本發(fā)明涉及苗木繁殖，具體涉及一種‘粉絲帶’杜鵑種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法。

背景技術(shù)：

1、杜鵑(rhododendron?simsii?planch.)是杜鵑花科(ericaeae)杜鵑花屬(rhododendron?l.)的常綠或落葉灌木，別名映山紅、滿山紅、照山紅、山石榴、山躑躅等，是世界三大天然名花之一，也是中國傳統(tǒng)十大名花之一。

2、安酷杜鵑(encore?azalea)系列是20世紀(jì)80年代美國培育的一個(gè)品種類群，市場銷售的有30多個(gè)品種，是由中國臺灣的金毛杜鵑(r.oldhamii)與其他抗逆性較好的杜鵑品種雜交而來。該品種群的優(yōu)點(diǎn)為多季開花，主要在春季和秋季，有的品種開花甚至延續(xù)到12月。安酷杜鵑耐寒、長青、不需頻繁修剪、易維護(hù)，是優(yōu)良的杜鵑栽培品種，是最佳的栽種選擇。目前，推廣較好的品種有‘粉絲帶’(r.hybrid?pink?ribbons)，是很好的園林綠化品種，被譽(yù)為21世紀(jì)銷售最好的杜鵑品種群；但是現(xiàn)有技術(shù)中鮮少有“粉絲帶”杜鵑相關(guān)繁殖技術(shù)報(bào)道。

3、中國專利文獻(xiàn)cn117356396a公開了一種用于安酷杜鵑的栽培基質(zhì)及制備方法，本發(fā)明提供了一種用于安酷杜鵑的栽培基質(zhì)，其制備原料，按體積百分比計(jì)，為5～80％蚯蚓糞、5～80％草炭、10～20％多孔性材料。本發(fā)明中的無土栽培基質(zhì)，原料環(huán)保，成分簡單，進(jìn)行了資源再利用，且本發(fā)明中的無土栽培基質(zhì)的ph值、有機(jī)質(zhì)含量、ec值、通氣孔隙度等理化性質(zhì)接近杜鵑根系生長理化性質(zhì)，能提高杜鵑的株高、地徑和成活率；該發(fā)明僅涉及無土栽培基質(zhì)的優(yōu)化，并未涉及整個(gè)組織培養(yǎng)繁殖過程。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的主要目的是提出‘粉絲帶’杜鵑的組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括外植體消毒、誘導(dǎo)培養(yǎng)、腋芽繼代增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗移栽，通過對各個(gè)階段培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方進(jìn)行篩選，篩選出了最佳培養(yǎng)基配方，顯著提高了‘粉絲帶’杜鵑的幼苗成活率，生根率可達(dá)到74％以上，可使成活率達(dá)到90％，有利于‘粉絲帶’杜鵑的繁殖。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提出一種‘粉絲帶’杜鵑種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括以下步驟：

3、s1、外植體消毒：選取新鮮的“‘粉絲帶’”杜鵑帶腋芽莖段為外植體，將外植體洗凈后進(jìn)行消毒；

4、s2、誘導(dǎo)培養(yǎng)

5、將消毒干凈的帶腋芽莖段接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中；在溫度為23-27℃下光照10-12h/d，光照強(qiáng)度為1000-2000lx；培養(yǎng)18-20d后，統(tǒng)計(jì)腋芽數(shù)；

6、s3、腋芽繼代增殖培養(yǎng)

7、將誘導(dǎo)出的無菌腋芽接入到增殖培養(yǎng)基中，在溫度為23-27℃下光照10-12h/d，光照強(qiáng)度為1000-2000lx；培養(yǎng)45-55d后，莖段長出叢生芽；

8、s4、壯苗培養(yǎng)

9、將增殖培養(yǎng)出的腋芽接入到壯苗培養(yǎng)基中，在溫度為23-27℃下光照10-12h/d，光照強(qiáng)度為1000-2000lx，培養(yǎng)35-45d后，得到葉片寬大，生長健壯的組培苗；

10、s5、生根培養(yǎng)

11、將生長健壯的組培苗轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，在溫度為23-27℃下光照10-12h/d，光照強(qiáng)度為1000-2000lx，培養(yǎng)50-70d后，得到具有根系的生根苗；

12、s6、煉苗移栽

13、移栽前，先在室內(nèi)煉苗5-6d，然后輕輕取出苗，用自來水洗凈根上的培養(yǎng)基，然后放在清水中保持濕潤，將根部洗凈的組培苗浸泡在0.1-0.2％多菌靈溶液中3-5min，然后移栽到基質(zhì)中。

14、優(yōu)選的，所述s1步驟具體如下：選取新鮮的‘粉絲帶’杜鵑帶腋芽莖段為外植體，將葉片從葉柄部位剪掉，修剪為長2.0-3.0cm的帶芽點(diǎn)的小段，在洗衣粉溶液中浸泡1-2h后置于流水下沖洗20-30min，先用75％酒精浸泡20-30s，無菌水沖洗2-3遍；再用1-3wt％次氯酸鈉水溶液進(jìn)行消毒，消毒時(shí)間為6-10min；然后用1-2wt％氯化鈣溶液漂洗2-3次，最后用無菌水沖洗3-5遍。

15、進(jìn)一步優(yōu)選的，所述s1步驟中次氯酸鈉水溶液濃度為2％，消毒時(shí)間為8min。

16、優(yōu)選的，所述s2中誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為wpm培養(yǎng)基+0.5～3.0mg·l-1zt、0.1～1.0mg·l-1naa；其中，zt為玉米素，naa為萘乙酸。

