本發(fā)明涉及農用殺菌劑應用領域，特別涉及山藥多糖作為吡唑酰胺類殺菌劑增效劑的應用。
背景技術：
：山藥多糖是山藥中的主要活性成分。山藥多糖主要由甘露糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖組成。研究表明，山藥經熱水提取、去蛋白、乙醇沉淀、sephadexg-100純化得山藥多糖，分子量為8.1×10-4。目前人們對于山藥多糖的研究主要集中在以下方面：降血糖、補中益氣、刺激或調節(jié)免疫系統(tǒng)等功能，而對于其抑菌功能的研究還比較少。中國專利201410143035.0公開了一種山藥多糖的分離純化方法，包括前處理、熱水水浴浸提、sevage法除蛋白、采用高速逆流色譜法進行粗分多糖和sephadexg-100層析柱進一步純化等步驟；同時，該專利還測定了山藥多糖的抗氧化和抑菌活性，其結果表明，山藥多糖對枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、尼氏芽孢桿菌均無抑菌作用，對大腸桿菌有抑菌作用，但并不明顯，以二倍稀釋法測定最小抑菌濃度，得知山藥多糖對大腸桿菌的抑菌濃度為2.5mg/ml。目前，山藥多糖對于真菌的抑制作用、以及山藥多糖對于殺菌劑的增效作用還未見有研究公開。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明要解決的技術問題在于提供山藥多糖作為吡唑酰胺類殺菌劑增效劑的應用，顯著提高吡唑酰胺類殺菌劑的活性，減少化學農藥用藥量，延緩病原菌的抗藥性產生。本發(fā)明解決上述技術問題所采取的技術方案如下：山藥多糖作為吡唑酰胺類殺菌劑增效劑的應用。所述的吡唑酰胺類殺菌劑為氟啶酰菌胺、苯并烯氟菌唑、吡唑萘菌胺或者聯(lián)苯吡菌胺。所述的山藥多糖和氟啶酰菌胺的增效重量比為1:5-10。所述的山藥多糖和苯并烯氟菌唑的增效重量比為1:0.3-4。所述的山藥多糖和吡唑萘菌胺的增效重量比為1:0.3-0.5。所述的山藥多糖和聯(lián)苯吡菌胺的增效重量比為1:2-7。本發(fā)明具備的有益效果是：山藥多糖和吡唑酰胺類殺菌劑按照特定的重量比進行復配，具有明顯的協(xié)同增效作用，山藥多糖本身對于真菌的抑制作用很小，其主要作為吡唑酰胺類殺菌劑的增效劑，能夠顯著提高吡唑酰胺類殺菌劑對病菌的抑制活性，二者混配還能夠減少吡唑酰胺類殺菌劑的使用，從而降低成本，減少化學藥劑的殘留。具體實施方式下面結合具體實施例對本發(fā)明的技術方案及有益效果做進一步說明，本發(fā)明所述的百分比均為質量百分比。一室內聯(lián)合毒力測定試驗為了說明山藥多糖對于吡唑酰胺類殺菌劑的增效作用，本發(fā)明采用孫云沛法計算共毒系數(shù)(ctc)來評價混用效果。毒力指數(shù)ti(a)＝(標準劑a的ec50÷a劑的ec50)×100毒力指數(shù)ti(b)＝(標準劑a的ec50÷b劑的ec50)×100實際毒力指數(shù)ati(ab)＝(a的ec50÷ab的ec50)×100理論毒力指數(shù)tti(ab)＝ti(a)×a在混劑中的百分數(shù)+ti(b)×b在混劑中的百分數(shù)共毒系數(shù)(ctc)＝[混劑實測毒力指數(shù)(ati)÷混劑理論毒力指數(shù)(tti)]×100評價標準為：共毒系數(shù)≥120表現(xiàn)為增效作用；共毒系數(shù)≤80表現(xiàn)為拮抗作用；80<共毒系數(shù)<120表現(xiàn)為相加作用。1.