本發(fā)明涉及木槿繁殖領(lǐng)域，尤其涉及一種快速繁育海濱木槿幼苗的方法。

背景技術(shù)：

海濱木槿(hibiscushamabosieb.etzucc.)為錦葵科木槿屬落葉小喬木，是近年鑒定新種。其樹(shù)冠濃密，花金黃色，形大而艷麗且花期長(zhǎng)，可作為良好的園林綠化樹(shù)種。除觀賞價(jià)值外，海濱木槿耐干旱、貧瘠，是貧瘠丘陵山地水土保持優(yōu)良樹(shù)種；而且它極耐鹽堿、水淹，抗海風(fēng)，是護(hù)堤林和海岸基干林帶造林先鋒樹(shù)種。但海濱木槿自然分布狹窄，現(xiàn)僅在我國(guó)浙江舟山群島、福建沿海島嶼等形成小居群，國(guó)外僅朝鮮、日本有分布，被列為浙江省珍稀瀕危植物。近年來(lái)，隨著海濱木槿綜合開(kāi)發(fā)利用價(jià)值的提高，海濱木槿需求量也在不斷加大。因此，加強(qiáng)對(duì)其繁育技術(shù)的研發(fā)對(duì)于海濱木槿的開(kāi)發(fā)利用具有重要意義。

目前，海濱木槿的繁殖栽培主要采用傳統(tǒng)的播種育苗法，但存在種子自然萌發(fā)率低，且不利于海濱木槿優(yōu)植株良性狀的保持等問(wèn)題。通過(guò)利用扦插技術(shù)對(duì)海濱木槿進(jìn)行繁育的研究已有報(bào)道，但均以8-10cm長(zhǎng)的海濱木槿7-8月份枝條作為繁殖材料，繁殖過(guò)程繁瑣，且生根時(shí)間較長(zhǎng)，很難滿足規(guī)?；庇I木槿優(yōu)良品種的需求。

因此，針對(duì)目前海濱木槿繁育過(guò)程中所存在的諸多問(wèn)題，急需開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單、快速且不易受季節(jié)和外界環(huán)境影響的海濱木槿幼苗繁育技術(shù)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種步驟簡(jiǎn)單、操作方便、不易受季節(jié)和外界環(huán)境影響的快速繁育海濱木槿幼苗的方法。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種快速繁育海濱木槿幼苗的方法，包括如下步驟：

(1)取材

選取野外多年生具有優(yōu)良農(nóng)藝性狀的海濱木槿當(dāng)年生健壯枝條作為外植體來(lái)源，并剪切成適宜長(zhǎng)度且?guī)в?個(gè)腋芽和1片葉子的微莖段，備用；

(2)外植體的預(yù)處理

將步驟(1)中的海濱木槿微莖段經(jīng)流水沖洗后，通過(guò)高錳酸鉀溶液進(jìn)行表面消毒，消毒后陰干表面殘留消毒液，備用；

(3)外植體不定根的誘導(dǎo)處理

將步驟(2)中經(jīng)過(guò)消毒處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端置于含有1000-3000mg/l吲哚丁酸的生根促進(jìn)液中進(jìn)行不定根的誘導(dǎo)處理；

(4)外植體的定植

將步驟(3)中的經(jīng)過(guò)生根促進(jìn)液處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端切口插入澆有營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液的粒徑為0.3-0.5mm的沙盤(pán)中，以互不重疊為準(zhǔn)；

(5)外植體的成苗管理

將步驟(4)中定植后的海濱木槿微莖段蓋上塑料膜，于溫室大棚中進(jìn)行不定根的誘導(dǎo)和成苗培養(yǎng)。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(1)中優(yōu)良農(nóng)藝性狀指具有高產(chǎn)、花期長(zhǎng)、抗逆性強(qiáng)中一種或幾種的性狀。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(1)中適宜長(zhǎng)度為0.5-2.0cm的長(zhǎng)度。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(2)中海濱木槿微莖段于流水下沖洗10-20min。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(2)中高錳酸鉀溶液為1.0-5.0‰(w/v)高錳酸鉀消毒溶液。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述1.0-5.0‰(w/v)高錳酸鉀消毒溶液的使用方法為：將待消毒的樣品置于1.0-5.0‰(w/v)高錳酸鉀消毒溶液中消毒5-10min。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(3)中將消毒處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端置于生根促進(jìn)液中處理10-60s。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(4)中將經(jīng)過(guò)生根促進(jìn)液處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端切口插入澆有營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液的沙盤(pán)中，其插入長(zhǎng)度為0.3-1.0cm。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(5)中溫室大棚為溫度25-30℃、相對(duì)濕度80-85％的溫室大棚。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液為不含有機(jī)元素的dkw基本培養(yǎng)液。

