本發(fā)明涉及一種桑黃栽培的營養(yǎng)基質(zhì)，特別涉及利用葛渣栽培桑黃的方法。

背景技術(shù)：

桑黃為多孔菌科真菌火木層孔菌的子實(shí)體，多年生，木質(zhì)，側(cè)生無柄。呈半球形、馬蹄形或不規(guī)則形，腹面凸，(5-20)cm×(7-30)cm，厚3-15cm。幼時(shí)表面有細(xì)絨毛，后脫落，有明顯的龜裂，無皮殼，有假皮殼，有同心環(huán)棱。蓋面呈灰褐色、肝褐色至黑色，有光澤；邊緣圓鈍，龜裂少，有密生的短絨毛，干后脫落，呈肉桂色至咖啡色。菌肉硬，木質(zhì)，暗褐色，厚0.5cm左右。菌管多層，層次常不明顯，老的菌管有白色菌絲充塞；管口面銹褐色至醬色；管口圓形，每1mm間4-5個(gè)。剛毛頂端尖銳，基部膨大，(10-25)μm×(5-7)μm。孢子近球形，光滑，無色，(5-6)μm×(3-4)μm。分布于華北、西北及黑龍江、吉林、臺(tái)灣、廣東、四川、云南、西藏等地。具有活血，止血，化飲，止瀉之功效。常用于血崩，血淋，脫肛瀉血，帶下，經(jīng)閉，癥瘕積聚，癖飲，脾虛泄瀉。

研究結(jié)果表明：類黃酮具有廣泛的抑癌和防癌作用，尤其是對(duì)一些認(rèn)為與人體雌激素分泌有關(guān)的癌，如乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌等具有較好的作用。桑黃中起主要作用的是類黃酮，類黃酮是自然界藥用植物中主要活性成分之一，按其結(jié)構(gòu)分為黃酮、黃酮醇、黃烷酮、二氧黃酮醇、異黃酮等，目前已鑒定的生物類黃酮有6400多種，類黃酮具有調(diào)節(jié)血脂、消除氧自由基、抗氧化、抗腫瘤、抗病毒等生理活性，因此生物類黃酮已引起國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。國內(nèi)開始大量采用人工培育桑黃的研究。

公開號(hào)為cn101816256a的中國專利公開了一種桑黃的菌種培養(yǎng)方法，所述的菌種制備方法包括如下步驟；a、菌種培養(yǎng)基的組份重量百分比為：楊樹或柳樹或桑樹木屑75～85％、麩皮10～15％、米糠5～8％、石膏1～2％、磷酸二氫鉀0.2～0.5％、硫酸鎂0.1～0.3％，上述各成分的重量百分比之和為100％；b、將上述混合攪拌的培養(yǎng)料裝入食用菌專用塑料袋中形成菌包，每袋裝料1±0.1kg，表面壓實(shí)，中間打圓孔，套上塑料頸圈和海綿蓋；c、將菌包進(jìn)行滅菌處理；d、滅菌后菌包強(qiáng)制或自然冷卻至18℃～25℃，在無菌室或接種箱內(nèi)接入桑黃菌種，每袋接種量為15～20克；e、接種后菌包放入20℃～28℃的培養(yǎng)室內(nèi)，培養(yǎng)期間保持黑暗狀態(tài)，培養(yǎng)30～35天后使菌絲全部發(fā)滿。

公開號(hào)為cn102786333a的中國專利公開了一種桑黃袋料栽培培養(yǎng)基及采用該培養(yǎng)基栽培桑黃子實(shí)體的方法，所述的桑黃袋料栽培培養(yǎng)基由營養(yǎng)料與水混合后裝袋制成，然后在溫度110～135℃，壓力0.05～0.25mpa，滅菌30-180min，其中營養(yǎng)料與水的質(zhì)量比為1∶1.8～2.5。采用本發(fā)明的桑黃袋料培養(yǎng)基配方，可以提供桑黃子實(shí)體生長所攝取的營養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)的桑黃子實(shí)體近似野生桑黃、質(zhì)量穩(wěn)定，同時(shí)本發(fā)明的培養(yǎng)方式簡單，可用于具有藥用價(jià)值的桑黃子實(shí)體規(guī)模化栽培。