室內聯(lián)合毒力測定試驗1試驗方法：參照《農藥室內生物測定試驗準則ny/t1156.13-2008第13部分：抑制晚疫病菌試驗葉片法》，用配制好相應濃度的藥劑噴霧處理馬鈴薯健康葉片，24h后，用制備好的孢子懸浮液均勻噴霧，在適宜的溫濕度及光照條件下培養(yǎng)5-7d，等空白對照病葉率達到50％以上時，分級調查各處理發(fā)病情況，計算病情指數(shù)及各藥劑的ec50，并根據孫云沛法計算混劑的共毒系數(shù)。按照上述計算方法統(tǒng)計的室內毒力測定結果如下表所示：從上表可知，氟啶酰菌胺與山藥多糖的重量比為5-10:1時，其共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出明顯的協(xié)同增效作用；而當重量比為1:1、2:1、4:1以及12:1時，其共毒系數(shù)小于80，表現(xiàn)出明顯的拮抗作用；其他比例僅表現(xiàn)出簡單的相加作用。2.室內聯(lián)合毒力測定試驗2試驗方法：準備健康的小麥苗盆栽，所有小麥苗在同一時間使用抖落孢子法接種小麥白粉病菌，接種后將小麥苗放在18℃、濕度為70％、光照時間為16h+黑暗時間為8h的恒溫室內培養(yǎng)。接種24h后進行藥劑噴霧處理。待空白對照的小麥苗上長出孢子堆時(約7-8天)調查各處理的病情指數(shù)，計算各藥劑的ec50，并根據孫云沛法計算混劑的共毒系數(shù)。按照上述計算方法統(tǒng)計的室內毒力測定結果如下表所示：藥劑ec50(ppm)實測毒力指數(shù)理論毒力指數(shù)共毒系數(shù)苯并烯氟菌唑單劑(a)3.826998.69//山藥多糖單劑(b)267.35100.00//a:b＝0.1:152.73507.02727.1569.7a:b＝0.2:138.26698.771249.7855.9a:b＝0.3:15.604774.111692.01282.2a:b＝0.5:17.213708.042399.56154.5a:b＝1:15.335015.953549.35141.3a:b＝2:14.386103.884699.13129.9a:b＝3:13.198380.885274.02158.9a:b＝4:12.0513041.465618.95232.1a:b＝5:14.186395.935848.91109.4a:b＝6:19.252890.276013.1648.1a:b＝7:14.136473.376136.35105.5a:b＝8:16.823920.096232.1762.9a:b＝9:15.564808.456308.8276.2a:b＝10:15.694698.596371.5473.7從上表可知，苯并烯氟菌唑與山藥多糖的重量比為0.3-4:1時，其共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出明顯的協(xié)同增效作用；而當重量比為0.1:1、0.2:1、6:1、8:1、9:1、10:1時，其共毒系數(shù)小于80，表現(xiàn)出明顯的拮抗作用；其他比例5:1和7:1僅表現(xiàn)出簡單的相加作用。3.室內聯(lián)合毒力測定試驗3試驗方法：準備健康的黃瓜苗盆栽，所有黃瓜苗在同一時間使用抖落孢子法接種黃瓜白粉病菌，接種后將黃瓜苗放在18℃、濕度為70％、光照時間為16h+黑暗時間為8h的恒溫室內培養(yǎng)。接種24h后進行藥劑噴霧處理。待空白對照的黃瓜苗上長出孢子堆時(約7天左右)調查各處理的病情指數(shù)，計算各藥劑的ec50，并根據孫云沛法計算混劑的共毒系數(shù)。