本發(fā)明涉及水產(chǎn)品養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種低齡鱘魚(yú)腹部側(cè)開(kāi)口雌雄鑒別技術(shù)。

背景技術(shù)：

目前，國(guó)內(nèi)外常用的鱘魚(yú)性別鑒別技術(shù)主要有以下幾種：一是超聲鑒別法，如本申請(qǐng)人2008年前申請(qǐng)的專利公告號(hào)為cn101647718b，一種超聲波鱘魚(yú)雌雄鑒別方法，運(yùn)用超聲波的物理學(xué)功能針對(duì)鱘魚(yú)性腺發(fā)育早期解剖學(xué)特點(diǎn)所顯示的不同圖像進(jìn)行判別雌雄，利用電腦連接一個(gè)超聲波掃描儀來(lái)掃描性腺結(jié)構(gòu)，鱘魚(yú)性腺的超聲波檢查在正面進(jìn)行，以取得不同成熟階段的卵巢超聲圖。二是血液生化及激素指標(biāo)判別法，如專利公開(kāi)號(hào)為cn100404553a的一種鱘科魚(yú)類卵黃磷蛋白抗體的制備方法及其應(yīng)用，涉及用于鑒別鱘科魚(yú)類雌雄的卵黃磷蛋白抗體的制備方法，通過(guò)使用卵黃磷蛋白抗體鑒別鱘科魚(yú)類雌雄的方法；取鱘科魚(yú)類的卵，低溫高速勻漿和低溫離心后，經(jīng)飽和硫酸銨沉淀，凝膠柱分離純化，透析除鹽后，制備卵黃磷蛋白凍干粉；稱取凍干粉，溶于生理鹽水中，加入弗氏佐劑乳化，免疫大白兔，制備多克隆抗體。另外還有腹腔外科手術(shù)法、內(nèi)窺鏡法、基因鑒別法等。其中腹腔外科手術(shù)不需要特殊儀器設(shè)備或試劑，一次操作即可完成性別鑒定和分池培育，鑒定準(zhǔn)確率可高達(dá)100%，是目前生產(chǎn)中最普遍采用的方法之一。腹腔外科手術(shù)鑒別包含兩種方式，即腹部穿刺手術(shù)和側(cè)部開(kāi)口手術(shù)。其中側(cè)部開(kāi)口手術(shù)較穿刺手術(shù)更早一年對(duì)鱘魚(yú)進(jìn)行性別鑒定，可將鑒別年齡提前至3齡，甚至2.5齡即可鑒別出雌雄性別，而且對(duì)3齡鱘魚(yú)鑒別的成功率高于穿刺手術(shù)；但由于側(cè)部開(kāi)口手術(shù)的創(chuàng)口較腹部穿刺手術(shù)大，因此術(shù)后愈合的時(shí)間較長(zhǎng)，更容易造成發(fā)病死亡，且影響覓食效果導(dǎo)致日增重降低。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是為了解決鱘魚(yú)養(yǎng)殖過(guò)程中的低齡鱘魚(yú)雌雄鑒別準(zhǔn)確率低、操作工藝過(guò)于復(fù)雜等問(wèn)題，提供一種低齡鱘魚(yú)腹部側(cè)開(kāi)口雌雄鑒別技術(shù)。

本發(fā)明的上述技術(shù)問(wèn)題主要是通過(guò)下述技術(shù)方案得以解決的：一種低齡鱘魚(yú)腹部側(cè)開(kāi)口雌雄鑒別技術(shù)，其特征是包括以下步驟：

一、鑒別前的準(zhǔn)備：

（1）停食：待鑒別鱘魚(yú)停食7天以上；水溫在18℃以下進(jìn)行鑒別。本方案整個(gè)過(guò)程的水溫都需維持在18℃以下。

（2）鑒別設(shè)施及工具準(zhǔn)備：撈具、麻醉缸、麻醉劑、量具、魚(yú)用手術(shù)臺(tái)、手術(shù)刀、鑒別器、取卵器、顯微鏡、載玻片、消毒液、燒杯等等。

（3）集箱：觀察鱘魚(yú)單位密度，保證鱘魚(yú)不缺氧前提下，逐步縮小箱體。

（4）撈魚(yú)：撈魚(yú)過(guò)程中，頂住魚(yú)頭讓鱘魚(yú)腹部落入撈具網(wǎng)兜中，并使魚(yú)體呈“u”字型撈起，然后送至麻醉缸。