公開號(hào)為cn103340093a的中國專利公開了一種人工栽培桑黃的方法，由以下步驟實(shí)現(xiàn)：步驟一：將桑黃菌種進(jìn)行活化后，在無菌條件下取0.3cm2菌種塊接種到栽培袋內(nèi)的桑黃栽培培養(yǎng)基上，恒溫28℃避光培養(yǎng)至菌絲長滿菌袋獲得栽培種；步驟二：待栽培袋內(nèi)菌絲開始呈現(xiàn)黃色或出現(xiàn)突起的瘤狀原基時(shí)，將菌袋移至出黃場地，進(jìn)行半脫袋覆土出黃培養(yǎng)：培養(yǎng)溫度22℃～28℃，空氣相對(duì)濕度85～98％，土壤濕度45～70％，光照強(qiáng)度100～300lex，通風(fēng)換氣次數(shù)1～7次/d，每次時(shí)間5～25min。

公開號(hào)為cn103493685a的中國專利公開了一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法，步驟如下：第一步，按傳統(tǒng)的方法制作母種、原種、栽培種；第二步，培養(yǎng)桑樹苗，栽培上100畝-1000畝的桑樹林，待桑樹長到直徑達(dá)10cm粗時(shí)，用刀把1/5的桑樹皮削去，既可生長又不至于死樹；第三步，待削去的樹皮處木質(zhì)部有表面干燥時(shí)，用皮帶沖或電鉆打孔5.5-6cm深，孔與孔之間間隔16-18cm，然后把桑黃菌種接入孔中，用黃泥封口；一次接種，可摘桑黃數(shù)十年，直到桑樹老死腐爛。

公開號(hào)為cn103739339a的中國專利公開了一種用于桑黃栽培的種子培養(yǎng)基，所述種子培養(yǎng)基包括下述重量百分比的組分：黃芪殘?jiān)?～40％、氮源0.05～0.5％、余量為水；其中，所述氮源為無機(jī)氮源或有機(jī)氮源，所述無機(jī)氮源為銨鹽；有機(jī)氮源為玉米漿、酵母粉、蛋白胨或麩皮中的一種或二種以上的任意組合。

公開號(hào)為cn103804054a的中國專利公開了一種桑黃培養(yǎng)基質(zhì)優(yōu)化及短段木栽培方法，桑黃母種培養(yǎng)基：葡萄糖20g，大豆蛋白胨2g，瓊脂18g，磷酸二氫鉀0.46g，磷酸氫二鉀1g，硫酸鎂0.5g，水1000ml。桑黃短段木栽培方法，步驟如下：(1)采用子實(shí)體組織分離法分離桑黃菌母種。(2)桑黃原種培養(yǎng)。(3)桑黃栽培種培養(yǎng)。(4)短段木栽培材料的制備。

公開號(hào)為cn105027974a的中國專利公開了一種桑黃規(guī)模化人工培養(yǎng)栽培方法，包括以下步驟：(1)獲得原種，并將原種接種到具有桑黃規(guī)?；斯づ囵B(yǎng)基的栽培袋內(nèi)培養(yǎng)；(2)當(dāng)栽培袋內(nèi)的桑黃菌絲長滿栽培袋且菌絲呈金黃色或者栽培袋內(nèi)開始出現(xiàn)突起的瘤狀桑黃子實(shí)體原基時(shí)，將長滿菌絲的栽培袋轉(zhuǎn)移至出菇棚進(jìn)行出菇培養(yǎng)；所述出菇棚的培養(yǎng)環(huán)境條件為：空氣相對(duì)濕度85～98％，溫度22～28℃。