按照上述計算方法統(tǒng)計的室內毒力測定結果如下表所示：藥劑ec50(ppm)實測毒力指數(shù)理論毒力指數(shù)共毒系數(shù)吡唑萘菌胺單劑(a)4.096907.33//山藥多糖單劑(b)282.51100.00//a:b＝0.1:148.23585.76718.8581.5a:b＝0.2:126.551064.071234.5686.2a:b＝0.3:19.273047.571670.92182.4a:b＝0.4:16.804154.562044.95203.2a:b＝0.5:17.153951.192369.11166.8a:b＝0.6:19.363018.272652.75113.8a:b＝0.7:112.382281.992903.0278.6a:b＝0.8:124.101172.243125.4837.5a:b＝0.9:115.911775.683324.5353.4a:b＝1:18.253424.363503.6797.7a:b＝2:17.693673.734638.2279.2a:b＝3:113.182143.475205.5041.2a:b＝4:17.823612.665545.8765.1a:b＝5:16.444386.805772.7876.0從上表可知，吡唑萘菌胺與山藥多糖的重量比為0.3-0.5:1時，其共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出明顯的協(xié)同增效作用；而當重量比為0.7:1、0.8:1、0.9:1、2:1、3:1、4:1、5:1時，其共毒系數(shù)小于80，表現(xiàn)出明顯的拮抗作用；其他比例0.1:1、0.2:1、0.6:1和1:1僅表現(xiàn)出簡單的相加作用。4.室內聯(lián)合毒力測定試驗4試驗方法及計算方法同室內聯(lián)合毒力測定試驗3。結果如下表所示：藥劑ec50(ppm)實測毒力指數(shù)理論毒力指數(shù)共毒系數(shù)聯(lián)苯吡菌胺單劑(a)3.187993.71//山藥多糖單劑(b)254.20100.00//a:b＝0.1:150.62502.17817.6161.4a:b＝0.3:118.241393.641921.6372.5a:b＝0.5:110.252480.002731.2490.8a:b＝0.7:116.401550.003350.3546.3a:b＝1:16.883694.774046.8691.3a:b＝2:13.148095.545362.47151.0a:b＝3:12.988530.206020.28141.7a:b＝4:11.2620174.606414.97314.5a:b＝5:13.118173.636678.09122.4a:b＝6:12.4510375.516866.04151.1a:b＝7:11.9912773.877007.00182.3a:b＝8:14.615514.107116.6377.5a:b＝9:16.034215.597204.3458.5a:b＝10:18.443011.857276.1041.4從上表可知，聯(lián)苯吡菌胺與山藥多糖的重量比為2-7:1時，其共毒系數(shù)均大于120，表現(xiàn)出明顯的協(xié)同增效作用；而當重量比為0.1:1、0.3:1、0.7:1、8:1、9:1、10:1時，其共毒系數(shù)小于80，表現(xiàn)出明顯的拮抗作用；其他比例0.5:1、1:1僅表現(xiàn)出簡單的相加作用。二大田藥效實施例1.大田藥效試驗1試驗藥劑：試驗組17％山藥多糖·氟啶酰菌胺可濕粉劑(1:6)山藥多糖1％，氟啶酰菌胺6％，羧甲基纖維素鈉10％，烷基萘磺酸鹽2％，輕質碳酸鈣4％，高嶺土補足100％。