本發(fā)明涉及一種龜紋瓢蟲的人工純化擴繁飼養(yǎng)方法，具體地說，涉及龜紋瓢蟲的人工室內飼養(yǎng)方法。
背景技術：
：龜紋瓢蟲屬于鞘翅目昆蟲，它是田間主要的天敵昆蟲之一，它的成蟲和幼蟲均能捕食蚜蟲、薊馬、葉螨和鱗翅目的卵及低齡幼蟲。因此當龜紋瓢蟲的數目達到一定量時可以很好地控制田間蚜蟲和一些小型害蟲的數目，一定程度上保護作物。依據龜紋瓢蟲的捕食特性，可以考慮把龜紋瓢蟲運用在田間害蟲的生物防治上，達到田間害蟲綜合治理的目的?，F在已有大量文獻報道了有關龜紋瓢蟲捕食特性和室內人工飼養(yǎng)龜紋瓢蟲以及與龜紋瓢蟲人工飼料相關研究的文章，這些文章為龜紋瓢蟲的深入研究奠定基礎。龜紋瓢蟲室內飼養(yǎng)的第一步是田間龜紋瓢蟲的抓取和室內龜紋瓢蟲的純化與擴繁，室內飼養(yǎng)一般都采用豌豆蚜。關于龜紋瓢蟲室內純化和擴繁的飼養(yǎng)體系至今還未見報道。但是，該飼養(yǎng)體系是后續(xù)龜紋瓢蟲各方面研究如轉基因植物(毒蛋白)對其發(fā)育歷期、蟲重、各歷期形態(tài)、體內解毒蛋白等影響的基礎，因此尤為必要。室內飼養(yǎng)時，龜紋瓢蟲會把卵產在莖干、葉片、養(yǎng)蟲籠壁上，為其人工純化帶來一定的麻煩，且這些場所都不利于試驗時人為的取卵和對卵的收集，卵的收取問題亟待解決。龜紋瓢蟲幼蟲孵化出來后會取食附近的卵，一定程度上減少卵的孵化率，因此，人為的控制孵化時間和挑取出剛孵化的幼蟲可以一定程度上保證孵化率。技術實現要素：為克服現有技術的不足，本發(fā)明提供一種龜紋瓢蟲純化和擴繁方法。本發(fā)明提供的一種龜紋瓢蟲純化方法，包括：(1)將龜紋瓢蟲養(yǎng)殖于種植接有豌豆蚜的蠶豆苗的養(yǎng)蟲籠中，種有蠶豆苗的容器外圍包覆保鮮膜，蠶豆苗的苗高9-17cm，確保蠶豆苗舒展葉片少以達到龜紋瓢蟲在保鮮膜上產卵；(2)收取產卵的保鮮膜于溫濕環(huán)境下孵化出幼蟲；(3)將幼蟲及時取出置于另一個養(yǎng)蟲籠中飼養(yǎng)，待幼蟲化蛹后，停止步驟(2)收集卵的操作；(4)將步驟(3)中另一個養(yǎng)蟲籠的卵用保鮮膜收集后重復步驟(2)-步驟(4)至純化4代以上后得到純化的蟲卵。上述純化方法中，步驟(1)養(yǎng)殖龜紋瓢蟲前，把發(fā)芽時間≤24h的蠶豆苗放入飼養(yǎng)豌豆蚜的恒溫培養(yǎng)箱中，光周期14l:10d，溫度20±1℃，濕度70±10％，放置三天后，此蠶豆苗可用于龜紋瓢蟲的純化飼養(yǎng)。種植的蠶豆苗足夠豌豆蚜食用。步驟(1)的養(yǎng)蟲籠中可以用小花盆種植蠶豆苗，蠶豆苗上接有夠多的豌豆蚜。步驟(1)中，早、中、晚各換一次保鮮膜。在本發(fā)明的實施例中，優(yōu)選上午在9點到10點之間換一次保鮮膜；下午在3點到3點半之間再換一次保鮮膜；晚上在9點到10點之間第三次換保鮮膜；換保鮮膜時，在養(yǎng)蟲籠開口處橫放蠶豆苗，使蠶豆苗的莖和葉在籠內，外覆保鮮膜的容器在籠外來換保鮮膜。在保鮮膜上取卵的同時，采取措施使蠶豆苗上的蟲卵不能孵化出幼蟲，有利于分籠飼養(yǎng)，保證籠內龜紋瓢蟲代數的一致性。本發(fā)明純化方法的步驟(2)溫濕環(huán)境是指保鮮盒底部鋪一層濕紗布(濕紗布豎直放置，20s不滴水為標準)，孵化條件為：光周期16l:8d，溫度25±1℃，外環(huán)境濕度為70±10％，50-55h卵會孵化出來。若延緩幼蟲的孵化時間可把卵放在4℃冰箱里，放置時間<12h。步驟(2)中幼蟲孵化出來就將其挑出置于另一個養(yǎng)蟲籠中，所述另一個養(yǎng)蟲籠同步驟(1)中的養(yǎng)蟲籠條件一致。上述方法中，步驟(3)幼蟲在另一個養(yǎng)蟲籠的飼養(yǎng)條件為溫度25±1℃，濕度70±10％，光周期16l:8d。