公開號(hào)為cn105084988a的中國專利公開了一種袋料培養(yǎng)基以及其規(guī)?；耘嗌｜S子實(shí)體的方法，袋料培養(yǎng)基包括柞樹段木，設(shè)置在柞樹段木兩端的培養(yǎng)基，以及包裹該柞樹段木和培養(yǎng)基的聚丙烯通袋；所述培養(yǎng)基包括：70～85份的桑枝木屑，5～15份的麥麩，0.5～1.5份的葡萄糖，1～3份的生石灰，1～2份的過磷酸鈣；所述培養(yǎng)基的含水率為60～65％；所述柞樹段木兩端培養(yǎng)基的添加量均為柞樹段木體積的5～10％。

葛根是豆科植物野葛和粉葛的塊根，富含淀粉和大量異黃酮類物質(zhì)，主要用作中藥、提取異黃酮類活性物質(zhì)、食用或者用于制取葛粉。在中國南方有大面積的粉葛種植，制取葛粉后的葛渣，通常作為牛、魚飼料或者丟棄，葛渣再利用的效率低下甚至造成環(huán)境的污染。僅江西省橫峰縣一地，年產(chǎn)葛渣近30萬噸。如何合理利用此類廢棄物成為當(dāng)務(wù)之急。

國內(nèi)科研院所也在進(jìn)行葛渣制備膳食纖維或者制作功能食品的嘗試，但是此類研究多數(shù)停留在試驗(yàn)階段，沒有得到生產(chǎn)應(yīng)用。葛渣營養(yǎng)成分豐富，含有大量粗蛋白、粗纖維及可溶性碳水化合物、黃酮類物質(zhì)，是優(yōu)良的藥用菌栽培基質(zhì)。但是由于其纖維較細(xì)，吸水性很強(qiáng)，單獨(dú)作為藥用菌培養(yǎng)基質(zhì)仍存在透氣性不好等問題。已有利用葛渣栽培雞腿菇、桑黃、香菇、金針菇等的初步嘗試，然而目前利用葛渣為主料栽培桑黃的相關(guān)技術(shù)沒有報(bào)道過。

開發(fā)葛渣代料栽培桑黃技術(shù)，可降低栽培成本、實(shí)現(xiàn)葛渣廢棄物的循環(huán)利用，促進(jìn)農(nóng)民增收。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是選育一種適合于葛渣基質(zhì)的桑黃菌株，并開發(fā)配套的以葛渣為主料的母種制備及大規(guī)模栽培的基質(zhì)配方和方法，實(shí)現(xiàn)葛渣廢棄物的循環(huán)利用，同時(shí)又有效提高桑黃中類黃酮的含量。

本發(fā)明主要目的是提供利用葛渣栽培桑黃的方法，具體包括步驟如下：

(1)將葛渣干燥后粉碎過20目篩，加入80～90％乙醇溶液，提取三次，每次1.5小時(shí)，其中乙醇的體積用量l/葛渣重量kg為1:3～5，過濾得濾渣和葛提取液，并將3次葛提取液濃縮回收乙醇至無醇味得葛醇提物。

(2)將黃姜進(jìn)行洗凈、干燥后粉碎過20目篩，加入80～90％乙醇溶液，提取三次，每次1.5小時(shí)，其中乙醇的體積用量l/黃姜重量kg為1:3～6，過濾去除提取液得黃姜廢渣。

(3)將白蘞根莖進(jìn)行洗凈、干燥后粉碎過20目篩，加入80～90％乙醇溶液，提取三次，每次1.5小時(shí)，其中乙醇的體積用量l/白蘞根莖重量kg為1:3～5，過濾得白蘞濾渣和白蘞提取液，并將3次白蘞提取液濃縮回收乙醇至無醇味得白蘞醇提物,與葛醇提物等體積混合得醇提物備用。