本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于：其一，本發(fā)明所用的外植體是0.5-2.0cm、攜帶腋芽的海濱木槿當(dāng)年生微莖段，一方面，取材方便，材料豐富，且繁育獲得的小苗能夠保持母本株系的優(yōu)良特性；另一方面與傳統(tǒng)的長(zhǎng)8-10cm的扦插枝條相比，極大節(jié)約了種質(zhì)材料，提高了繁殖效率；其二，本發(fā)明采用了將微莖段扦插于沙盤(pán)中于溫室大棚內(nèi)直接生根，一步成苗；一方面具有繁育速度快，繁育周期短(28天左右就可以獲得完整的海濱木槿再生植株)；另一方面也避免了季節(jié)、地域等自然因素的影響和限制，適于海濱木槿優(yōu)良株系的規(guī)?；庇?；其三，本發(fā)明嚴(yán)格優(yōu)化并控制生根促進(jìn)液的成分和濃度，使其成為海濱木槿不定根誘導(dǎo)的最佳濃度；其四，本發(fā)明的消毒劑、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液以及營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)等的種類和濃度選擇也嚴(yán)格與海濱木槿生長(zhǎng)過(guò)程中所需的必要元素相配合，同時(shí)避免有害元素的引入。

附圖說(shuō)明

圖1是實(shí)施例1中的一種快速繁育海濱木槿幼苗的方法的海濱木槿微莖段材料圖；

圖2是實(shí)施例1中的一種快速繁育海濱木槿幼苗的方法的海濱木槿微莖段不定根的形成圖；

圖3是實(shí)施例1中的一種快速繁育海濱木槿幼苗的方法的海濱木槿微莖段成苗圖。

具體實(shí)施方式

下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說(shuō)明，本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過(guò)程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例。

實(shí)施例1

本實(shí)施例的一種快速繁育海濱木槿幼苗的方法，包括如下步驟：

(1)取材

分別于5至7月上旬，選取野外多年生具有優(yōu)良農(nóng)藝性狀(具有高產(chǎn)、花期長(zhǎng)、抗逆性強(qiáng)中一種或幾種的性狀)的海濱木槿當(dāng)年生健壯枝條作為外植體來(lái)源，并剪切成0.5cm長(zhǎng)，且?guī)в?個(gè)腋芽和1片葉子的微莖段，備用；

(2)外植體的預(yù)處理

將步驟(1)中的海濱木槿微莖段經(jīng)流水沖洗10min后，通過(guò)1.0‰(w/v)高錳酸鉀消毒溶液進(jìn)行表面消毒，消毒5min后陰干表面殘留消毒液，備用；

(3)外植體不定根的誘導(dǎo)處理

將步驟(2)中經(jīng)過(guò)消毒處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端置于含有1000mg/l吲哚丁酸的生根促進(jìn)液中10s，進(jìn)行不定根的誘導(dǎo)處理；

(4)外植體的定植

將步驟(3)中的經(jīng)過(guò)生根促進(jìn)液處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端切口插入澆有營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液的粒徑為0.3mm的沙盤(pán)中，以互不重疊為準(zhǔn)，插入長(zhǎng)度為0.3cm；其中，營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液為不含有機(jī)元素的dkw基本培養(yǎng)液；

