本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種外生菌根真菌種植園的菌根苗木二次接種方法，更具體的，涉及一種塊菌(松露)種植園內(nèi)菌根苗木二次接種的方法
背景技術(shù)：
塊菌(松露)是外生菌根真菌的一種，屬于塊菌屬，通過(guò)形成菌根與很多樹木或灌木共生。塊菌屬中的一些種例如黑孢塊菌(tubermelanosporum)以其子實(shí)體特有的香味而世界聞名。在歐洲上世紀(jì)七十年代，已經(jīng)有將塊菌共生樹種幼苗預(yù)接種并移栽至管理良好的種植園來(lái)收獲塊菌的做法，在法國(guó)，有將近80％-90％的黑孢塊菌子實(shí)體來(lái)源于塊菌種植園，通過(guò)該預(yù)接種的方法已成功地將黑孢塊菌引種至澳大利亞、新西蘭、美國(guó)和南非。對(duì)于傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)來(lái)說(shuō)，塊菌種植代表了新的收入機(jī)會(huì)和農(nóng)業(yè)的多樣性。這些年來(lái)，如何提高塊菌種植園的產(chǎn)菌壽命是現(xiàn)在塊菌種植業(yè)所面臨的新問(wèn)題，關(guān)于對(duì)塊菌的共生苗木的預(yù)接種方法已經(jīng)非常成熟并有大量文獻(xiàn)，但是尚未有對(duì)菌根苗木二次接種的報(bào)道，本發(fā)明創(chuàng)新使用塊菌誘導(dǎo)坑的方法進(jìn)行二次接種，提高了塊菌的產(chǎn)出率，延長(zhǎng)了塊菌種植園的使用時(shí)間。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種塊菌(松露)種植園內(nèi)菌根苗木二次接種的方法。
為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：
一種塊菌種植園內(nèi)菌根苗木二次接種的方法，該方法以塊菌菌劑輔以蛭石、泥炭、菌肥混勻形成二次接種基質(zhì)，在菌木周圍挖誘導(dǎo)坑，將二次接種基質(zhì)加入誘導(dǎo)坑中，用土填平，第二年在誘導(dǎo)坑中收獲所接種塊菌子實(shí)體。
根據(jù)所述的一種塊菌種植園內(nèi)菌根苗木二次接種的方法，其中所述的塊菌菌劑是將塊菌子實(shí)體粉碎，打碎成勻漿，鏡檢孢子濃度達(dá)到5×106個(gè)/g。
根據(jù)所述的一種塊菌種植園內(nèi)菌根苗木二次接種的方法，其中所述的菌肥是指市售枯草芽孢桿菌菌肥。
根據(jù)所述的一種塊菌種植園內(nèi)菌根苗木二次接種的方法，其中所述的二次接種基質(zhì)是指將塊菌菌劑、泥炭、蛭石和菌肥按照300g塊菌菌劑+200g泥炭+50l蛭石+50l菌肥的比例混合，調(diào)節(jié)水分至18-20％。
根據(jù)所述的一種塊菌種植園內(nèi)菌根苗木二次接種的方法，其中所述的誘導(dǎo)坑是指在距離菌根苗木50公分處東、西、南、北四個(gè)方向挖邊長(zhǎng)為0.2m、5-8cm深的誘導(dǎo)坑，每個(gè)坑填放二次接種基質(zhì)250ml，并用翻出的土將坑填平。
根據(jù)所述的一種塊菌種植園內(nèi)菌根苗木二次接種的方法，其中所述的在誘導(dǎo)坑中收獲是指經(jīng)過(guò)二次接種的菌根苗木，第二年至第四年在誘導(dǎo)坑內(nèi)收獲塊菌。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具備如下的優(yōu)益性：
塊菌種植園內(nèi)菌根苗木二次接種的方法操作簡(jiǎn)單，可以延長(zhǎng)一次接種后塊菌(松露)種植園的產(chǎn)菌年限，提高農(nóng)場(chǎng)主收入并增加了農(nóng)業(yè)的多樣性。
具體實(shí)施方式
下面用本發(fā)明的實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此來(lái)限定本發(fā)明。
實(shí)施例1
印度塊菌(tuberindicum)(松露)種植園內(nèi)錐連櫟(quercusfranchetii)二次接種：
一個(gè)具有五年歷史的印度塊菌(tuberindicum)種植園，所栽培共生樹種為錐連櫟(quercusfranchetii)。
1)制備印度塊菌菌劑：將印度塊菌子實(shí)體打碎成勻漿，鏡檢其孢子濃度達(dá)到5×106個(gè)/g，待用；
2)制備二次接種基質(zhì)：將上一步得到的印度塊菌菌劑連同泥炭、蛭石、枯草芽孢桿菌菌肥混勻，按照300g印度塊菌菌劑+200g泥炭+50l蛭石+50l菌肥的比例，并調(diào)節(jié)水分至18％-20％；
3)在錐連櫟周圍布置誘導(dǎo)坑并接種：選取部分錐連櫟進(jìn)行誘導(dǎo)坑二次接種，在這些錐連櫟周圍50cm處東、西、南、北四個(gè)方向分別布置四個(gè)誘導(dǎo)坑，每個(gè)坑長(zhǎng)、寬均為0.2m，深5-8cm，并將坑內(nèi)錐連櫟根系和菌根用鐵锨截?cái)?，每個(gè)誘導(dǎo)坑底部放入250ml前步制備好的二次接種基質(zhì)，并用土塊填平；
4)收獲：對(duì)誘導(dǎo)坑內(nèi)所產(chǎn)生塊菌數(shù)量以及坑外所產(chǎn)生塊菌數(shù)量從二次接種后連續(xù)三年進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，結(jié)果如下表所示：
表1印度塊菌接種園二次接種后塊菌產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)
實(shí)施例2
李氏塊菌(tuberliyuanum)(松露)種植園內(nèi)板栗樹(castaneamollissima)二次接種：
一個(gè)具有五年歷史的李氏塊菌(tuberliyuanum)種植園，所栽培共生樹種為板栗(castaneamollissima)。
1)制備李氏塊菌菌劑：將李氏塊菌子實(shí)體打碎成勻漿，鏡檢其孢子濃度達(dá)到5×106個(gè)/g，待用；
2)制備二次接種基質(zhì)：將上一步得到的李氏塊菌菌劑連同泥炭、蛭石、枯草芽孢桿菌菌肥混勻，按照300g李氏塊菌菌劑+200g泥炭+50l蛭石+50l菌肥的比例，并調(diào)節(jié)水分至18％-20％；
3)在板栗周圍布置誘導(dǎo)坑并接種：選取部分板栗進(jìn)行誘導(dǎo)坑二次接種，在這些板栗周圍50cm處東、西、南、北四個(gè)方向分別布置四個(gè)誘導(dǎo)坑，每個(gè)坑長(zhǎng)、寬均為0.2m，深5-8cm，并將坑內(nèi)菌根苗木根系和菌根用鐵锨截?cái)?，每個(gè)誘導(dǎo)坑底部放入250ml前步制備好的二次接種基質(zhì)，并用土填平；
4)收獲：對(duì)誘導(dǎo)坑內(nèi)所產(chǎn)生塊菌數(shù)量以及坑外所產(chǎn)生塊菌數(shù)量從二次接種后連續(xù)三年進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，結(jié)果如下表所示：
表2李氏塊菌接種園二次接種后塊菌產(chǎn)量統(tǒng)計(jì)