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一種防治香蕉葉斑病的復(fù)配殺菌劑的制作方法

文檔序號(hào):12681041閱讀:485來源:國知局
本發(fā)明與殺菌劑有關(guān),具體而言,屬于含有機(jī)化合物的殺菌劑,進(jìn)一步來說,屬于防治香蕉葉斑病的殺菌劑。對(duì)幾乎所有真菌界的病害如白粉病、銹病、穎枯病、網(wǎng)斑病、霜霉病、稻瘟病等均有良好的活性。技術(shù)背景香蕉葉斑病,在華南香蕉產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生,常見的有褐緣灰斑病、灰紋病和煤紋病,其中褐緣灰斑病最為嚴(yán)重。在病害流行年份,葉片受害面積為20%~40%,嚴(yán)重時(shí)達(dá)80%以上,病株產(chǎn)量減少,果實(shí)品質(zhì)下降,嚴(yán)重時(shí)減產(chǎn)50%以上。原有的防治方案是在重點(diǎn)時(shí)期使用《靚果安》液進(jìn)行噴霧,或用《速凈》+《大蒜油》防治。目前尚無更好的防治藥物。嘧菌酯(Azoxystrobin),是甲氧基丙烯酸酯(Strobilurin)類殺菌劑,高效、廣譜,對(duì)幾乎所有的真菌界(子囊菌亞門、擔(dān)子菌亞門、鞭毛菌亞門和半知菌亞門)病害如白粉病、銹病、穎枯病、網(wǎng)斑病、霜霉病、稻瘟病等均有良好的活性。丙硫唑,化學(xué)名稱為5-(丙硫基)-1H-苯并咪唑-2-基-氨基甲酸甲酯,為低毒、廣譜、內(nèi)吸性苯并咪唑類殺菌劑。具有保護(hù)和治療作用。中國專利數(shù)據(jù)庫中涉及防治香蕉葉斑病的申請(qǐng)件有:ZL991029887號(hào)《烯唑醇乳液防治香蕉葉斑病的應(yīng)用》、011147059號(hào)《一種防治香蕉葉斑病、炭疽病、葉斑病的農(nóng)藥及其制備方法》、ZL200810032232X號(hào)《具有殺滅香蕉葉斑病菌等有害真菌作用的組合物》、2008100358694號(hào)《一種防治香蕉葉斑病菌等有害真菌的組合物》、ZL2011800367547號(hào)《香蕉葉斑病的防除方法》、2012100248084號(hào)《一種防治香蕉葉斑病的殺菌劑》和2014106880429號(hào)《一種防治香蕉葉斑病的殺菌組合物》。目前尚無用嘧菌酯與丙硫唑復(fù)配防治香蕉葉斑病殺菌劑的申請(qǐng)件。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明旨在提供一種用嘧菌酯與丙硫唑復(fù)配的防治香蕉葉斑病的復(fù)配殺菌劑,以減緩病原菌對(duì)香蕉作物的危害,提高香蕉產(chǎn)量與品質(zhì)。發(fā)明人對(duì)具有殺滅葉斑病屬真菌的農(nóng)藥進(jìn)行反復(fù)篩選,并對(duì)混配藥劑的原料藥質(zhì)量配比進(jìn)行反復(fù)試驗(yàn),對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比,找到一種復(fù)合殺菌劑,對(duì)香蕉葉斑病病菌具備較強(qiáng)的毒殺能力。發(fā)明人提供的防治香蕉葉斑病的復(fù)配殺菌劑是以嘧菌酯與丙硫唑?yàn)榛?,按照嘧菌酯與丙硫唑的質(zhì)量配比1∶1~1∶8復(fù)配而成的復(fù)配殺菌劑。對(duì)上述不同配比的復(fù)配殺菌劑進(jìn)行篩選試驗(yàn);根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,發(fā)明人確定,以嘧菌酯與丙硫唑?yàn)榛蠌?fù)配而成的復(fù)配殺菌劑,在質(zhì)量配比1∶1~1∶8的范圍內(nèi)對(duì)香蕉葉斑病的防治具有增效作用;其中嘧菌酯與丙硫唑的質(zhì)量配比1∶1~1∶8時(shí),防治效果較好。所述嘧菌酯為質(zhì)量分?jǐn)?shù)98%的原藥,由浙江禾本科技有限公司生產(chǎn);所述丙硫唑?yàn)?8%的原藥,由貴州道元生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。上述防治香蕉葉斑病的復(fù)配殺菌劑原料質(zhì)量配比的篩選試驗(yàn)如下:1.試驗(yàn)自的以香蕉葉斑病菌為靶標(biāo),采用菌絲生長(zhǎng)速率法,測(cè)定嘧菌酯·丙硫唑復(fù)配的最佳比例。2.