本發(fā)明涉及煙薯25號生產(chǎn)的領(lǐng)域，尤其涉及一種煙薯25號組培脫毒苗的生產(chǎn)及馴化移栽方法。

背景技術(shù)：

煙薯25號萌芽性較好，中長蔓，莖蔓中等粗，葉片淺裂，頂葉紫色，成年葉、葉脈和莖蔓均為綠色；薯形紡錘形，淡紅皮桔紅肉，結(jié)薯集中，薯塊整齊，單株結(jié)薯5個左右，大中薯率較高；食味好，鮮薯胡蘿卜素含量3.67mg/100g，干基還原糖和可溶性糖含量較高、耐貯性較好，抗病性好。

煙薯25號屬于塊根作物，生產(chǎn)過程中利用營養(yǎng)體進行繁殖，因此容易受到病毒的侵染，并且隨著育成品種栽培年限的延長，病毒密度越來越高。病毒的侵染導(dǎo)致產(chǎn)量下降，品質(zhì)變劣，甚至失去商品價值。所以要進行組培脫毒處理，脫毒苗一般會在馴化室中進行馴化培養(yǎng)成活后再移栽至塑料大棚或溫室，需經(jīng)過2次移栽，操作繁瑣，試管苗馴化培養(yǎng)空間大，耗費大量人力、物力、財力。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，而提供一種煙薯25號組培脫毒苗的生產(chǎn)及馴化移栽方法。

本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的，采用以下技術(shù)方案：

一種煙薯25號組培脫毒苗的生產(chǎn)及馴化移栽方法，具體步驟為：

(1)煙薯25號組培脫毒苗的獲取

催芽：秋天甘薯收獲后，選用無蟲蛀、無損傷的薯塊，在太陽底下暴曬4天，用清水洗凈，在薯塊上覆蓋3cm的沙子，放入36℃培養(yǎng)箱中催芽；

莖尖剝?nèi)∨c培養(yǎng)：當芽苗長至15cm時，取頂端1-2cm，減去肉眼可見的葉片，先用清水沖洗，然后在超凈工作臺內(nèi)用70％酒精浸泡15s，再用0.1％升汞溶液浸泡6min進行表面消毒，最后用無菌水漂洗6-10次；在體視解剖鏡下剝?nèi)в衛(wèi)-2個葉原基的莖尖，接種到添加0.2mg·l^-1naa和2.0mg·l^-1bap的ms培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定芽形成；當不定芽長到2cm時，從基部切下，轉(zhuǎn)移到不添加生長調(diào)節(jié)劑的ms培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使其長成完整植株；采用elisa病毒檢測試劑盒進行病毒檢測，摘取經(jīng)病毒檢測脫除病毒的無毒苗的1-2個葉節(jié)作為一個切段，扦插入新的ms培養(yǎng)基中，擴大繁殖；培養(yǎng)溫度為26℃，采用13h·d^-1的光照，光照強度為30μmol·m^-2·s^-1；

(2)煙薯25號組培脫毒苗的馴化和移栽

繼代培養(yǎng)1個月的脫毒苗，逐漸打開瓶口馴化，直至最后瓶口打開一半；洗去附著在根部的培養(yǎng)基，分單株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株間距30cm；脫毒試管苗栽植后，大水澆透，保持塑料大棚中的空氣濕度；移栽后的前2周，上午搭遮蔭網(wǎng)，防止太陽直曬；2周后撤掉遮蔭網(wǎng)，中午放風(fēng)，澆水；移栽3周后撒施尿素隨即澆水，施肥量按7g·m^-2。

煙薯25號組培脫毒苗的獲取過程中，催芽的條件為：出芽前進行黑暗培養(yǎng)，出芽后光照培養(yǎng)，采取12h·d^-1的光照，光照強度為15-20μmol·m^-2·s^-1，過程中噴水保持沙子濕潤。

煙薯25號組培脫毒苗的馴化和移栽過程中，在塑料大棚兩頭加防蟲網(wǎng)，預(yù)防昆蟲進入塑料大棚傳播病毒而導(dǎo)致脫毒苗再次感染病毒。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明將脫毒試管苗直接移栽于塑料大棚中，減少了操作程序，不需要經(jīng)過馴化室馴化的過程，降低脫毒苗的生產(chǎn)成本。另外，小苗直接栽植于土壤，根系伸展空間大，根系發(fā)達，根深葉茂，促使地上部分生長快而健壯。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明：