(4)將濾渣50～100％，白蘞濾渣40～60％，黃姜廢渣15～35％，蔗糖0.3～0.8％，尿素0.5～1.5％，石膏0.5～1.5％，充分拌勻，培養(yǎng)基含水量掌握在65％～75％進(jìn)行拌料裝袋，每袋裝培養(yǎng)基200～1000克，馬上進(jìn)行滅菌，采用121℃高壓蒸汽滅菌30～50min，待袋裝培養(yǎng)基冷卻、接種，將基質(zhì)降溫冷卻至25℃時(shí)進(jìn)行桑黃接種，每袋接種量體積l為袋裝培養(yǎng)料質(zhì)量kg的5％～8％。

(5)在溫度為25℃～30℃、空氣濕度為50％～65％條件下，放入預(yù)先消毒的發(fā)菌室，避光培養(yǎng)菌絲20天～30天至滿袋，打開菌袋，立即噴灑醇提物，在溫度15℃～25℃、濕度70％～85％、光照強(qiáng)度100～400lux條件下培養(yǎng)8～15天，每天通風(fēng)1次。

(6)采收第一次桑黃后，去除栽培袋上殘留的桑黃菌根，再將袋裝基質(zhì)放在25℃～30℃、空氣濕度50％～65％條件下培養(yǎng)菌絲5～10天至滿袋。

(7)再次噴灑醇提物，在15℃～25℃、空氣濕度70％～85％、光照強(qiáng)度100～400lux條件下培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20～25天，每天通風(fēng)1次，采收第二次桑黃子實(shí)體。

所述步驟(3)中所述桑黃接種方式為直接將桑黃種子液直接噴灑到處理好的基質(zhì)上即可，菇種子液按常規(guī)馬鈴薯液體培養(yǎng)基進(jìn)行接種桑黃培養(yǎng)3～5天。

所述步驟(5)中所述噴灑醇提物的量為每袋噴灑70～90ml。

所述步驟(7)中所述噴灑醇提物的量為每袋噴灑35～45ml。

所述過濾指采用三層紗布過濾二次、陶瓷膜過濾一次，其中0.2μm孔徑大小的陶瓷膜過濾。

技術(shù)效果

1、充分利用了現(xiàn)有黃姜廢棄物中的淀粉和纖維素，同時(shí)使廢棄物經(jīng)過桑黃發(fā)酵后，其基質(zhì)回到土壤中作為有機(jī)肥，能快速得到利用，提高了黃姜廢棄物利用率。

2、充分利用了白蘞功能性成分，有利于增強(qiáng)桑黃的活血保健功能，再加上投入少、成本低便于規(guī)模化生產(chǎn)。

3、充分利用了葛渣中大量的黃酮類物質(zhì)，有效提高了桑黃藥材中功能性成分的含量，便于患病人群藥用，也防止因人工栽培桑黃造成品質(zhì)下降的問題。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但是它并不限于這些實(shí)施例的任一個(gè)或類似實(shí)例。

實(shí)施例1

將葛渣干燥后粉碎過20目篩，取150kg加入85％乙醇溶液450l，提取三次，每次1.5小時(shí)，過濾得140kg濾渣和葛提取液400l，并將3次葛提取液濃縮回收乙醇至無醇味得14l葛醇提物。將黃姜進(jìn)行洗凈、干燥后粉碎過20目篩，取100kg加入90％乙醇溶液400l，提取三次，每次1.5小時(shí)，過濾去除提取液得黃姜濾渣95kg。將白蘞根莖進(jìn)行洗凈、干燥后粉碎過20目篩，取150kg加入85％乙醇溶液450l，提取三次，每次1.5小時(shí)，過濾得140kg白蘞濾渣和白蘞提取液400l，并將3次白蘞提取液濃縮回收乙醇至無醇味得14l白蘞醇提物備用，與14l葛醇提物混合得醇提物備用。