本發(fā)明還提供了一種龜紋瓢蟲擴繁的方法，首先采用上述龜紋瓢蟲的純化方法進行龜紋瓢蟲的純化，純化后的卵、幼蟲、成蟲置于擴繁籠中擴大培養(yǎng)；擴繁籠中種植有蠶豆苗，以及豌豆蚜，所述蠶豆苗的葉片數＞6，擴繁籠外圍包覆保鮮膜。這樣可以使龜紋瓢蟲可以在其背面產卵。也有利于龜紋瓢蟲產卵的分散，使卵和幼蟲不太集中，減少幼蟲取食的卵量和降低初孵幼蟲自相殘殺的概率擴繁方法中不分籠飼養(yǎng)，采集保鮮膜上的卵進行孵化。本發(fā)明提供了上述方法在植物病害生物防治中的應用。本發(fā)明針對龜紋瓢蟲的生物學特性，為其提供光滑的保鮮膜做為產卵場所，用保鮮膜來進行卵的收集。依據龜紋瓢蟲產卵在一天中的高峰期來換保鮮膜；依據其卵的有利孵化條件，通過加濕(或4℃放置一晚)來一定程度加快(或延緩)龜紋瓢蟲卵的孵化；依據龜紋幼蟲幼蟲數量密集時會自相殘殺的特性，擴繁時采用葉片相對較多的蠶豆苗來飼養(yǎng)，增加其產卵的場所，一定條件下減少剛孵化幼蟲的自相殘殺率，從而有利于龜紋瓢蟲的擴繁。本發(fā)明針對不同目的，對于室內龜紋瓢蟲的純化提供單一產卵場所—保鮮膜，擴繁時提供保鮮膜、蠶豆葉片為其產卵場所。采用本發(fā)明方法飼養(yǎng)龜紋瓢蟲，易收卵，易進行卵的孵化，易人工控制孵化時間(12h內)。在純化時，能夠獲得同一代的均一的龜紋瓢蟲。且能夠保證一定的孵化率。在試驗中，本發(fā)明采用保鮮膜收到的卵相對于葉片收到的卵更容易放置和籠外孵化，葉片采下來就容易皺縮變干不利于卵的孵化，且采摘葉片也不利于豌豆蚜的生長，從而可能影響龜紋瓢蟲的產卵。本方法操作簡便，成本低，材料易獲取，易實現實驗室內龜紋瓢蟲的純化和擴繁，易實驗室內不間斷飼養(yǎng)龜紋瓢蟲，為龜紋瓢蟲的規(guī)?；庇曫B(yǎng)奠定良好基礎。具體實施方式以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。在不背離本發(fā)明精神和實質的情況下，對本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發(fā)明的范圍。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規(guī)手段。實施例1龜紋瓢蟲的室內人工飼養(yǎng)方法(純化+擴繁)1、從田間捉取龜紋瓢蟲，放有養(yǎng)蟲籠中(稱為1號養(yǎng)蟲籠，此養(yǎng)蟲籠中的龜紋瓢蟲稱為1代龜紋瓢蟲)，養(yǎng)蟲籠內放有接有足夠豌豆蚜的蠶豆苗(種在小花盆里)，蠶豆苗高度盡量在9-17cm，且舒展的葉片數盡量少。在小花盆上纏繞一圈濕的保鮮膜。在9點、15點、21點換保鮮膜。從換下的保鮮膜上剪下卵塊兒，放在鋪有濕紗布的保鮮盒中。龜紋瓢蟲的飼養(yǎng)條件為溫度25±1℃，濕度70±10％，光周期16l:8d。2、孵化出來的幼蟲挑出來放在一個新的養(yǎng)蟲籠中，籠中也放有接有豌豆蚜的蠶豆苗(同上)，稱為2號養(yǎng)蟲籠，2代龜紋瓢蟲。在2號養(yǎng)蟲籠出現化蛹之前，孵化出的幼蟲都放在2號養(yǎng)蟲籠中?；汲霈F后，1號養(yǎng)蟲籠中不再收取卵。注意：在保鮮盒中孵化出來的幼蟲要及時挑取出來，不然剛孵化的幼蟲會取食卵并且有可能會被保鮮盒中的濕紗布粘死；在純化過程中化蛹出現后不再續(xù)放幼蟲是為了防止二代成蟲產的卵被幼蟲取食，保證在純化過程中獲得最大卵量。3、2號養(yǎng)蟲籠中的卵用保鮮膜收集后，在保鮮盒中孵化出來后放在3號養(yǎng)蟲籠中(同上)。以上依次純化到第5代后，可以用于試驗。也就是5號養(yǎng)蟲籠中產的卵可用于試驗。4、純化完成后，依舊用保鮮膜進行部分卵的收集。收集到的卵在濕紗布增加濕度的保鮮盒中孵化。孵化出的幼蟲可以用于試驗。且能保證得到相對均一的幼蟲，避免給試驗帶來某方面的誤差。1到4號養(yǎng)蟲籠中的蠶豆苗葉片數盡量少。