(5)外植體的成苗管理

將步驟(4)中定植后的海濱木槿微莖段蓋上塑料膜，于溫度25℃、相對(duì)濕度80％的溫室大棚中進(jìn)行不定根的誘導(dǎo)和成苗培養(yǎng)；培養(yǎng)18d，微莖段腋芽萌發(fā),且微莖段的形態(tài)學(xué)下端膨大并伴有根原基形成；培養(yǎng)30d，微莖段腋芽的形態(tài)學(xué)下端產(chǎn)生細(xì)長(zhǎng)的乳白色不定根，平均每個(gè)外植體產(chǎn)生1-2條不定根，且不定根的平均長(zhǎng)度為5.0-6.5cm；培養(yǎng)42d，海濱木槿微莖段不定根的誘導(dǎo)率高達(dá)92.3％，且成苗率高達(dá)91.7％；研究發(fā)現(xiàn)，5-7月份取材對(duì)海濱木槿莖段的生根率和成苗率均無(wú)明顯影響。

實(shí)施例2

本實(shí)施例的一種快速繁育海濱木槿幼苗的方法，包括如下步驟：

(1)取材

于8月上旬，選取野外多年生具有優(yōu)良農(nóng)藝性狀(具有高產(chǎn)、花期長(zhǎng)、抗逆性強(qiáng)中一種或幾種的性狀)的海濱木槿當(dāng)年生健壯枝條作為外植體來(lái)源，并剪切成1.0cm長(zhǎng)，且?guī)в?個(gè)腋芽和1片葉子的微莖段(如圖1)，備用；

(2)外植體的預(yù)處理

將步驟(1)中的海濱木槿微莖段經(jīng)流水沖洗15min后，通過(guò)3.0‰(w/v)高錳酸鉀消毒溶液進(jìn)行表面消毒，消毒8min后陰干表面殘留消毒液，備用；

(3)外植體不定根的誘導(dǎo)處理

將步驟(2)中經(jīng)過(guò)消毒處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端置于含有2000mg/l吲哚丁酸的生根促進(jìn)液中35s，進(jìn)行不定根的誘導(dǎo)處理；

(4)外植體的定植

將步驟(3)中的經(jīng)過(guò)生根促進(jìn)液處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端切口插入澆有營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液的粒徑為0.4mm的沙盤(pán)中，以互不重疊為準(zhǔn)，插入長(zhǎng)度為0.6cm；其中，營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液為不含有機(jī)元素的dkw基本培養(yǎng)液；

(5)外植體的成苗管理

將步驟(4)中定植后的海濱木槿微莖段蓋上塑料膜，于溫度28℃、相對(duì)濕度83％的溫室大棚中進(jìn)行不定根的誘導(dǎo)和成苗培養(yǎng)；培養(yǎng)14d，微莖段腋芽萌發(fā),且微莖段的形態(tài)學(xué)下端膨大并伴有根原基形成；培養(yǎng)28d，微莖段腋芽的形態(tài)學(xué)下端產(chǎn)生粗壯的乳白色不定根，平均每個(gè)外植體產(chǎn)生2-4條不定根，且不定根的平均長(zhǎng)度為3.0-4.0cm(如圖2)；培養(yǎng)42d，海濱木槿微莖段不定根的誘導(dǎo)率高達(dá)99.3％，且成苗率高達(dá)98.7％(如圖3)。

實(shí)施例3

本實(shí)施例的一種快速繁育海濱木槿幼苗的方法，包括如下步驟：

(1)取材

分別于9-11月上旬，選取野外多年生具有優(yōu)良農(nóng)藝性狀(具有高產(chǎn)、花期長(zhǎng)、抗逆性強(qiáng)中一種或幾種的性狀)的海濱木槿當(dāng)年生健壯枝條作為外植體來(lái)源，并剪切成2.0cm長(zhǎng)，且?guī)в?個(gè)腋芽和1片葉子的微莖段，備用；

(2)外植體的預(yù)處理

將步驟(1)中的海濱木槿微莖段經(jīng)流水沖洗20min后，通過(guò)5.0‰(w/v)高錳酸鉀消毒溶液進(jìn)行表面消毒，消毒10min后陰干表面殘留消毒液，備用；

(3)外植體不定根的誘導(dǎo)處理

將步驟(2)中經(jīng)過(guò)消毒處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端置于含有3000mg/l吲哚丁酸的生根促進(jìn)液中60s，進(jìn)行不定根的誘導(dǎo)處理；

