本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)方法，特別是涉及一種高含量蟲草素蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法及技術(shù)。

背景技術(shù)：

蛹蟲草又叫北冬蟲夏草、北蟲草，蛹蟲草的功效：補肺陰、補腎陽，蛹蟲草的作用是治腎虛，陽萎遺精，腰膝酸痛，病后虛弱，中醫(yī)認(rèn)為其起扶正固本作用，對老年性慢性支氣管炎、肺原性心臟病有顯著療效，能提高肝臟解毒能力，起護肝作用，提高身體抗病毒和抗輻射能力。

中醫(yī)認(rèn)為，蟲草入肺腎二經(jīng)，既能補肺陰，又能補腎陽，主治腎虛，陽萎遺精，腰膝酸痛，病后虛弱，久咳虛弱，勞咳痰血，自汗盜汗等，是唯一的一種能同時平衡、調(diào)節(jié)陰陽的中藥。

現(xiàn)有技術(shù)對蛹蟲草的培養(yǎng)中添加了經(jīng)過化學(xué)處理合成的原料，在提取蛹蟲草中的蟲草素時降低了蟲草素的功效，同時培養(yǎng)過程中產(chǎn)量較低，滿足不了市場的需求。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種高含量蟲草素蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法養(yǎng)技術(shù)。為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種高含量蟲草素蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法，所述蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法為光溫脅迫法，所述光溫脅迫法按照以下培養(yǎng)步驟進行：

1）、培養(yǎng)基的粉碎：采用工業(yè)粉碎機或者榨汁機將培養(yǎng)基粉碎成20-50目；

2）、消毒、冷卻、接種：利用巴氏消毒法對粉碎后的培養(yǎng)基進行高溫消毒，消毒后冷卻至常溫，在無菌條件下接入蛹蟲草子的菌種；

3）、無光培養(yǎng)：在無光線的箱體中培養(yǎng)6-7天，直至培養(yǎng)基的表面長出菌絲；

4）、弱光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度20℃培養(yǎng)3-6天且每天保持光照16小時，完成轉(zhuǎn)色，誘導(dǎo)菌蕾產(chǎn)生；

5）、中光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度20℃培養(yǎng)14天且每天保持光照12小時，促進子實體生長；

6）、強光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度22℃培養(yǎng)7天且每天保持光照20小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

7)、中光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照500lx、溫度22℃培養(yǎng)14天且每天保持光照8小時，子實體生物量大量積累；

8)、強光、高溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度26℃培養(yǎng)7天且每天保持光照8小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

9)、弱光、低溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度18℃培養(yǎng)7天且每天保持光照4小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

10）、強光、高溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度28℃培養(yǎng)7天且每天保持光照18小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

11）、收獲子實體。

優(yōu)選的，所述培養(yǎng)基按照重量計，其組分為：花生仁95-105g，生黃豆95-105g，鮮紅薯95-105g，大米490-510g，西紅柿45-55g，蠶蛹粉45-55g，鮮牛肉45-55g，鮮土豆40-50g，蛹蟲草子實體提取液45-55ml，純凈水990-1010ml。

優(yōu)選的，所述蛹蟲草子實體提取液的制備方法為：取新鮮蛹蟲草子實體4-6g、純凈水50-60ml進行攪拌，然后用濾網(wǎng)進行過濾即得。

本發(fā)明提供一種高含量蟲草素蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法，培養(yǎng)過程與傳統(tǒng)工藝相似，但是通過設(shè)定特定的溫控值和光照時間，提高了蛹蟲草的產(chǎn)量，本發(fā)明的培養(yǎng)基中在采用天然原料的情況下提高了蛹蟲草子實體的蟲草素含量，使提取出的蟲草素的藥用價值更高。

具體實施方式

本發(fā)明所采用的的方案是：

實施例一：

一種高含量蟲草素蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法，所述蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法為光溫脅迫法，所述光溫脅迫法按照以下培養(yǎng)步驟進行：

1）、培養(yǎng)基的粉碎：采用工業(yè)粉碎機或者榨汁機將培養(yǎng)基粉碎成20目；

2）、消毒、冷卻、接種：利用巴氏消毒法對粉碎后的培養(yǎng)基進行高溫消毒，消毒后冷卻至常溫，在無菌條件下接入蛹蟲草子的菌種；

3）、無光培養(yǎng)：在無光線的箱體中培養(yǎng)6天，直至培養(yǎng)基的表面長出菌絲；

4）、弱光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度20℃培養(yǎng)3天且每天保持光照16小時，完成轉(zhuǎn)色，誘導(dǎo)菌蕾產(chǎn)生；

