本發(fā)明屬于培養(yǎng)基制備技術領域，具體涉及一種牛大力生根組織培養(yǎng)基。
背景技術：
牛大力，別名豬腳笠、金鐘根、山蓮藕、倒吊金鐘、大力薯，為豆科豆科崖豆藤屬植物，其主要成分為蛋白質、淀粉質及生物堿等。牛大力以根入藥，全年可采挖，為傳統(tǒng)的藥食同源植物。牛大力性平、味甘，有補腎潤肺、強筋活絡的功效，常用于治療腰肌勞損、風濕性關節(jié)炎、肺結核、慢性支氣管炎、慢性肝炎等病癥。牛大力除了入藥煎劑外，亦常為廣東民間入湯做食療、藥膳之用。牛大力有效成分有高麗槐素、芒柄花素、查爾酮類化合物、異黃酮類、糠醛、牛大力多糖等，這些成分具有抗炎殺菌、免疫調節(jié)作用，并由一定抗氧化和清除自由基作用。牛大力經(jīng)采挖后，經(jīng)清洗、晾曬可直接入藥，也可用于食用，更可經(jīng)深加工，制成牛大力保健酒、牛大力花茶等深加工產(chǎn)品。牛大力是制藥企業(yè)加工中成藥、保健品的常用原料，近年來，隨著我國中醫(yī)藥事業(yè)蓬勃發(fā)展，人們生活水平逐漸提高，保健意識不斷增強，牛大力的市場需求也在不斷擴大。
目前，牛大力的繁殖方法主要有種子繁育、扦插繁育、組織培養(yǎng)繁育等幾種模式。種子繁育及扦插培養(yǎng)對牛大力種苗本身要求較高，且培育周期較長，不利于牛大力種植推廣；因此，選擇優(yōu)良的牛大力種苗，采用組織培養(yǎng)的模式進行繁育，是一種高效繁育培養(yǎng)牛大力的方法，能大大縮短牛大力的培育時間，且提高牛大力幼苗的成活率，繁育所得植株健康，有利于提高牛大力的結薯能力及產(chǎn)量。
在植物組織培養(yǎng)過程中，根據(jù)植物生長發(fā)育過程所需求的養(yǎng)分不同，可分為三種培養(yǎng)基，分別為誘導分化培養(yǎng)基、生根組織培養(yǎng)基、壯苗培養(yǎng)基。其中，生根組織培養(yǎng)基起到植物體生根的目的，直接決定了植物的根系發(fā)育程度，從而能夠提升組培苗對養(yǎng)分的吸收能力及移栽成活率。針對不同的植物，生根組織培養(yǎng)基的成分也應有所區(qū)別。
以上背景技術內容的公開僅用于輔助理解本發(fā)明的發(fā)明構思及技術方案，其并不必然屬于本專利申請的現(xiàn)有技術，在沒有明確的證據(jù)表明上述內容在本專利申請的申請日已經(jīng)公開的情況下，上述背景技術不應當用于評價本申請的新穎性和創(chuàng)造性。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，以實現(xiàn)對牛大力組培苗的高效誘導生根。
為了解決以上技術問題，本發(fā)明采用以下技術方案：
一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂35～105g、蔗糖12～48g、激素0.3～1.2g、無機鹽溶液3～14g、煙酸0.1～1.2g、活性炭8～25g、半胱氨酸0.2～1.2g、鏈霉素0.1～1.5g、水解乳蛋白7～18g、有機物40～120g、三蒸水15～60g。
優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂40～90g、蔗糖18～42g、激素0.5～1g、無機鹽溶液5～12g、煙酸0.2～1g、活性炭10～22g、半胱氨酸0.3～1g、鏈霉素0.2～1.2g、水解乳蛋白8～15g、有機物50～110g、三蒸水20～50g。
優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂45～80g、蔗糖20～36g、激素0.6～0.8g、無機鹽溶液6～10g、煙酸0.3～0.9g、活性炭12～20g、半胱氨酸0.5～0.8g、鏈霉素0.3～0.9g、水解乳蛋白10～14g、有機物55～95g、三蒸水25～45g。
優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，所述有機物包括牛奶、蘋果泥、香蕉泥中的一種。
更優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，所述激素包括6-ba、kt、cppu、aba中的一種。
更優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，其無機鹽溶液中的無機鹽包括硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣中的一種或幾種。
進一步地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：
s1：激素先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；
s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；
s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的激素溶液、無機鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、有機物，充分攪拌；
s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節(jié)至體系ph值為5～6.6；
s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于培養(yǎng)瓶中；
s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌一段時間后，即制成生根組織培養(yǎng)基。
進一步地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，所使用的試劑級別均為分析純。
進一步地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，步驟s5中所述培養(yǎng)瓶為罐頭瓶。
進一步地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，步驟s6中滅菌溫度為120～135℃，滅菌時間為5～15min。
本發(fā)明具有以下有益效果：
(1)本發(fā)明所述生根組織培養(yǎng)基，其成分來源廣泛，制備方法易于操作，且儲存期長；
(2)本發(fā)明所述的生根組織培養(yǎng)基，含有對促進植物生根明顯的硼、脫落酸等成分；
(3)本發(fā)明所述的生根組織培養(yǎng)基能夠有效促進牛大力組培苗幼體生根，提升生根率及移栽成活率。
具體實施方式
下面結合具體實施方式對本發(fā)明作進一步詳細說明。應該強調的是，下述說明僅僅是示例性的，而不是為了限制本發(fā)明的范圍及其應用。
實施例1：
一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂35g、蔗糖12g、6-ba0.3g、含有硼酸鈉、氯化鋅、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣的無機鹽溶液3g、煙酸0.1g、活性炭8g、半胱氨酸0.2g、鏈霉素0.1g、水解乳蛋白7g、牛奶40g、三蒸水15g。
所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：
s1：6-ba先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；
s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；
s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的6-ba溶液、無機鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、牛奶，各試劑均為分析純，然后充分攪拌；