二、待鑒別鱘魚(yú)的麻醉：

（1）配置麻醉液：使用丁香油作麻醉劑，按照油水之比1:10000進(jìn)行配比。

（2）麻醉：鱘魚(yú)放入麻醉缸，待進(jìn)入暈睡狀態(tài)，表現(xiàn)為身體失去平衡，呈現(xiàn)腹部或背部朝上狀態(tài)，當(dāng)背部朝上時(shí)進(jìn)行人為翻轉(zhuǎn)，使魚(yú)體腹部朝上；待魚(yú)體腹部朝上后無(wú)反應(yīng)，則說(shuō)明魚(yú)體已被麻醉。

（3）抱魚(yú)：一只手握住魚(yú)尾使尾柄朝上、魚(yú)背朝外、魚(yú)腹朝下，另一只手輕托魚(yú)腹，并用肘部夾住魚(yú)頭。

三、腹部側(cè)開(kāi)口：

（1）腹部取樣位置：以取樣者腹部與魚(yú)用手術(shù)臺(tái)上的鱘魚(yú)腹部相對(duì)時(shí)，鱘魚(yú)頭部在取樣人左手邊為標(biāo)準(zhǔn)，在鱘魚(yú)的腹鰭往胸鰭方向第三與第四骨板之間，距腹線1.5cm處進(jìn)行取樣定位。以取樣者臉朝魚(yú)腹方向進(jìn)行操作。

（2）腹部取樣開(kāi)口操作：?jiǎn)问治兆∈中g(shù)刀柄并伸出食指頂住手術(shù)刀片，指尖與刀片尖端距離約為1cm；找到取樣部位后將刀片朝魚(yú)體平行方向插入，開(kāi)一個(gè)長(zhǎng)為1-2cm的刀口。

四、雌雄觀察鑒別：

（1）輕輕扒開(kāi)切口觀察性腺，脂肪表層下埋一條邊沿褶皺且為淡黃色的粗線則為雌魚(yú)卵巢，卵巢表面質(zhì)地較軟，富有褶皺和分葉，卵粒隱約可見(jiàn)；脂肪層出現(xiàn)兩排由許多白色包囊組成的條帶則為雄魚(yú)的精巢，精巢為白色，表面豐滿光滑，質(zhì)地較硬，呈棒狀或塊狀。

（2）清潔與消毒：每次切口后必須將手術(shù)刀等鑒別工具放入盛有75％的酒精燒杯中涮洗；之后擦干凈。

五、鑒別后的復(fù)蘇和恢復(fù)：

（1）放魚(yú)和醒魚(yú)：將鑒別后的雄魚(yú)、雌魚(yú)或不確定雌雄的鱘魚(yú)分別抱入預(yù)備好的且具有明顯標(biāo)記的空網(wǎng)箱；對(duì)蘇醒過(guò)慢的鱘魚(yú)采取輕輕晃動(dòng)、按摩、清洗腮部等措施加快其蘇醒。

（2）創(chuàng)口處理：鱘魚(yú)鑒別后3天內(nèi)不予喂食；仔細(xì)觀察傷口狀況，若有發(fā)炎癥狀，及時(shí)撈出放入玻璃鋼魚(yú)池或小網(wǎng)箱中進(jìn)行消炎治療；半月后傷口愈合恢復(fù)正常活動(dòng)。

本技術(shù)方案根據(jù)鱘魚(yú)的生理特性，通過(guò)微創(chuàng)手術(shù)進(jìn)行直觀性鑒別，可至少提前一年時(shí)間對(duì)鱘魚(yú)的雌雄進(jìn)行分別，以提前處理雄魚(yú)，降低飼養(yǎng)成本；這種微創(chuàng)方法只要在后期的恢復(fù)階段進(jìn)行精心管理，對(duì)鱘魚(yú)就不會(huì)產(chǎn)生任何負(fù)作用。本方案中的親魚(yú)特指鑒別過(guò)程中的個(gè)體，整個(gè)過(guò)程均嚴(yán)格遵守輕而柔、撫而快的工藝原則，保證親魚(yú)在鑒別過(guò)程中逗留時(shí)間短且避免碰撞受到傷害。