5）、中光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度20℃培養(yǎng)14天且每天保持光照12小時，促進子實體生長；

6）、強光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度22℃培養(yǎng)7天且每天保持光照20小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

7)、中光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照500lx、溫度22℃培養(yǎng)14天且每天保持光照8小時，子實體生物量大量積累；

8)、強光、高溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度26℃培養(yǎng)7天且每天保持光照8小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

9)、弱光、低溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度18℃培養(yǎng)7天且每天保持光照4小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

10）、強光、高溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度28℃培養(yǎng)7天且每天保持光照18小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

11）、收獲子實體。

在本實施例中，所述培養(yǎng)基按照重量計，其組分為：花生仁100g，生黃豆100g，鮮紅薯100g，大米500g，西紅柿50g，蠶蛹粉50g，鮮牛肉50g，鮮土豆45g，蛹蟲草子實體提取液50ml，純凈水1000ml。

在本實施例中，所述蛹蟲草子實體提取液的制備方法為：取新鮮蛹蟲草子實體5g、純凈水55ml進行攪拌，然后用濾網(wǎng)進行過濾即得。

蛹蟲草子實體的蟲草素含量：均值3.5%，最高5.34%，最低2.46%。

實施例二：

一種高含量蟲草素蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法，所述蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法為光溫脅迫法，所述光溫脅迫法按照以下培養(yǎng)步驟進行：

1）、培養(yǎng)基的粉碎：采用工業(yè)粉碎機或者榨汁機將培養(yǎng)基粉碎成35目；

2）、消毒、冷卻、接種：利用巴氏消毒法對粉碎后的培養(yǎng)基進行高溫消毒，消毒后冷卻至常溫，在無菌條件下接入蛹蟲草子的菌種；

3）、無光培養(yǎng)：在無光線的箱體中培養(yǎng)7天，直至培養(yǎng)基的表面長出菌絲；

4）、弱光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度20℃培養(yǎng)6天且每天保持光照16小時，完成轉(zhuǎn)色，誘導(dǎo)菌蕾產(chǎn)生；

5）、中光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度20℃培養(yǎng)12天且每天保持光照12小時，促進子實體生長；

6）、強光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度22℃培養(yǎng)6天且每天保持光照20小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

7)、中光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照500lx、溫度22℃培養(yǎng)12天且每天保持光照8小時，子實體生物量大量積累；

8)、強光、高溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度26℃培養(yǎng)6天且每天保持光照8小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

9)、弱光、低溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度18℃培養(yǎng)6天且每天保持光照4小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

10）、強光、高溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度28℃培養(yǎng)6天且每天保持光照18小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

11）、收獲子實體。

在本實施例中，所述培養(yǎng)基按照重量計，其組分為：其組分為：花生仁95g，生黃豆95g，鮮紅薯95g，大米490g，西紅柿45g，蠶蛹粉45g，鮮牛肉45g，鮮土豆40g，蛹蟲草子實體提取液45ml，純凈水990ml。

在本實施例中，所述蛹蟲草子實體提取液的制備方法為：取新鮮蛹蟲草子實體4g、純凈水50ml進行攪拌，然后用濾網(wǎng)進行過濾即得。

實施例三：

一種高含量蟲草素蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法，所述蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法為光溫脅迫法，所述光溫脅迫法按照以下培養(yǎng)步驟進行：

1）、培養(yǎng)基的粉碎：采用工業(yè)粉碎機或者榨汁機將培養(yǎng)基粉碎成50目；

2）、消毒、冷卻、接種：利用巴氏消毒法對粉碎后的培養(yǎng)基進行高溫消毒，消毒后冷卻至常溫，在無菌條件下接入蛹蟲草子的菌種；

3）、無光培養(yǎng)：在無光線的箱體中培養(yǎng)6天，直至培養(yǎng)基的表面長出菌絲；

4）、弱光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度20℃培養(yǎng)5天且每天保持光照16小時，完成轉(zhuǎn)色，誘導(dǎo)菌蕾產(chǎn)生；

5）、中光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度20℃培養(yǎng)14天且每天保持光照12小時，促進子實體生長；

6）、強光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度22℃培養(yǎng)7天且每天保持光照20小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

7)、中光、適溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照500lx、溫度22℃培養(yǎng)14天且每天保持光照8小時，子實體生物量大量積累；

8)、強光、高溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度26℃培養(yǎng)7天且每天保持光照8小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