17、優(yōu)選的，所述s3步驟中增殖培養(yǎng)基配方為wpm培養(yǎng)基+1.0～3.0mg·l-1zt+0.1～0.5mg·l-1naa。

18、優(yōu)選的，所述s4步驟中壯苗培養(yǎng)基配方為wpm培養(yǎng)基+0.1～0.5mg·l-1zt+0.1～0.5mg·l-1naa。

19、優(yōu)選的，所述s5步驟中生根培養(yǎng)基配方為wpm培養(yǎng)基+1～3mg·l-1iba+0.1～1.0g·l-1ac；其中，iba為吲哚丁酸，ac為活性炭。

20、優(yōu)選的，所述s5步驟中組培苗的長度為1.5-2.5cm。

21、優(yōu)選的，所述s6步驟中基質(zhì)為泥炭土、珍珠巖、河沙中的至少一種。

22、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：

23、(1)本發(fā)明建立了通過組織培養(yǎng)技術(shù)對‘粉絲帶’杜鵑進(jìn)行繁殖的方法，并對方法中涉及的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基、壯苗培養(yǎng)基進(jìn)行了選擇優(yōu)化，具有芽誘導(dǎo)率高、增殖系數(shù)高、生根率高、植株抽高快、葉形葉色正常、根系發(fā)達(dá)等優(yōu)點(diǎn)，能夠滿足市場對‘粉絲帶’杜鵑紅的需要，成功解決了外植體難滅菌、易褐化等技術(shù)問題，不受時(shí)間和季節(jié)環(huán)境的變化，大大提高繁殖速率，提高‘粉絲帶’杜鵑的觀賞價(jià)值和商業(yè)價(jià)值，對保護(hù)優(yōu)異種質(zhì)資源、挖掘創(chuàng)造新種質(zhì)有著重大意義；

24、(2)本發(fā)明通過對‘粉絲帶’杜鵑進(jìn)行消毒、誘導(dǎo)、增殖和生根培養(yǎng)等一系列工序，能夠快速的獲得存活率高的‘粉絲帶’杜鵑，在消毒過程中，選擇2％的次氯酸鈉作為消毒劑，更有利于防止褐化；

25、(3)本發(fā)明以wpm為基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)，向其中添加了合適濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑zt和naa，兩者協(xié)同作用使腋芽增殖速度快，還能縮短增殖時(shí)間，在生根誘導(dǎo)過程中，iba和ac的協(xié)同作用促使瓶苗生根較多，生長迅速且繁茂；

26、(4)本發(fā)明的‘粉絲帶’杜鵑種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法可使萌發(fā)率到達(dá)97％，生根率可達(dá)到70％以上，成活率可達(dá)90％，還提高了叢生苗的增殖率、壯苗率及成活率，為‘粉絲帶’杜鵑大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供理論依據(jù)和配套的技術(shù)手段，建立高效的栽培模式和管理技術(shù)，保留優(yōu)良性狀的同時(shí)，降低了育苗成本。

技術(shù)特征：

1.一種‘粉絲帶’杜鵑種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速繁殖方法，其特征在于，所述s1步驟具體如下：選取新鮮的‘粉絲帶’杜鵑帶腋芽莖段為外植體，將葉片從葉柄部位剪掉，修剪為長2.0-3.0cm的帶芽點(diǎn)的小段，在洗衣粉溶液中浸泡1-2h后置于流水下沖洗20-30min，先用75％酒精浸泡20-30s，無菌水沖洗2-3遍；再用1-3wt％次氯酸鈉水溶液進(jìn)行消毒，消毒時(shí)間為6-10min；然后用1-2wt％氯化鈣溶液漂洗2-3次，最后用無菌水沖洗3-5遍。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的快速繁殖方法，其特征在于：所述s1步驟中次氯酸鈉水溶液濃度為2％，消毒時(shí)間為8min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速繁殖方法，其特征在于：所述s2中誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為wpm培養(yǎng)基+0.5～3.0mg·l-1zt+0.1～1.0mg·l-1naa。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速繁殖方法，其特征在于：所述s3步驟中增殖培養(yǎng)基配方為wpm培養(yǎng)基+1.0～3.0mg·l-1zt+0.1～0.5mg·l-1naa。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速繁殖方法，其特征在于：所述s4步驟中壯苗培養(yǎng)基配方為wpm培養(yǎng)基+0.1～0.5mg·l-1zt+0.1～0.5mg·l-1naa。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速繁殖方法，其特征在于：所述s5步驟中生根培養(yǎng)基配方為wpm培養(yǎng)基+1～3mg·l-1iba+0.1～1.0g·l-1ac。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種‘粉絲帶’杜鵑種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法，屬于苗木繁殖技術(shù)領(lǐng)域。所述快速繁殖方法包括外植體消毒、誘導(dǎo)培養(yǎng)、腋芽繼代增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗移栽等步驟。本發(fā)明的‘粉絲帶’杜鵑種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法可使萌發(fā)率到達(dá)97％以上，生根率可達(dá)到74％以上，成活率可達(dá)90％，還提高了叢生苗的增殖率、壯苗率及成活率，為‘粉絲帶’杜鵑大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供理論依據(jù)和配套的技術(shù)手段，建立高效的栽培模式和管理技術(shù)，保留優(yōu)良性狀的同時(shí)，降低了育苗成本。

技術(shù)研發(fā)人員：吳林世,廖菊陽,劉艷,李巧云,王玲,陳嬋,易心鈺,黃雅奇,周嵐,鄧靜
受保護(hù)的技術(shù)使用者：湖南省植物園
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9