本發(fā)明涉及水產(chǎn)遺傳育種，更具體的說是涉及一種利用靜水壓法誘導(dǎo)馬蘇大麻哈魚三倍體的方法。
背景技術(shù)：
1、馬蘇大麻哈魚(oncorhynchus?masou)，屬鮭科(salmonidas)、大麻哈魚屬，是僅分布在北太平洋亞洲一側(cè)水域的溯河洄游性魚類，在海洋中生活4年左右，洄游到出生河流產(chǎn)卵繁殖。
2、鮭科魚類性成熟繁殖后有較高的死亡率，特別是洄游性的大麻哈魚屬的種類繁殖后親魚即死亡，稱為“成熟死亡”，一生只繁殖一次，這是無法改變的遺傳特性。陸封種群馬蘇大麻哈魚雖然不降海洄游，但依然保持了“成熟死亡”的特性。基于魚類遺傳育種理論和實(shí)踐，利用人工誘導(dǎo)技術(shù)，使體細(xì)胞中染色體組由普通的二套變成三套，減數(shù)分裂不能形成正常配子，致使性腺不能發(fā)育成熟，從而解決了“成熟死亡”的問題，延長了生命周期，而且避免了普通二倍體魚性腺發(fā)育階段和產(chǎn)卵季節(jié)生長停滯、魚肉品質(zhì)下降等問題。
3、魚類三倍體育種主要有生物方法、物理方法和化學(xué)方法。生產(chǎn)中多采用物理方法，原理是抑制受精卵第二極體排出，使受精卵中保留兩套雌核染色體和一套雄核染色體，從而產(chǎn)生三倍體，主要包括溫度休克法和靜水壓法。
4、溫度休克法沒有統(tǒng)一的專用設(shè)備，受人為操作影響較大，具有效果不穩(wěn)定等局限性。
5、靜水壓法誘導(dǎo)過程由專用設(shè)備完成，程序易于標(biāo)準(zhǔn)化，對(duì)胚胎的損傷比溫度休克法小，具有可操作性強(qiáng)，利于規(guī)模化生產(chǎn)等先進(jìn)性。靜水壓法是目前國際上和行業(yè)內(nèi)普遍認(rèn)可的最為先進(jìn)的鮭鱒魚類三倍體育種方法。
6、國內(nèi)外對(duì)鮭鱒魚三倍體育種技術(shù)研究較多，虹鱒、大西洋鮭熱休克和靜水壓方法技術(shù)很成功。對(duì)馬蘇大麻哈魚三倍體的研究，國內(nèi)僅見熱休克誘導(dǎo)方法，但效果不是很理想，尚未見到靜水壓法誘導(dǎo)馬蘇大麻哈魚的報(bào)道。
7、靜水壓法的技術(shù)核心是要設(shè)定準(zhǔn)確的誘導(dǎo)參數(shù)，即處理的起始時(shí)間、持續(xù)時(shí)間和壓力。誘導(dǎo)參數(shù)的確定，需要前期大量的實(shí)驗(yàn)研究，對(duì)壓力機(jī)性能也有較高的要求。處理起始時(shí)間尤為重要，將誘導(dǎo)處理起始時(shí)間準(zhǔn)確定位在第二極體排出之前是獲得良好誘導(dǎo)效果的關(guān)鍵。第二極體排出時(shí)間非常短暫，而且受精卵的發(fā)育不完全同步，這就使得處理起始時(shí)間的確定有一定難度。研究普遍認(rèn)為，鮭科魚類受精后15～40min是第二極體排放并進(jìn)行人工干預(yù)的有效時(shí)間。這個(gè)時(shí)間范圍跨度很大，囊括了大多數(shù)種類的要求。不僅不同種類之間要求差異很大，即便同一種類，零點(diǎn)幾分鐘的時(shí)間差都會(huì)帶來不同的結(jié)果。靜水壓法誘導(dǎo)三倍體魚，還有持續(xù)時(shí)間和壓力兩個(gè)參數(shù)。持續(xù)時(shí)間不夠和壓力不足，會(huì)導(dǎo)致三倍體率低。持續(xù)時(shí)間過長和壓力過大，不但不能提高三倍體誘導(dǎo)率，還會(huì)使染色體斷裂或丟失，形成非整倍體，胚胎受到損害影響孵化率。只有三個(gè)參數(shù)的最佳組合，才能獲得理想的結(jié)果，因此，不能簡單套用其它種類的誘導(dǎo)方案。通常以三倍體率占40％，孵化率占60％，綜合評(píng)分最高為最佳方案。
8、因此，能否具體提供一種利用靜水壓法誘導(dǎo)馬蘇大麻哈魚三倍體的方法，是本領(lǐng)域技術(shù)人員亟需解決的問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、有鑒于此，本發(fā)明提供了一種利用靜水壓法誘導(dǎo)馬蘇大麻哈魚三倍體的方法。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