s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節(jié)至體系ph值為5.5；
s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中；
s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在120℃下滅菌15min，即制成生根組織培養(yǎng)基。
實施例2
一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂105g、蔗糖48g、kt1.2g、含有硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鈣的無機鹽溶液14g、煙酸1.2g、活性炭25g、半胱氨酸1.2g、鏈霉素1.5g、水解乳蛋白18g、蘋果泥120g、三蒸水60g。
所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：
s1：kt先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；
s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；
s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的kt溶液、無機鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、蘋果泥，各試劑均為分析純，然后充分攪拌；
s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節(jié)至體系ph值為5.8；
s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中；
s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在135℃下滅菌5min，即制成生根組織培養(yǎng)基。
實施例3
一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂40g、蔗糖18g、cppu0.5g、含有硼酸鈉、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣的無機鹽溶液5g、煙酸0.2g、活性炭10g、半胱氨酸0.3g、鏈霉素0.2g、水解乳蛋白8g、香蕉泥50g、三蒸水20g。
所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：
s1：cppu先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；
s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；
s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的cppu溶液、無機鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、香蕉泥，各試劑均為分析純，然后充分攪拌；
s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節(jié)至體系ph值為6.5；
s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中；
s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在125℃下滅菌12min，即制成生根組織培養(yǎng)基。
實施例4
一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂90g、蔗糖42g、aba1g、含有硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣的無機鹽溶液12g、煙酸1g、活性炭22g、半胱氨酸1g、鏈霉素1.2g、水解乳蛋白15g、牛奶110g、三蒸水50g。
所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：
s1：aba先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；
s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；
s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的aba溶液、無機鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、牛奶，各試劑均為分析純，然后充分攪拌；
s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節(jié)至體系ph值為5.8；
s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中；
s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在135℃下滅菌6min，即制成生根組織培養(yǎng)基。
實施例5
一種牛大力生根組織培養(yǎng)基，包括以下原料：瓊脂55g、蔗糖28g、aba0.7g、無機鹽溶液8g、煙酸0.6g、活性炭16g、半胱氨酸0.7g、鏈霉素0.5g、水解乳蛋白12g、蘋果泥80g、三蒸水30g。
更優(yōu)選地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基，其無機鹽溶液中的無機鹽包括硼酸鈉、氯化鋅、氯化銨、磷酸二氫鉀、氯化鎂、氯化鈣中的一種或幾種。
進一步地，所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：
s1：aba先用少量95％酒精溶解后，加入去離子水配置成溶液；
s2：蔗糖使用去離子水配置成10％的溶液；
s3：向燒杯中加入三蒸水，接著加入s1所得的aba溶液、無機鹽溶液、煙酸、活性炭、半胱氨酸、鏈霉素、水解乳蛋白、蘋果泥，各試劑均為分析純，然后充分攪拌；
s4：向s3所制成的溶液中加入s2所得的蔗糖溶液，充分攪拌，使用10％naoh和10％hcl溶液調節(jié)至體系ph值為6.2；
s5：向步驟s4所制成的溶液中加入瓊脂，加熱攪拌，待溶液沸騰后分裝于罐頭培養(yǎng)瓶中；
s6：將步驟s5所制成的誘導組織培養(yǎng)瓶置于高壓蒸汽滅菌鍋中在130℃下滅菌8min，即制成生根組織培養(yǎng)基。
為了更詳細說明本發(fā)明的有益效果，以下還提供了具體的試驗結果。
選取牛大力新鮮種子切片180份作為組織培養(yǎng)的外植體，隨機分為a、b、c、d、e、f六組，每組30份。每組經(jīng)升汞消毒后分別接入相同組分的誘導培養(yǎng)基，培育10天后，a～e組種苗移入采用本發(fā)明實施例1～5所述配方及方法制備成的生根組織培養(yǎng)基中，f組接入市售普通生根組織培養(yǎng)基中，繼續(xù)培養(yǎng)7天后，比較各組的生根率。后移入種植地種植培育，記錄種苗成活率，實驗數(shù)據(jù)如下表所示。
由此可見，本發(fā)明所述的牛大力生根組織培養(yǎng)基與市售普通培養(yǎng)基相比，能夠提升牛大力組培苗的生根率，且移栽成活率較高。
以上內容不能認定本發(fā)明的具體實施只局限于這些說明，對于本發(fā)明所屬技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明構思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應當視為屬于本發(fā)明由所提交的權利要求書確定的專利保護范圍。