取白蘞濾渣180kg、葛渣100kg、黃姜廢渣40kg、蔗糖1.4kg、尿素1.8kg、石膏2kg，混合后充分拌勻，培養(yǎng)基含水量掌握在65％～75％進(jìn)行拌料裝袋，每袋裝培養(yǎng)基500～800克，裝900袋，馬上進(jìn)行滅菌，采用121℃高壓蒸汽滅菌35min，待袋裝培養(yǎng)基冷卻至25℃。

桑黃種子液采用馬鈴薯液體培養(yǎng)基(馬鈴薯為200克葡萄糖為20克水為1000ml)接種20℃～25℃振蕩培養(yǎng)3～5天即可進(jìn)行接種，每袋接種35ml桑黃種子液。在溫度為25℃、空氣濕度為50％～65％條件下，放入預(yù)先消毒的發(fā)菌室，避光培養(yǎng)菌絲28天至滿袋，打開菌袋，立即噴灑醇提物，在溫度23℃、濕度70％～85％、光照強(qiáng)度150lux條件下培養(yǎng)10天，每天通風(fēng)1次。采收第一次桑黃后，去除栽培袋上殘留的桑黃菌根，再將袋裝基質(zhì)放在25℃～30℃、空氣濕度50％～65％條件下培養(yǎng)菌絲5～10天至滿袋。再次噴灑醇提物，在15℃～25℃、空氣濕度70％～85％、光照強(qiáng)度150lux條件下培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20～25天，每天通風(fēng)1次，采收第二次桑黃子實(shí)體。

實(shí)施例2

將葛渣干燥后粉碎過20目篩，取200kg加入85％乙醇溶液650l，提取三次，每次1.5小時(shí)，過濾得190kg葛渣和葛提取液600l，并將3次葛提取液濃縮回收乙醇至無醇味得18l葛醇提物。將黃姜進(jìn)行洗凈、干燥后粉碎過20目篩，取200kg加入90％乙醇溶液700l，提取三次，每次1.5小時(shí)，過濾去除提取液得黃姜濾渣185kg。將白蘞根莖進(jìn)行洗凈、干燥后粉碎過20目篩，取200kg加入85％乙醇溶液650l，提取三次，每次1.5小時(shí)，過濾得190kg白蘞濾渣和白蘞提取液600l，并將3次白蘞提取液濃縮回收乙醇至無醇味得18l白蘞醇提物備用，與18l葛醇提物混合得醇提物備用。

取240kg葛渣、150kg白蘞濾渣、60kg黃姜廢渣、蔗糖1.8kg、尿素2.8kg、石膏3kg，混合后充分拌拌勻，培養(yǎng)基含水量掌握在65％～75％進(jìn)行拌料裝袋，每袋裝培養(yǎng)基600～800克，裝800袋，馬上進(jìn)行滅菌，采用121℃高壓蒸汽滅菌40min，待袋裝培養(yǎng)基冷卻至25℃。

桑黃種子液采用馬鈴薯液體培養(yǎng)基(馬鈴薯為200克葡萄糖為20克水為1000ml)接種20℃～25℃振蕩培養(yǎng)3～5天即可進(jìn)行接種，每袋接種40ml桑黃種子液。在溫度為27℃、空氣濕度為50％～65％條件下，放入預(yù)先消毒的發(fā)菌室，避光培養(yǎng)菌絲20天～30天至滿袋，打開菌袋，立即噴灑醇提物，在溫度15℃～25℃、濕度70％～85％、光照強(qiáng)度200lux條件下培養(yǎng)8～15天，每天通風(fēng)1次。

采收第一次桑黃后，去除栽培袋上殘留的桑黃菌根，再將袋裝基質(zhì)放在25℃～30℃、空氣濕度50％～65％條件下培養(yǎng)菌絲5～10天至滿袋。再次噴灑醇提物，在15℃～25℃、空氣濕度70％～85％、光照強(qiáng)度200lux條件下培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20～25天，每天通風(fēng)1次，采收第二次桑黃子實(shí)體。