5號養(yǎng)蟲籠中的蠶豆苗葉片數盡量多，舒展葉片最好大于6，此籠中用于擴繁或試驗。擴繁不需要一產卵就換籠，在籠內龜紋瓢蟲達到一定數量時可以換籠繼續(xù)擴繁，擴繁和純化步驟幾乎相同，區(qū)別在于：擴繁時用到的蠶豆苗舒展葉片數應盡量多，利于龜紋瓢蟲在葉片背面產卵。實施例2增加濕度孵化卵的試驗1、24:00把保鮮膜包覆在實施例1的5號養(yǎng)蟲籠中種有蠶豆苗的小花盆上，收集卵，第二天早上7:50收保鮮膜，剪下卵塊兒，分別放在兩種濕度的培養(yǎng)皿中，一個培養(yǎng)皿底部鋪有濕紗布(豎直放置，20s無水珠滴下來)，一個培養(yǎng)皿中沒有濕紗布。一共收集六天的卵，6組試驗(2017年1月8號到1月13號)。2、觀察6組試驗卵孵化的開始時間，以剛孵化出多于一半幼蟲的時間為孵化時間。表1不同濕度下孵化時間比較濕度實驗1實驗2實驗3實驗4實驗5實驗6濕紗布53h52h53h53h51h53h70±10％56h59h56h54h58h57h在此條件下，濕紗布可縮短孵化時間在3-7h。外界的環(huán)境影響卵的孵化時間，該試驗是在環(huán)境溫度25±1℃，環(huán)境濕度70±10％，光周期16l:8d的條件下進行，實施例3保鮮膜收卵法的試驗在實施例1的5號養(yǎng)蟲籠中用保鮮膜、濾紙、蠶豆葉片進行卵的收集，濾紙為圓形直徑15cm，貼近放在養(yǎng)蟲籠內種蠶豆苗容器的旁邊，籠中大約有50頭成蟲(31頭雌蟲)。以三天為準。查每天收集到的卵量。時間為2016年12月7號到12月9號。表2不同裝置的卵量(粒)裝置12月7號12月8號12月9號保鮮膜275217258濾紙007蠶豆葉183121153實施例4保鮮膜收卵的孵化率試驗用保鮮膜收集實施例1中的5號養(yǎng)蟲籠中的卵。用剪刀把卵塊兒剪下來，一定數量的卵數放在有濕紗布的保鮮盒中孵化，下表中的實驗1、3、5在卵變黑時放在4℃冰箱中10h，其余時間正常孵化。一共做了六組實驗，計算孵化率。正常孵化條件為溫度25±1℃，濕度70±10％，光周期16l:8d。試驗時間為2016年12月17號到12月20號。表3保鮮膜上卵的孵化率實驗1實驗2實驗3實驗4實驗5實驗6卵數32粒28粒24粒26粒30粒26粒孵化數25頭24頭18頭21頭23頭21頭孵化率78.13％85.71％75％80.77％76.67％80.77％4℃放置12h沒有明顯影響卵的孵化率，且可控制卵盡量在白天孵化，便于人為操作。注：孵化過程中要及時挑出已孵化出的幼蟲，否則未孵化的卵會被幼蟲取食而不能孵化出來。實施例5籠內龜紋瓢蟲數量擴繁到一定量所需時間本實施例采用兩種方法進行籠內龜紋瓢蟲的擴繁，且以化蛹數為計算量標準。方法1：用擴繁籠6，籠內原有35頭成蟲，雌蟲20頭，及時收取養(yǎng)蟲籠內保鮮膜上的卵，收取一星期，用實施例4的方法進行孵化，孵化出的幼蟲放回養(yǎng)蟲籠內；方法2：用用擴繁籠7，籠內原有35頭成蟲，雌蟲20頭，不采用保鮮膜收卵和籠外人工孵化。其他條件均一致。溫度25±1℃，濕度70±10％，光周期16l:8d表4不同方法養(yǎng)蟲籠擴繁的時間方法1方法2原有成蟲(頭)3535化蛹數量(頭)5050擴繁用時(d)1738注：本實施例中的化蛹是指活動特別不活躍且尾部末端黏著的四齡末的龜紋幼蟲，人為挑出來在透氣的ep管中單獨化蛹，計算化蛹數。結果說明，采用本發(fā)明的孵化擴繁方法，能夠比對照組(方法2)的擴繁效率提高一倍以上，短時間內可達到擴繁目的。雖然，上文已經用一般性說明、具體實施方式及試驗，對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎上，可以對之做出一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。當前第1頁12