按上述配方進行原料稱量，混合均勻后經氣流粉碎機粉碎，檢測合格即制得7％山藥多糖·氟啶酰菌胺可濕粉劑。試驗組29％山藥多糖·氟啶酰菌胺顆粒劑(1:8)山藥多糖1％，氟啶酰菌胺8％，烷基萘磺酸鹽12％，淀粉3％，硫酸鈉2％，高嶺土補足100％。按上述配方比例進行原料稱量，混合均勻，粉碎，加水潤濕后充分攪拌均勻，再用螺桿擠壓造粒機造粒，干燥過篩后即得9％山藥多糖·氟啶酰菌胺顆粒劑。對照組11％山藥多糖可濕粉劑：山藥多糖1％，羧甲基纖維素鈉10％，烷基萘磺酸鹽2％，輕質碳酸鈣4％，高嶺土補足100％。制備方法同試驗組1。對照組26％氟啶酰菌胺可濕粉劑：氟啶酰菌胺6％，羧甲基纖維素鈉10％，烷基萘磺酸鹽2％，輕質碳酸鈣4％，高嶺土補足100％。制備方法同試驗組1。另設空白對照組。試驗方法：參照《gb/t17980.34-2000農藥田間藥效試驗準則(一)第34部分：殺菌劑防治馬鈴薯晚疫病》的試驗方法。在發(fā)病初期第一次噴霧施藥，7d后第二次噴霧施藥。共施藥兩次，每個處理設3次重復，每個小區(qū)面積為66.7m2。試驗地點：廣西南寧市。調查方法：于第二次施藥后7d、15d分別在每個小區(qū)進行五點取樣調查，每點取連續(xù)的3株，查全部葉片，以葉片為單位分級記錄發(fā)病情況，計算病情指數(shù)和防效；公式(1)：病情指數(shù)計算公式：式(1)中：x-病情指數(shù)；ni-各級病葉數(shù)；i-相對級數(shù)值；n-調查總葉數(shù)。公式(2)：防治效果計算公式：式(2)中：p-防治效果，單位為百分數(shù)(％)；ck0-空白對照區(qū)施藥前病情指數(shù)；ck1-空白對照區(qū)施藥后病情指數(shù)；pt0-藥劑處理區(qū)施藥前病情指數(shù)；pt1-藥劑處理后施藥后病情指數(shù)。并于馬鈴薯收獲時進行產量調查，計算畝產量和增產率。結果如下表所示。防治馬鈴薯晚疫病的田間藥效試驗結果由上表可知，本發(fā)明的含山藥多糖和氟啶酰菌胺的組合物在有效成分用藥量少于或者接近對照藥劑的情況下，不管是防治馬鈴薯晚疫病還是增產方面，其效果都比對照藥劑顯著優(yōu)異。在第二次施藥后7d調查結果顯示，本發(fā)明的防治效果比氟啶酰菌胺單劑高10.06％以上；第二次施藥后15d調查結果顯示，本發(fā)明的防治效果比氟啶酰菌胺單劑高15.18％以上；收獲時，本發(fā)明的增產效果比氟啶酰菌胺單劑高16.2-25.6％。2.大田藥效試驗2試驗藥劑：試驗組12.6％山藥多糖·苯并烯氟菌唑可濕粉劑(2:0.6)山藥多糖2％，苯并烯氟菌唑0.6％，羧甲基纖維素鈉6％，烷基萘磺酸鹽1％，輕質碳酸鈣2％，高嶺土補足100％。按上述配方進行原料稱量，混合均勻后經氣流粉碎機粉碎，檢測合格即制得2.6％山藥多糖·苯并烯氟菌唑可濕粉劑。試驗組25％山藥多糖·苯并烯氟菌唑顆粒劑(1:4)山藥多糖1％，苯并烯氟菌唑4％，烷基萘磺酸鹽10％，淀粉2％，硫酸鈉1％，高嶺土補足100％。按上述配方比例進行原料稱量，混合均勻，粉碎，加水潤濕后充分攪拌均勻，再用螺桿擠壓造粒機造粒，干燥過篩后即得5％山藥多糖·苯并烯氟菌唑顆粒劑。對照組12％山藥多糖可濕粉劑：山藥多糖2％，羧甲基纖維素鈉6％，烷基萘磺酸鹽1％，輕質碳酸鈣2％，高嶺土補足100％。制備方法同試驗組1。對照組20.6％苯并烯氟菌唑可濕粉劑：苯并烯氟菌唑0.6％，羧甲基纖維素鈉6％，烷基萘磺酸鹽1％，輕質碳酸鈣2％，高嶺土補足100％。制備方法同試驗組1。另設空白對照組。試驗方法：在發(fā)病初期第一次噴霧施藥，7d后第二次噴霧施藥。