9)、弱光、低溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照300lx、溫度18℃培養(yǎng)7天且每天保持光照4小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

10）、強光、高溫培養(yǎng)：室內(nèi)大棚中光照1000lx、溫度28℃培養(yǎng)7天且每天保持光照18小時，誘導(dǎo)蟲草素生產(chǎn)；

11）、收獲子實體。

在本實施例中，所述培養(yǎng)基按照重量計，其組分為：其組分為：花生仁105g，生黃豆105g，鮮紅薯105g，大米510g，西紅柿55g，蠶蛹粉55g，鮮牛肉55g，鮮土豆50g，蛹蟲草子實體提取液55ml，純凈水1010ml。

在本實施例中，所述蛹蟲草子實體提取液的制備方法為：取新鮮蛹蟲草子實體6g、純凈水60ml進行攪拌，然后用濾網(wǎng)進行過濾即得。

以下是本發(fā)明的方案與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果：

1.配方為大米50g，營養(yǎng)液35g（營養(yǎng)液組分為每1000ml含蛋白胨15~20g、葡萄糖15~20g、蠶蛹粉20~30g、甘氨酸20~30g、腺嚓吟2~3g、硫酸鎂1~2g、磷酸二氫鉀1~2g、酵母粉4~5g，其余為純凈水）的培養(yǎng)基采用采用以下培養(yǎng)方法（1.子實體培養(yǎng)培養(yǎng)基表層形成微小子實體時,在培養(yǎng)基表層再次噴灑一層質(zhì)量濃度為0.05-0.1%的葡萄糖酸鋅溶液,噴灑量以剛好將培養(yǎng)基覆蓋為準(zhǔn)；2.調(diào)整溫度為18-20℃,每天光照不少于12小時,照度1500-200lx，培養(yǎng)8-12天；3.培養(yǎng)至第8-12天的培養(yǎng)物的培養(yǎng)溫度調(diào)至培養(yǎng)溫度18-25℃,其它條件不變,進行常規(guī)培養(yǎng)）,直到收獲子實體。所得子實體中的蟲草素含量為0.5-1.0%。而采用本發(fā)明所述光溫脅迫培養(yǎng)方法所得子實體中的蟲草素含量為1.2-1.8%。

2.固體培養(yǎng)基由大米、黑螞蟻粉和營養(yǎng)液組成,大米、黑螞蟻粉和營養(yǎng)液的用量比例為40g：0.5g:20ml。固體培養(yǎng)基中的黑螞蟻粉末是將黑螞蟻粉碎后過20目篩，該營養(yǎng)液每升中含有20g蛋白胨、20g葡萄糖、1g磷酸二氫鉀、0.5g硫酸鎂、0.05g維生素，其余為純凈水。采用以下培養(yǎng)方法（1.子實體培養(yǎng)培養(yǎng)基表層形成微小子實體時,在培養(yǎng)基表層再次噴灑一層質(zhì)量濃度為0.05-0.1%的葡萄糖酸鋅溶液,噴灑量以剛好將培養(yǎng)基覆蓋為準(zhǔn)；2.調(diào)整溫度為18-20℃,每天光照不少于12小時,照度1500-2000lx，培養(yǎng)8-12天；3.培養(yǎng)至第8-12天的培養(yǎng)物的培養(yǎng)溫度調(diào)至培養(yǎng)溫度18-25℃,其它條件不變,進行常規(guī)培養(yǎng)）,直到收獲子實體。所得子實體中的蟲草素含量為0.6-1.2%。而采用本發(fā)明所述光溫脅迫培養(yǎng)方法所得子實體中的蟲草素含量為1.5-2.5%。

本發(fā)明提供一種高含量蟲草素蛹蟲草子實體的培養(yǎng)方法，培養(yǎng)過程與傳統(tǒng)工藝相似，但是通過設(shè)定特定的溫控值和光照時間，提高了蛹蟲草的產(chǎn)量，本發(fā)明的培養(yǎng)基中在不添加任何經(jīng)過化學(xué)工藝合成的原料的情況下提高了蛹蟲草子實體的蟲草素含量，使提取出的蟲草素的藥用價值更高。

由技術(shù)常識可知，本發(fā)明可以通過其它的不脫離其精神實質(zhì)或必要特征的實施方案來實現(xiàn)。因此，上述公開的實施方案，就各方面而言，都只是舉例說明，并不是僅有的。所有在本發(fā)明范圍內(nèi)或在等同于本發(fā)明的范圍內(nèi)的改變均被本發(fā)明包含。