實施例1：

一種煙薯25號組培脫毒苗的生產(chǎn)及馴化移栽方法，具體步驟為：

(1)煙薯25號組培脫毒苗的獲取

催芽：秋天甘薯收獲后，選用無蟲蛀、無損傷的薯塊，在太陽底下暴曬4天，用清水洗凈，在薯塊上覆蓋3cm的沙子，放入36℃培養(yǎng)箱中催芽；

莖尖剝?nèi)∨c培養(yǎng)：當芽苗長至15cm時，取頂端1cm，減去肉眼可見的葉片，先用清水沖洗，然后在超凈工作臺內(nèi)用70％酒精浸泡15s，再用0.1％升汞溶液浸泡6min進行表面消毒，最后用無菌水漂洗6次；在體視解剖鏡下剝?nèi)в衛(wèi)個葉原基的莖尖，接種到添加0.2mg·l^-1naa和2.0mg·l^-1bap的ms培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定芽形成；當不定芽長到2cm時，從基部切下，轉(zhuǎn)移到不添加生長調(diào)節(jié)劑的ms培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使其長成完整植株；采用elisa病毒檢測試劑盒進行病毒檢測，摘取經(jīng)病毒檢測脫除病毒的無毒苗的1個葉節(jié)作為一個切段，扦插入新的ms培養(yǎng)基中，擴大繁殖；培養(yǎng)溫度為26℃，采用13h·d^-1的光照，光照強度為30μmol·m^-2·s^-1；

(2)煙薯25號組培脫毒苗的馴化和移栽

繼代培養(yǎng)1個月的脫毒苗，逐漸打開瓶口馴化，直至最后瓶口打開一半；洗去附著在根部的培養(yǎng)基，分單株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株間距30cm；脫毒試管苗栽植后，大水澆透，保持塑料大棚中的空氣濕度；移栽后的前2周，上午搭遮蔭網(wǎng)，防止太陽直曬；2周后撤掉遮蔭網(wǎng)，中午放風(fēng)，澆水；移栽3周后撒施尿素隨即澆水，施肥量按7g·m^-2。

煙薯25號組培脫毒苗的獲取過程中，催芽的條件為：出芽前進行黑暗培養(yǎng)，出芽后光照培養(yǎng)，采取12h·d^-1的光照，光照強度為15μmol·m^-2·s^-1，過程中噴水保持沙子濕潤。

煙薯25號組培脫毒苗的馴化和移栽過程中，在塑料大棚兩頭加防蟲網(wǎng)，預(yù)防昆蟲進入塑料大棚傳播病毒而導(dǎo)致脫毒苗再次感染病毒。

實施例2：

一種煙薯25號組培脫毒苗的生產(chǎn)及馴化移栽方法，具體步驟為：

(1)煙薯25號組培脫毒苗的獲取

催芽：秋天甘薯收獲后，選用無蟲蛀、無損傷的薯塊，在太陽底下暴曬4天，用清水洗凈，在薯塊上覆蓋3cm的沙子，放入36℃培養(yǎng)箱中催芽；

莖尖剝?nèi)∨c培養(yǎng)：當芽苗長至15cm時，取頂端2cm，減去肉眼可見的葉片，先用清水沖洗，然后在超凈工作臺內(nèi)用70％酒精浸泡15s，再用0.1％升汞溶液浸泡6min進行表面消毒，最后用無菌水漂洗10次；在體視解剖鏡下剝?nèi)в?個葉原基的莖尖，接種到添加0.2mg·l^-1naa和2.0mg·l^-1bap的ms培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定芽形成；當不定芽長到2cm時，從基部切下，轉(zhuǎn)移到不添加生長調(diào)節(jié)劑的ms培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使其長成完整植株；采用elisa病毒檢測試劑盒進行病毒檢測，摘取經(jīng)病毒檢測脫除病毒的無毒苗的2個葉節(jié)作為一個切段，扦插入新的ms培養(yǎng)基中，擴大繁殖；培養(yǎng)溫度為26℃，采用13h·d^-1的光照，光照強度為30μmol·m^-2·s^-1；