共施藥兩次，每個處理設3次重復，每個小區(qū)面積為66.7m2。試驗地點：河南開封市。調查方法：于第二次施藥后7d、15d分別在每個小區(qū)進行五點取樣調查，每點取連續(xù)的5株，查全部葉片，以葉片為單位分級記錄發(fā)病情況，計算病情指數(shù)和防效；統(tǒng)計結果如下表所示。防治小麥白粉病的田間藥效試驗結果由上表可知，本發(fā)明的含山藥多糖和苯并烯氟菌唑的組合物在有效成分用藥量少于或者接近對照藥劑的情況下，對小麥白粉病的效果都比對照藥劑顯著優(yōu)異。在第二次施藥后7d調查結果顯示，本發(fā)明的防治效果比苯并烯氟菌唑單劑高13.78％以上；第二次施藥后15d調查結果顯示，本發(fā)明的防治效果比苯并烯氟菌唑單劑高29.46％以上。3.大田藥效試驗3試驗藥劑：試驗組11.3％山藥多糖·吡唑萘菌胺可濕粉劑(1:0.3)山藥多糖1％，吡唑萘菌胺0.3％，羧甲基纖維素鈉5％，烷基萘磺酸鹽1％，輕質碳酸鈣3％，高嶺土補足100％。按上述配方進行原料稱量，混合均勻后經氣流粉碎機粉碎，檢測合格即制得1.3％山藥多糖·吡唑萘菌胺可濕粉劑。對照組11％山藥多糖可濕粉劑：山藥多糖1％，羧甲基纖維素鈉5％，烷基萘磺酸鹽1％，輕質碳酸鈣3％，高嶺土補足100％。制備方法同試驗組1。對照組20.3％吡唑萘菌胺可濕粉劑：吡唑萘菌胺0.3％，羧甲基纖維素鈉5％，烷基萘磺酸鹽1％，輕質碳酸鈣3％，高嶺土補足100％。制備方法同試驗組1。試驗方法：在發(fā)病初期第一次噴霧施藥，7d后第二次噴霧施藥。共施藥兩次，每個處理設3次重復，每個小區(qū)面積為66.7m2。試驗地點：廣西南寧市。調查方法：于第二次施藥后7d、15d分別在每個小區(qū)進行五點取樣調查，每點取連續(xù)的2株，查全部葉片，以葉片為單位分級記錄發(fā)病情況，計算病情指數(shù)和防效，統(tǒng)計結果如下表所示。防治黃瓜白粉病的田間藥效試驗結果由上表可知，本發(fā)明的含山藥多糖和吡唑萘菌胺的組合物在有效成分用藥量少于對照藥劑的情況下，對黃瓜白粉病的效果比對照藥劑顯著優(yōu)異。在第二次施藥后7d調查結果顯示，本發(fā)明的防治效果比吡唑萘菌胺單劑高16.92％；第二次施藥后15d調查結果顯示，本發(fā)明的防治效果比吡唑萘菌胺單劑高22.86％。4.大田藥效試驗4試驗藥劑：試驗組15％山藥多糖·聯(lián)苯吡菌胺可濕粉劑(1:4)山藥多糖1％，聯(lián)苯吡菌胺4％，羧甲基纖維素鈉7％，烷基萘磺酸鹽2％，輕質碳酸鈣3％，高嶺土補足100％。按上述配方進行原料稱量，混合均勻后經氣流粉碎機粉碎，檢測合格即制得5％山藥多糖·聯(lián)苯吡菌胺可濕粉劑。對照組11％山藥多糖可濕粉劑：山藥多糖1％，羧甲基纖維素鈉7％，烷基萘磺酸鹽2％，輕質碳酸鈣3％，高嶺土補足100％。制備方法同試驗組1。對照組24％聯(lián)苯吡菌胺可濕粉劑：聯(lián)苯吡菌胺4％，羧甲基纖維素鈉7％，烷基萘磺酸鹽2％，輕質碳酸鈣3％，高嶺土補足100％。制備方法同試驗組1。試驗方法及調查統(tǒng)計同大田藥效試驗3。統(tǒng)計結果如下表所示。防治黃瓜白粉病的田間藥效試驗結果由上表可知，本發(fā)明的含山藥多糖和聯(lián)苯吡菌胺的組合物在有效成分用藥量少于對照藥劑的情況下，對黃瓜白粉病的效果比對照藥劑顯著優(yōu)異。在第二次施藥后7d調查結果顯示，本發(fā)明的防治效果比聯(lián)苯吡菌胺單劑高14.05％；第二次施藥后15d調查結果顯示，本發(fā)明的防治效果比聯(lián)苯吡菌胺單劑高17.90％。當前第1頁12