試驗(yàn)條件2.1供試靶標(biāo)香蕉葉斑病菌(Mycosphaerellafijiensis),保存在4℃冰箱中。2.2培養(yǎng)條件挑取試管中生長(zhǎng)的香蕉葉斑病菌,在磨砂破璃管中研磨成菌絲片段,然后涂布在AEA培養(yǎng)基平板上,25℃下預(yù)培10d,平板表面均勻地長(zhǎng)出香蕉葉斑病菌,這樣可以從平板各位置制取菌絲塊,菌絲塊大小可以達(dá)到直徑5mm,菌齡一致。該菌生長(zhǎng)很慢。2.3儀器設(shè)備LRH-250光照培養(yǎng)箱、SW-CJ-2F雙人雙面凈化工作臺(tái),以及eppendorf移液器、烘箱、打孔器、培養(yǎng)皿等。3.試驗(yàn)設(shè)計(jì)3.1試驗(yàn)藥劑嘧菌酯原藥,有效含量98%,由浙江禾本科技有限公司提供;丙硫唑原藥,有效含量98%,由貴州道元生物技術(shù)有限公司提供。3.2試驗(yàn)處理3.2.1劑量設(shè)置供試藥劑嘧菌酯用甲醇配成2000μg/ml母液;丙硫唑用0.2MHC1配成4000μg/ml母液。嘧菌酯、丙硫唑分別以1∶1、1∶2、1∶4、1∶6、1∶8五個(gè)比例復(fù)配。藥劑分別按預(yù)備試驗(yàn)后所設(shè)計(jì)的系列濃度加入到AEA培養(yǎng)基中制成含藥平板。嘧菌酯的測(cè)定濃度為5、1.25、0.3125、0.078、0.02、0.005μ/ml;丙硫唑的測(cè)定濃度為10、5、2.5、1.25、0.625μg/ml。嘧菌酯·丙硫唑復(fù)配劑的測(cè)定濃度見表中。設(shè)無藥平板對(duì)照。各處理的AEA培養(yǎng)基包括空白對(duì)照含50μg/ml的水楊肟酸抑制旁路氧化途徑。3.2.2試驗(yàn)重復(fù)各濃度處理重復(fù)4皿。4.試驗(yàn)方法釆用菌絲生長(zhǎng)速率法。挑取預(yù)先制備的菌絲塊接種于不同藥劑濃度的AEA培養(yǎng)基平板上,在25℃下培養(yǎng)22d,檢查菌落直徑,計(jì)算各藥劑處理抑制菌絲生長(zhǎng)的百分率,通過抑制率的機(jī)率值和系列藥劑濃度的對(duì)數(shù)值之間的線性回歸分析,求出各藥劑的EC5。,根據(jù)Wadley方法計(jì)算混配劑的增效作用,即SR<0.5,則兩種藥劑混配有拮抗作用,0.5≤SR≤1.5,則兩種藥劑混配有相加作用,SR>1.5,則兩種藥劑混配有增效作用。5.數(shù)據(jù)調(diào)查與統(tǒng)計(jì)分析5.1嘧菌酯、丙硫唑單劑對(duì)香蕉葉斑病菌的毒力測(cè)定5.1.1嘧菌酯的毒力表1嘧菌酯對(duì)香蕉葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果從表1可看出,嘧菌酯抑制香蕉葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的劑量反應(yīng)曲線回歸方程為Y=5.756+0.5544X,相關(guān)系數(shù)為r=0.99,根據(jù)回歸方程計(jì)算ES50為0.0433μg/ml。5.1.2丙硫唑的毒力表2丙硫唑?qū)ο憬度~斑病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果從表2可以看出,丙硫唑抑制香蕉葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的劑量反應(yīng)曲線回歸方程為Y=4.7053+0.985IX,相關(guān)系數(shù)為r=0.99,根據(jù)回歸方程計(jì)算得到EC50為1.9917μg/ml。5.2嘧菌酯·丙硫唑復(fù)配劑對(duì)香蕉葉斑病菌的毒力測(cè)定根據(jù)各藥劑單劑及復(fù)配劑抑制菌絲生長(zhǎng)百分率及毒力回歸方程,各復(fù)配組合的互作效果計(jì)算如下。