(4)外植體的定植

將步驟(3)中的經(jīng)過(guò)生根促進(jìn)液處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端切口插入澆有營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液的粒徑為0.5mm的沙盤(pán)中，以互不重疊為準(zhǔn)，插入長(zhǎng)度為1.0cm；其中，營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液為不含有機(jī)元素的dkw基本培養(yǎng)液；

(5)外植體的成苗管理

將步驟(4)中定植后的海濱木槿微莖段蓋上塑料膜，于溫度30℃、相對(duì)濕度85％的溫室大棚中進(jìn)行不定根的誘導(dǎo)和成苗培養(yǎng)；培養(yǎng)20d，微莖段腋芽萌發(fā),且微莖段的形態(tài)學(xué)下端膨大并伴有根原基形成；培養(yǎng)35d，微莖段腋芽的形態(tài)學(xué)下端產(chǎn)生粗壯的乳白色不定根，平均每個(gè)外植體產(chǎn)生4-8條不定根，且不定根的平均長(zhǎng)度為1.0-3.0cm；培養(yǎng)42，海濱木槿微莖段不定根的誘導(dǎo)率高達(dá)86.5％，且成苗率高達(dá)86.5％；研究發(fā)現(xiàn)，9-11月份海濱木槿莖段不定根的誘導(dǎo)時(shí)間有所延長(zhǎng)，不定根的誘導(dǎo)率有所下降，推測(cè)原因，可能是由于木質(zhì)化程度嚴(yán)重，致使再生能力下降所致。

實(shí)施例4

本實(shí)施例測(cè)試了不同種類營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液對(duì)海濱木槿微莖段不定根誘導(dǎo)的影響，包括如下步驟：

(1)取材

于8月上旬，選取野外多年生具有優(yōu)良農(nóng)藝性狀(具有高產(chǎn)、花期長(zhǎng)、抗逆性強(qiáng)中一種或幾種的性狀)的海濱木槿當(dāng)年生健壯枝條作為外植體來(lái)源，并剪切成1.0cm長(zhǎng)，且?guī)в?個(gè)腋芽和1片葉子的微莖段備用；

(2)外植體的預(yù)處理

將步驟(1)中的海濱木槿微莖段經(jīng)流水沖洗15min后，通過(guò)3.0‰(w/v)高錳酸鉀消毒溶液進(jìn)行表面消毒，消毒8min后陰干表面殘留消毒液，備用；

(3)外植體不定根的誘導(dǎo)處理

將步驟(2)中經(jīng)過(guò)消毒處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端置于含有2000mg/l吲哚丁酸的生根促進(jìn)液中35s，進(jìn)行不定根的誘導(dǎo)處理；

(4)外植體的定植

將步驟(3)中的經(jīng)過(guò)生根促進(jìn)液處理后的海濱木槿微莖段的形態(tài)學(xué)下端切口插入澆有營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液的粒徑為0.4mm的沙盤(pán)中，以互不重疊為準(zhǔn)，插入長(zhǎng)度為0.6cm；其中，營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液為不含有機(jī)元素的不同類型植物基本培養(yǎng)液；

(5)外植體的成苗管理

將步驟(4)中定植后的海濱木槿微莖段蓋上塑料膜，于溫度28℃、相對(duì)濕度83％的溫室大棚中進(jìn)行不定根的誘導(dǎo)和成苗培養(yǎng)；40d后統(tǒng)計(jì)微莖段的生根情況。

研究結(jié)果表明：如表1所示，不同培養(yǎng)液類型對(duì)海濱木槿微莖段離體再生具有重要影響，其中，以不含有機(jī)元素的dkw培養(yǎng)液的不定根的誘導(dǎo)率和后期苗的長(zhǎng)勢(shì)均最佳，而不含有機(jī)元素的ms培養(yǎng)液最差。因此，不含有機(jī)元素的dkw培養(yǎng)液為海濱木槿微莖段離體再生的最佳營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)液。

表1培養(yǎng)液類型對(duì)海濱木槿微莖段離體再生的影響

注：數(shù)據(jù)為平均值，每個(gè)處理包含140個(gè)外植體，每個(gè)處理重復(fù)三次。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。