動(dòng)物蛋白后，成蟲(chóng)體重略有下降，這說(shuō)明動(dòng)物蛋白的加入也有可能使中黑盲蝽宿主苗的性能變差。豇豆苗加了動(dòng)物蛋白后死亡率下降沒(méi)有棉花苗組幅度大。棉花苗加動(dòng)物蛋白所表現(xiàn)出的優(yōu)良效果不是動(dòng)物蛋白單獨(dú)起作用的，而是棉花苗與動(dòng)物蛋白之間共同作用的結(jié)果。

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，中黑盲蝽的天然宿主飼養(yǎng)中黑盲蝽的情況差別很大，考慮到研究棉花病蟲(chóng)害而培養(yǎng)中黑盲蝽，通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)使用棉花苗加動(dòng)物蛋白飼養(yǎng)繁殖中黑盲蝽的效果最好。

本發(fā)明用棉花苗飼養(yǎng)繁殖中黑盲蝽的擴(kuò)繁方法包括以下步驟：

(1)采用盆栽棉花，生長(zhǎng)時(shí)間為20天，生產(chǎn)的棉花苗用于下一步操作。

(2)將(1)中培育的棉花苗，放入若蟲(chóng)繁殖籠內(nèi)(50cm*50cm*50cm)，每4天更換一批新鮮棉花苗，同時(shí)每天添加足量棉蚜補(bǔ)充中黑盲蝽若蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育所必需的動(dòng)物蛋白，同時(shí)將取食過(guò)的棉花苗從培養(yǎng)皿內(nèi)取出并放置在籠內(nèi)待自然萎蔫，其上的中黑盲蝽完全轉(zhuǎn)移到新鮮棉花苗上后，取出丟棄。

(3)等到中黑盲蝽羽化24h后，用吸蟲(chóng)器收集成蟲(chóng)，并轉(zhuǎn)移至產(chǎn)卵籠內(nèi)(50cm*50cm*50cm)。產(chǎn)卵籠內(nèi)放置2個(gè)產(chǎn)卵架。

(4)在無(wú)菌玻璃培養(yǎng)皿(直徑90mm)內(nèi)平鋪5層濾紙，放置在(3)中產(chǎn)卵架上，濾紙上噴灑適量無(wú)菌水，每日2次，保持濾紙濕潤(rùn)，供盲蝽在其上產(chǎn)卵。同時(shí)按(2)步驟方法所述提供適量棉花苗供成蟲(chóng)取食，同時(shí)提供動(dòng)物蛋白。

(5)每2天更換1次培養(yǎng)皿及濾紙，將產(chǎn)卵后的濾紙取出，放置在人工氣候箱內(nèi)(T＝26℃±3℃，RH＝70％～80％)，5-7天后，卵孵化，隨即將濾紙轉(zhuǎn)移至(2)步驟若蟲(chóng)繁殖籠，從(2)步驟開(kāi)始重復(fù)，可穩(wěn)定繼代擴(kuò)繁。用本發(fā)明中的方法擴(kuò)繁中黑盲蝽已經(jīng)連續(xù)飼養(yǎng)超過(guò)12代。

(5)若暫時(shí)無(wú)需大量蟲(chóng)源，可將產(chǎn)卵后的濾紙置于透氣紙盒中，3-5℃儲(chǔ)存，儲(chǔ)存期可長(zhǎng)達(dá)15天。視研究需要取出儲(chǔ)存的卵并按上述方法飼養(yǎng)獲得試蟲(chóng)。

以上各個(gè)實(shí)施例只是用于進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，并不是用來(lái)限制本發(fā)明的保護(hù)范圍，凡是基于本發(fā)明的構(gòu)思所作出的等同變換及對(duì)本發(fā)明的各個(gè)技術(shù)方案顯而易見(jiàn)的改進(jìn)，均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。