本發(fā)明屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種古楠木嫁接繁育保存方法。

背景技術(shù)：

浙江楠(Phoebe chekiangensis)、閩楠(P.bournei)屬樟科楠屬的高大喬木,是“金絲楠木”的原種植物種之一,具有很高的經(jīng)濟(jì)價值，為亞熱帶地區(qū)特有珍貴樹種，自然分布于浙江、福建、江西、湖南、湖北、安徽、廣西、廣東、貴州等地(中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會，1982；安徽植物志協(xié)作組,1986)。其樹干通直，材質(zhì)優(yōu)美，是高檔家具制作的特種用材；樹體高大，四季翠綠，也是園林綠化優(yōu)良樹種。雖然浙江楠、閩楠的經(jīng)濟(jì)與觀賞價值高，但現(xiàn)存資源量極少,多以古樹名木幸存于各地風(fēng)水林或寺廟，有效原地保護(hù)和異地擴(kuò)繁保存該類古楠木殘存種質(zhì)資源已成為迫在眉捷。之前的研究多集中于種子休眠(史曉華和史忠禮1990)、幼樹或苗木扦插試驗和組織培養(yǎng)(葉金山2013、王東光2013、羅春平2015、申展2013、曲芬霞2010等)、苗木培育(李冬林和向其柏2004,2006、王藝等2013、劉志強(qiáng)2001等等)、種群生物多樣性(陳來德2012、吳大榮2001、2003、周祥鳳2005、王通2000、劉寶2005等)、人工林栽培(邵明曉2014、王金盾2015、胡永顏2012、劉寶2013、歐建德2015、彭龍福,2003；吳載嶂,2005等)和生態(tài)學(xué)(馬明東等,2008；王琦等,2013、鄒惠渝1995、吳大榮1997、鄒秀紅2002等)等方面，而如何利用無性繁殖技術(shù)，有效繁育浙江楠古樹、閩楠古樹等古楠木基因型卻未見報道。

浙江楠、閩楠均屬異花授粉樹種，主要靠種子繁殖，通過采集其種子繁育成自由授粉后代，因子代分離而保存的并非原株基因型。因此，需要采用無性繁殖方式，將原有基因型保存下來?，F(xiàn)有研究僅涉及利用楠木子代苗進(jìn)行扦插或組織培養(yǎng)試驗。而針對數(shù)百年大樹、古樹楠木，生理年齡大，其開花結(jié)實能力下降，且枝條老化，用其作為扦插或組培材料一般不能成功。從理認(rèn)上講，組織培養(yǎng)具有繁殖速度快、能保持母本的優(yōu)良遺傳特性、能幼化繁殖材料的年齡等優(yōu)點，是實現(xiàn)優(yōu)異種質(zhì)繁殖、長期保存的可選擇途徑，但利用老化程度大的古楠枝條、芽等進(jìn)行組織繁育時，實際成功的機(jī)會不大。為此，首次提出了嫁接保存古楠木基因型的方法并開展相關(guān)試驗。此方法也是營建楠木類樹種嫁接種子園以實現(xiàn)提早開花結(jié)果的重要方法。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為了解決上述問題，本發(fā)明提供一種古楠木嫁接繁育保存方法。

本發(fā)明提供的古楠木嫁接繁育保存方法，其包括如下步驟：

1)于12月～翌年2月間，樹芽萌動前采集古楠木樹冠中上部的當(dāng)年生枝條，去部分葉后濕紙保濕保存帶回，貯存于濕沙保存；

2)嫁接時間為2～3月砧木樹芽開始萌動時，且要求接穗芽未萌動；

3)采用20～25cm的當(dāng)年生整枝作接穗；過長枝去掉基部，每個穗條需有頂芽和相應(yīng)的側(cè)芽。

4)采用1～2年生浙江楠、閩楠容器苗作砧木，采用切接法嫁接；

5)嫁接后將嫁接株連同容器假植于土中，保證嫁接株能從土壤中吸收水分以保持生長狀態(tài)。做拱棚加蓋塑料膜保濕，以保證長枝條接穗不易干燥枯死。

6)每7～10天觀察一次，以薄膜上有水霧或小水滴為標(biāo)準(zhǔn)，適當(dāng)噴施水分保持棚內(nèi)濕度，待新芽長出及時揭去棚上薄膜，進(jìn)行正常水肥管理。

本發(fā)明一個實施方案中，新葉開始生長后，及時揭棚，增施葉面肥以促進(jìn)生長，到6月初放入陰棚中進(jìn)行培養(yǎng)，以達(dá)到當(dāng)年30-40cm的生長量，培育成健壯的嫁接苗。