作為優(yōu)選，所述的鑒別設(shè)施及工具準(zhǔn)備還包括空網(wǎng)箱、撈具、擔(dān)架、紙巾。

作為優(yōu)選，所述的撈具具有橢圓形撈口，且設(shè)有能容下整尾待鑒別鱘魚(yú)魚(yú)身的網(wǎng)兜，撈具上設(shè)有頂魚(yú)裝置。

作為優(yōu)選，所述的撈魚(yú)過(guò)程中，保持撈具平衡，將親魚(yú)放入麻醉缸時(shí)，在撈具接觸缸底后將親魚(yú)從撈具中倒出。

作為優(yōu)選，所述的抱魚(yú)過(guò)程，對(duì)于個(gè)體偏大的鱘魚(yú)，采取雙臂成90度的托舉方式。

作為優(yōu)選，所述的腹部取樣位置：若第四骨板太靠前，超過(guò)胸鰭與腹鰭三分之一，則在胸鰭和腹鰭三分之一處開(kāi)口。

作為優(yōu)選，所述的雌雄觀察鑒別時(shí)，若有脂肪層擋住觀察的性腺組織，則用探針工具把脂肪撥開(kāi)觀察。

本發(fā)明的有益效果是：通過(guò)腹部側(cè)開(kāi)口微創(chuàng)手術(shù)鑒別低齡鱘魚(yú)雌雄，使技術(shù)人員更清楚地觀察到鱘魚(yú)性腺發(fā)育情況，準(zhǔn)確判斷性別，提高鑒別準(zhǔn)確率；本發(fā)法將鑒別魚(yú)齡提前一年及一年以上，可以更早地售出雄性鱘魚(yú)，降低飼養(yǎng)成本；縮小了開(kāi)口手術(shù)創(chuàng)口長(zhǎng)度，創(chuàng)口無(wú)需縫合，加快傷口愈合速度，提高術(shù)后存活率；能快速、準(zhǔn)確地鑒別鱘魚(yú)性別，提高鑒別效果；操作方便、實(shí)用性強(qiáng)，滿足鱘魚(yú)增養(yǎng)殖、科研等工作中的性別鑒別的需求。

具體實(shí)施方式

下面通過(guò)實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步具體的說(shuō)明。

本實(shí)施例一種低齡鱘魚(yú)腹部側(cè)開(kāi)口雌雄鑒別技術(shù)，包括以下步驟：

一、鑒別前的準(zhǔn)備工作

1.停食：待鑒別鱘魚(yú)必須停食7天以上；整個(gè)鑒別過(guò)程選擇在18℃以下水溫中進(jìn)行。

2.準(zhǔn)備以下設(shè)施及工具：空網(wǎng)箱、撈具、麻醉缸、麻醉劑、量具、擔(dān)架、魚(yú)用手術(shù)臺(tái)、紙巾、手術(shù)刀、刀片、鑒別器、取卵器、顯微鏡、載玻片、消毒液、燒杯。其中手術(shù)刀為尖頭型手術(shù)刀，撈具具有橢圓形撈口，且設(shè)有能容下整尾待鑒別鱘魚(yú)魚(yú)身的網(wǎng)兜，撈具上設(shè)有軟質(zhì)頂魚(yú)裝置。

3.集箱：將待鑒別鱘魚(yú)進(jìn)行集合，集箱時(shí)應(yīng)注意鱘魚(yú)的單位密度，在保證鱘魚(yú)不缺氧的前提下，逐步縮小箱體，不可集箱過(guò)緊，以免擦傷魚(yú)體。

4.撈魚(yú)：撈魚(yú)過(guò)程中，用撈具一端的軟質(zhì)頂魚(yú)裝置頂住魚(yú)頭，使魚(yú)腹部落入網(wǎng)兜中，使魚(yú)體呈“u”字型然后撈起。將鱘魚(yú)從網(wǎng)箱中撈起至麻醉缸的過(guò)程中，盡量保持撈具平衡，保證鱘魚(yú)在掙扎過(guò)程中不會(huì)掉出網(wǎng)兜外而摔傷，動(dòng)作輕且快；將親魚(yú)放入麻醉缸過(guò)程中，在撈具接觸缸底時(shí)才能將親魚(yú)從撈具中倒出。

二、待鑒別鱘魚(yú)的麻醉

1.配置麻醉液：使用丁香油作麻醉劑，按照油水之比為1:10000進(jìn)行配比，即100升的水配10毫升的丁香油。

2.麻醉：鱘魚(yú)放入麻醉缸后，受麻醉液的刺激會(huì)激烈游動(dòng)1分鐘左右，之后緩慢游動(dòng)，大約2-3分鐘后進(jìn)入暈睡狀態(tài)；鱘魚(yú)進(jìn)入麻醉狀態(tài)后表現(xiàn)為身體失去平衡，呈現(xiàn)腹部朝上或背部朝上狀態(tài)。當(dāng)背部朝上時(shí)可人為翻轉(zhuǎn)，使魚(yú)體腹部朝上，若魚(yú)體腹部朝上后沒(méi)有反應(yīng)，則說(shuō)明魚(yú)體已被麻醉，反之，則需繼續(xù)麻醉；麻醉后的魚(yú)體一般可持續(xù)沉睡15分鐘，因此鑒別操作過(guò)程也應(yīng)在15分鐘內(nèi)完成。