3、一種利用靜水壓法誘導(dǎo)馬蘇大麻哈魚三倍體的方法，包括以下步驟：
4、(1)親魚準(zhǔn)備；
5、(2)采卵受精，精卵混合后開始計(jì)時(shí)，且控制水溫6～8℃；
6、(3)加壓處理：待計(jì)時(shí)至受精后15～20min，開始加壓，壓力選擇60～65kg/cm2，持續(xù)加壓時(shí)間5～6min，得加壓處理后的受精卵；
7、(4)受精卵孵化；
8、(5)稚魚培育。
9、優(yōu)選的：步驟(1)親魚準(zhǔn)備包括：
10、11)控制親魚生長水溫14～17℃，ph7.6～8.5，溶解氧6～10mg/l，再進(jìn)行人工選育；
11、12)在親魚培育環(huán)節(jié)，1～2個(gè)月進(jìn)行一次挑選，大小分開培育，投喂鮭鱒魚專用配合飼料：粗蛋白≥45.0％，粗脂肪≥10.0％，粗纖維≤5.0％，粗灰分≤14.0％，水分≤10.0％，投飼率1.0％，日投喂2次；
12、13)產(chǎn)卵期前兩周投喂量減半，產(chǎn)卵前5d停止投餌；
13、14)滿1齡后要經(jīng)過2個(gè)月水溫0～4℃的冬眠期；性腺發(fā)育成熟前，出現(xiàn)副性征時(shí)，進(jìn)行親魚挑選并雌雄配比，雌雄配比1：1，淘汰個(gè)體小于250g的雄魚；2齡時(shí)選擇同批次中個(gè)體規(guī)格大于500g，腹部圓潤的雌魚作為親魚，性成熟系數(shù)20％以上。
14、優(yōu)選的：步驟(2)采卵受精包括：
15、21)控制水溫8～10℃；
16、22)雌魚采用擠卵或剖腹取卵法，將卵置于生理鹽水中；采集雄魚精液用擠壓法，避免沾入水滴；
17、23)精：卵比為1：20～25，精卵混合并輕輕攪拌10～20s，加入清水，要沒過魚卵，再攪拌10～20s，加入清水3～5次洗卵，加入清水靜置；精卵混合后開始計(jì)時(shí)，且控制水溫6～8℃。
18、優(yōu)選的：步驟(4)受精卵孵化包括：
19、41)孵化用過濾水，溶解氧≥6mg/l，水溫5～8℃；
20、42)開始孵化至發(fā)眼前禁震動(dòng)行為；
21、43)控制水流量，消毒；
22、44)發(fā)眼后統(tǒng)計(jì)發(fā)眼率，累計(jì)積溫達(dá)350～390℃.d孵化出苗。
23、優(yōu)選的：步驟(5)稚魚培育包括：
24、仔稚魚流水培育，待仔稚魚上浮超過80％后，投喂開口料，日投餌率8～10％，每3h投喂1次。
25、本發(fā)明還提供了任一上述方法在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用。
26、經(jīng)由上述的技術(shù)方案可知，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明公開提供了一種利用靜水壓法誘導(dǎo)馬蘇大麻哈魚三倍體的方法，取得的技術(shù)效果為三倍體生長速度較二倍體明顯提高，魚肉品質(zhì)得到提升，彌補(bǔ)了國產(chǎn)鮭鱒魚養(yǎng)殖品種的不足，對(duì)于推進(jìn)國產(chǎn)鮭鱒魚產(chǎn)業(yè)化發(fā)展具有重要意義，具有廣闊的市場(chǎng)應(yīng)用前景。
1.一種利用靜水壓法誘導(dǎo)馬蘇大麻哈魚三倍體的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)所述親魚準(zhǔn)備包括：
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(2)所述采卵受精包括：
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟(4)所述受精卵孵化包括：
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(5)所述稚魚培育包括：
6.權(quán)利要求1～5任一所述方法在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用。