其中，采集穗條時，去掉大部分葉片，保留枝頂部4～5片葉子。

其中，砧木要求生長健壯、無病蟲害，地徑在0.4cm以上。

其中，嫁接時，保留頂部二個半片葉，去掉其余的葉片。

其中，所述的古楠木為樹齡在200年以上的浙江楠或閩楠大樹。

采用本發(fā)明的嫁接方法，古楠木的嫁接成活率達(dá)82％。一年生嫁接苗可達(dá)30～40cm，生長正常，枝葉保持原株(古楠木)特征。

具體實施方式

以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。

實施例1不同接穗長度進(jìn)行嫁接試驗

一般來說嫁接的接穗長度是越短越好，多數(shù)保留1個飽滿芽為最優(yōu)。經(jīng)多次預(yù)實驗發(fā)現(xiàn)，針對浙江楠、閩楠古樹上采集的穗條，采用常規(guī)方法嫁接無乎不能成活。為此，專門探討了不同長度的接穗對成活率的影響。但隨著接穗長度增加，在常規(guī)管理條件下，即接后經(jīng)密閉包扎，放于正常蔭棚下培養(yǎng)，長枝條因失水快會慢慢枯死，而短枝條雖失水慢些，但形成愈合難，成活率不高。為此，經(jīng)后續(xù)管理方式試驗改進(jìn)，再次進(jìn)行不同長度的接穗試驗。結(jié)果見表1。

表1不同長度接穗對古楠木嫁接成活的影響

如表1所示，短枝嫁接株生長勢明顯弱，成活率也顯著低，而采用自然長度(絕大部分)的當(dāng)年生枝條進(jìn)行嫁接，保留的芽多，一般可達(dá)5個以上，成少后各芽均能生長，整體接株生長旺盛。該結(jié)果在浙江楠、閩楠上無明顯差異，也許這與該屬植物的生物學(xué)特性相關(guān)。

實施例2不同部位穗條嫁接成活率

針對古樹而言，浙江楠、閩楠都一樣，隨著樹齡增大其發(fā)育年齡增大，樹生長勢逐年下降，尤其表現(xiàn)在枝葉的生長上更為明顯。選擇何處的枝條才能嫁接出較為滿意的成活率和優(yōu)良苗木是本試驗的目的。

試驗采自古楠木下部枝條(采集最為方便)、樹冠中部和上部三個部位的穗條進(jìn)行同樣條件的嫁接試驗，試驗按當(dāng)年生長枝、春季嫁接和拱棚保濕管理等條件進(jìn)行。結(jié)果見表2。

表2古楠木三個部位枝條的嫁接成活率

由表2所示，樹冠上部枝條嫁接成活率最高，二個樹種都一樣。該部位枝條營養(yǎng)供應(yīng)充足、受光量大，生長勢好，枝條相對粗狀，嫁接成活率最優(yōu)(最高可達(dá)92％)。但是針對高大的古楠木而言，該部位枝條采集十分困難，一般都以采集中部枝條為多，其成活率也能達(dá)到繁育與保存要求。

實施例3不同采條時間嫁接成活率

一般來說，嫁接用穗條以隨采隨接利于成活。

本試驗采用貯存的未萌動枝條和萌動后隨采枝條進(jìn)行試驗，從實際試驗結(jié)果看，后者成活株極少(見表3)，無應(yīng)用價值。

表3不同采集穗條時間對古楠木嫁接成活影響

實施例4不同嫁接時間的嫁接成活率

嫁接時間是影響成活率的關(guān)鍵因子之一，一般對于發(fā)育年齡大的接穗，其分生組織少、再生能力差，更需要探討最好的嫁接時間以達(dá)到能促進(jìn)其愈傷組織產(chǎn)生。為此，除春季試驗外，還進(jìn)行了江南梅雨季和晚秋二次嫁接試驗，全部進(jìn)行長枝條、容器苗砧木和按后埋土加拱棚保濕管理。結(jié)果見表4。從表4可見，在6月初梅雨季嫁接，穗條隨采隨接，接后在拱棚中保濕管理因氣溫提高，不斷出現(xiàn)芽、葉發(fā)黑，葉脫落。采用常規(guī)管理的配合試驗也發(fā)現(xiàn)芽枯萎而易死。該季節(jié)易于形成愈傷組織，但濕度與溫度的雙重影響還是造成難成活。

表4不同嫁接時間對古楠木嫁接成活影響

實施例5不同接后管理方式的嫁接成活率

一般樹木嫁接時用塑料包扎帶包好后放于正常條件下或溫室培養(yǎng)。本發(fā)明針對該方法嫁接成活率低，開展了三種接后苗管理方式：常規(guī)管理(CK)、嫁接后套袋保濕處理和嫁接后埋土假植且加蓋薄膜保濕處理。1個月后統(tǒng)計嫁接成活率結(jié)果見表5。

由表5所示，二個樹種各50株接后進(jìn)行三種處理，二個種間差異不大，但三種處理間差異極顯著。在拱棚保濕保溫條件下不僅成活率顯著提高，而且生長開始早，長勢好，全年生長量也大。

表5不同接后管理方式對古楠木嫁接成活影響

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出繼續(xù)改進(jìn)，而且嫁接工作與嫁接工技術(shù)密切相關(guān)，這些改進(jìn)也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。