3.抱魚(yú)：因鱘魚(yú)是軟骨魚(yú)類，已麻醉或是未麻醉的鱘魚(yú)由于掙扎會(huì)導(dǎo)致?lián)p傷甚至發(fā)生畸形。抱魚(yú)時(shí)必須遵守一個(gè)原則就是使鱘魚(yú)不受任何損傷的姿勢(shì)。常用的正確抱魚(yú)姿勢(shì)為：右手握住魚(yú)尾使尾柄朝上，魚(yú)背朝外，魚(yú)腹朝下，左手輕托魚(yú)腹，并用肘部夾住魚(yú)頭。對(duì)于個(gè)體偏大的鱘魚(yú)，可以采取雙臂成90度的托舉方式。

三、腹部側(cè)開(kāi)口

1.腹部取樣位置：取樣者腹部與魚(yú)用手術(shù)臺(tái)上的鱘魚(yú)腹部相對(duì)時(shí)，鱘魚(yú)頭部在取樣者左手邊為腹部取樣標(biāo)準(zhǔn)姿勢(shì)，在鱘魚(yú)的腹鰭往胸鰭方向第三與第四骨板之間進(jìn)行取樣，如果第四骨板太靠前，超過(guò)胸鰭與腹鰭三分之一，則在胸鰭和腹鰭三分之一處開(kāi)口，而不管是否在第三和第四骨板之間。

2.腹部開(kāi)口操作：右手握住手術(shù)刀柄并伸出食指頂住手術(shù)刀片，指尖與刀片尖端距離約為1cm作為深度定位操作，找到取樣部位后將刀片沿魚(yú)體平行的方向插入，開(kāi)一個(gè)長(zhǎng)為1-2cm的刀口。由于鱘魚(yú)肉厚，初插入時(shí)不一定穿透，右手用力插的同時(shí)要細(xì)心感覺(jué)，當(dāng)有忽然穿空的感覺(jué)時(shí)，證明已穿透魚(yú)體壁進(jìn)入體腔。

四、雌雄鑒別觀察

1.用鑷子輕輕扒開(kāi)切口觀察性腺，若脂肪表層下埋一條邊沿褶皺且為淡黃色的粗線則為雌魚(yú)的卵巢，卵巢表面質(zhì)地較軟，富有褶皺和分葉，卵粒隱約可見(jiàn)。若脂肪層出現(xiàn)兩排由許多白色包囊組成的條帶則為雄魚(yú)的精巢，精巢為白色，表面豐滿光滑，質(zhì)地較硬，呈棒狀或塊狀。此過(guò)程中，如果有脂肪層擋住觀察的性腺組織，則用探針等工具把脂肪撥開(kāi)觀察。

2.清潔與消毒：每次切口后必須將手術(shù)刀等鑒別工具放入盛有75％酒精的燒杯中涮洗，進(jìn)行清潔與消毒，避免相互感染；之后用紙巾擦干凈以避免遺留上一尾鱘魚(yú)的性腺殘留物而影響下一尾取樣檢查與判斷。

五、鑒別后的復(fù)蘇及恢復(fù)

1.放魚(yú)與醒魚(yú)：將鑒別后的雄魚(yú)、雌魚(yú)或少量不確定雌雄的鱘魚(yú)分別抱入預(yù)備好的且具有明顯標(biāo)記的空網(wǎng)箱；放魚(yú)時(shí)使魚(yú)體盡量貼近空網(wǎng)箱的水面，慢慢將魚(yú)體放入水中；密切觀察鱘魚(yú)蘇醒狀況，完全復(fù)蘇所需時(shí)間一般在3-4分鐘，對(duì)蘇醒過(guò)慢的鱘魚(yú)采取輕輕晃動(dòng)、按摩、清洗腮部等措施加快其蘇醒。

2.創(chuàng)口處理：創(chuàng)口無(wú)需縫合，直接放歸養(yǎng)殖池中，鱘魚(yú)鑒別后3天內(nèi)不予喂食。同時(shí)派專人護(hù)理，仔細(xì)觀察有無(wú)傷口發(fā)炎癥狀，如發(fā)現(xiàn)應(yīng)撈出放入玻璃鋼魚(yú)池或小網(wǎng)箱中進(jìn)行特別消炎治療，直至半月后傷口愈合良好，恢復(fù)正?；顒?dòng)這止。

上述實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的說(shuō)明，不是對(duì)本發(fā)明的限定，任何對(duì)本發(fā)明的簡(jiǎn)單變換后的結(jié)構(gòu)、方法等均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。