5.3.1嘧菌酯·丙硫唑(1∶1)復(fù)配對(duì)香蕉葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果從表1和表2已知嘧菌酯和丙硫唑單劑對(duì)香蕉葉斑病菌的EC50值分別為0.0433μg/ml和1.9917μg/ml,根據(jù)該兩種藥劑的毒力,1∶1復(fù)配后的理論EC50值應(yīng)為:EC50(理論值=1/[(1/2)/0.0433+(1/2)/1.9917]=0.0848μg/mlSR50=EC50(理論值)/EC5D(觀察值)=0.0848/0.872=0.975.2.2嘧菌酯·丙硫唑(1∶2)復(fù)配對(duì)香蕉葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果EC50(理論值)=1/[(1/3)/0.0433+(2/3)/I.9917]=0.1245μg/mlSR50=EC50(理論值)/EC50(觀察值)=0.1245/0.1137=1.095.2.3嘧菌酯·丙硫唑(1∶4)復(fù)配對(duì)香蕉葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果EC50(理論值)=1/[(1/5)/0.0433+(4/5)/1.9917]=0.1992μg/mlSR50=EC50(理論值)/EC50(觀察值)=0.1992/0.1907=1.045.2.4嘧菌酯·丙硫唑(1∶6)復(fù)配對(duì)香蕉葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果ECS0(理論值)=1/[(1/7)/0.0433+(6/7)/1.9917]=0.2681μg/mlSR50=EC50(理論值)/EC50(觀察值)=0.2681/0.2621=1.025.2.5嘧菌酯·丙硫唑(1∶8)復(fù)配對(duì)香蕉葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果表3嘧菌酯·丙硫唑復(fù)配劑配方篩選試驗(yàn)結(jié)果匯總藥劑EC50μg/mlSR50嘧菌酯0.0433/丙硫唑1.9917/嘧∶丙=1∶10.08720.97嘧∶丙=1∶20.11371.09嘧∶丙=1∶40.19071.04嘧∶丙=1∶60.26211.02嘧∶丙=1∶80.30511.09EC50(理論值)=1/[(1/9)/0.0433+(8/9)/I.9917]=0.3320μg/mlSR50=EC50(理論值)/EC5D(觀察值)=0.3320/0.3051=1.096.結(jié)果分析在AEA培養(yǎng)基上,嘧菌酯抑制香蕉葉斑病菌菌絲生長(zhǎng)的EC50值為0.0433μg/ml,丙硫唑的EC50值為1.9917μg/ml。嘧菌酯·丙硫唑按1∶1、1∶2、1∶4、1∶6、1∶8的質(zhì)量比例復(fù)配后,EC50值和SR50值見表3,嘧菌酯和丙硫唑之間主要表現(xiàn)為相加作用。綜合各方面因素,嘧菌酯和丙硫唑以1∶4-1∶8的質(zhì)量比例復(fù)配,防治香蕉葉斑病的效果更佳。本發(fā)明的防治香蕉葉斑病的復(fù)配殺菌劑,兩種基料混配之后,效果明顯相加,使用安全,對(duì)于香蕉生長(zhǎng)后期普遍發(fā)生、影響香蕉業(yè)最嚴(yán)重的病害之一香蕉葉斑病菌有很好的毒殺活性,且明顯高于嘧菌酯和丙硫唑單劑。適用于廣大農(nóng)村用于防治香蕉葉斑病。具體實(shí)施方式實(shí)施例1取貴州道元生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98%的嘧菌酯原藥2.0kg,再取貴州道元生物有限公司生產(chǎn)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98%丙硫唑原藥2.0kg,復(fù)配成4.0kg防治香蕉葉斑病的復(fù)配殺菌劑。實(shí)施例2取浙江禾本科技有限公司生產(chǎn)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98%的嘧菌酯原藥2.0kg,再取貴州道元生物有限公司生產(chǎn)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98%丙硫唑原藥8.0kg,復(fù)配成10.0kg防治香蕉葉斑病的復(fù)配殺菌劑。實(shí)施例3取浙江禾本科技有限公司生產(chǎn)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98%的嘧菌酯原藥2.0kg,再取貴州道元生物有限公司生產(chǎn)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98%丙硫唑原藥16.0kg,復(fù)配成18.0kg防治香蕉葉斑病的復(fù)配殺菌劑。當(dāng)前第1頁1 2 3 
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