(2)煙薯25號組培脫毒苗的馴化和移栽

繼代培養(yǎng)1個月的脫毒苗，逐漸打開瓶口馴化，直至最后瓶口打開一半；洗去附著在根部的培養(yǎng)基，分單株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株間距30cm；脫毒試管苗栽植后，大水澆透，保持塑料大棚中的空氣濕度；移栽后的前2周，上午搭遮蔭網(wǎng)，防止太陽直曬；2周后撤掉遮蔭網(wǎng)，中午放風(fēng)，澆水；移栽3周后撒施尿素隨即澆水，施肥量按7g·m^-2。

煙薯25號組培脫毒苗的獲取過程中，催芽的條件為：出芽前進行黑暗培養(yǎng)，出芽后光照培養(yǎng)，采取12h·d^-1的光照，光照強度為20μmol·m^-2·s^-1，過程中噴水保持沙子濕潤。

煙薯25號組培脫毒苗的馴化和移栽過程中，在塑料大棚兩頭加防蟲網(wǎng)，預(yù)防昆蟲進入塑料大棚傳播病毒而導(dǎo)致脫毒苗再次感染病毒。

實施例3：

一種煙薯25號組培脫毒苗的生產(chǎn)及馴化移栽方法，具體步驟為：

(1)煙薯25號組培脫毒苗的獲取

催芽：秋天甘薯收獲后，選用無蟲蛀、無損傷的薯塊，在太陽底下暴曬4天，用清水洗凈，在薯塊上覆蓋3cm的沙子，放入36℃培養(yǎng)箱中催芽；

莖尖剝?nèi)∨c培養(yǎng)：當芽苗長至15cm時，取頂端1cm，減去肉眼可見的葉片，先用清水沖洗，然后在超凈工作臺內(nèi)用70％酒精浸泡15s，再用0.1％升汞溶液浸泡6min進行表面消毒，最后用無菌水漂洗8次；在體視解剖鏡下剝?nèi)в?個葉原基的莖尖，接種到添加0.2mg·l^-1naa和2.0mg·l^-1bap的ms培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，誘導(dǎo)不定芽形成；當不定芽長到2cm時，從基部切下，轉(zhuǎn)移到不添加生長調(diào)節(jié)劑的ms培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使其長成完整植株；采用elisa病毒檢測試劑盒進行病毒檢測，摘取經(jīng)病毒檢測脫除病毒的無毒苗的2個葉節(jié)作為一個切段，扦插入新的ms培養(yǎng)基中，擴大繁殖；培養(yǎng)溫度為26℃，采用13h·d^-1的光照，光照強度為30μmol·m^-2·s^-1；

(2)煙薯25號組培脫毒苗的馴化和移栽

繼代培養(yǎng)1個月的脫毒苗，逐漸打開瓶口馴化，直至最后瓶口打開一半；洗去附著在根部的培養(yǎng)基，分單株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株間距30cm；脫毒試管苗栽植后，大水澆透，保持塑料大棚中的空氣濕度；移栽后的前2周，上午搭遮蔭網(wǎng)，防止太陽直曬；2周后撤掉遮蔭網(wǎng)，中午放風(fēng)，澆水；移栽3周后撒施尿素隨即澆水，施肥量按7g·m^-2。

煙薯25號組培脫毒苗的獲取過程中，催芽的條件為：出芽前進行黑暗培養(yǎng)，出芽后光照培養(yǎng)，采取12h·d^-1的光照，光照強度為18μmol·m^-2·s^-1，過程中噴水保持沙子濕潤。

煙薯25號組培脫毒苗的馴化和移栽過程中，在塑料大棚兩頭加防蟲網(wǎng)，預(yù)防昆蟲進入塑料大棚傳播病毒而導(dǎo)致脫毒苗再次感染病毒。

本發(fā)明將脫毒試管苗直接移栽于塑料大棚中，減少了操作程序，不需要經(jīng)過馴化室馴化的過程，降低脫毒苗的生產(chǎn)成本。另外，小苗直接栽植于土壤，根系伸展空間大，根系發(fā)達，根深葉茂，促使地上部分生長快而健壯。

上面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行了示例性描述，顯然本發(fā)明具體實現(xiàn)并不受上述方式的限制，只要采用了本發(fā)明的方法構(gòu)思和技術(shù)方案進行的各種改進，或未經(jīng)改進直接應(yīng)用于其它場合的，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。