專利名稱:一種茯苓的培育方法
一種茯苓的培育方法技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物培育技術(shù)領(lǐng)域：
，具體來說涉及一種茯苓的培育方法。
技術(shù)背景茯苓為常用中藥，為《中華人民共和國藥典》2005年版一部收載品種，史 載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品。本品為多孔菌科真菌茯苓cocoy (Schw. ) Wolf的干燥菌核。性味甘、淡、平，歸心、肺、脾、腎經(jīng)。具有 利水滲濕，健脾寧心。用于水腫尿少，痰飲眩悸，脾虛食少，便溏泄瀉，心 神不安，驚悸失眠，茯苓在中醫(yī)臨床及人民生活中有著廣泛的使用價值。近年來，茯苓的市場需求日益增大，目前傳統(tǒng)栽培主要通過菌絲引種、 老段木引種、鮮茯蒼引種的方式進(jìn)行生產(chǎn)，生產(chǎn)過程中需要大量欲伐樹木， 并出現(xiàn)"空窖"、"瘟窖"、"雞窩苓窖，，以及茯苓產(chǎn)品夾皮、夾泥、夾沙等不良現(xiàn) 象。中國專利公開號CN1732761A，于2006年2月15日公開了 "一種培育茯 茶的方法"雖然在一定程度上解決了上述問題，但其卻存在產(chǎn)量不高，生產(chǎn) 周期長等問題。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述缺點而提供的一種具有菌絲生產(chǎn)周期短，茯 茶質(zhì)量優(yōu)良穩(wěn)定，產(chǎn)量高的茯苓的培育方法。本發(fā)明的技術(shù)路線在于培育茯茶的方法采用菌種繁殖法。選取個大皮薄、 皮色紫紅、形態(tài)飽滿、龜裂多、質(zhì)地緊密、肉色白而細(xì)潤、乳汁多、生長期 7~8個月、發(fā)育健壯、生命力強的幼苓作菌種，將選好的苓種在無菌條件下分 離菌核并在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，經(jīng)過進(jìn)一步分離提純得到優(yōu)良純純菌種，然后分 別在不同配比的培養(yǎng)基上進(jìn)行接種培養(yǎng)，分別得到一級菌種(母種)、二級菌 種(原種)、三級菌種(栽培種)等，其具體步驟如下 (1 )純菌種的獲得選取個大皮薄、皮色紫紅、形態(tài)飽滿、龜裂多、質(zhì)地緊密、肉色白而細(xì)潤、 乳汁多、生長期7個月左右、發(fā)育健壯、生命力強的幼茶作菌種，先將茯蒼表 皮削凈，用70%的乙醇進(jìn)行表面消毒，再用無菌水沖洗，然后用消毒布或濾紙 吸干水分，在無菌接種箱內(nèi)，點燃酒精燈，在火焰旁用無菌刀切開，用刀將斷 面挖成弧形，連挖兩次，在第二次挖處挑取麥粒大小塊接于純菌種培養(yǎng)基上， 置于溫室，在30。C溫度下培養(yǎng)至長滿菌絲，篩選潔白無雜菌感染，呈絨毛狀濃，分泌白色乳珠菌絲，即為純菌種；(2) —級菌種(母種)的培養(yǎng)在無菌接種箱內(nèi)，按常規(guī)接種方法將純菌種接入預(yù)先配制好的一級菌種培 養(yǎng)基中，在32。C溫度下培養(yǎng)，1天菌絲即可長滿斜面，即得一級母種； 一支試 管純菌種可接6 8支一級菌種(母種)。為擴(kuò)大母種的數(shù)量，可以將獲得的母種 再轉(zhuǎn)接到轉(zhuǎn)接母種培養(yǎng)基上， 一支一級母種試管可轉(zhuǎn)接4 6支；(3) 二級菌種(原種)培養(yǎng) 按常規(guī)接種方法將一級菌種接入二級菌種培養(yǎng)基上，在25。C溫度下培養(yǎng)，經(jīng)過25天獲得二級菌種； 一支母種可接6 8瓶二級菌種(原種)；為擴(kuò)大原種 的數(shù)量，可以將獲得的原種再轉(zhuǎn)*接到轉(zhuǎn)接原種培養(yǎng)基上；(4) 三級菌種(栽培種)培養(yǎng)按常規(guī)接種方法將二級菌種接入配制好的三級菌種塑料袋培養(yǎng)基上，前15 天溫度控制在26。C，后期溫度控制在23。C，培養(yǎng)至菌絲長滿袋時，即得三級菌 種； 一般一瓶原種可接20-50瓶三級菌種(栽培種)。上述的茯蒼的培育方法，其中純菌種培養(yǎng)基、 一級菌種培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)接母 種培養(yǎng)基為馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基，其配方為馬鈴薯84%，葡萄糖9%，瓊脂 5%,尿素0.3%,過磷酸4丐1.1%,維生素B0.5%, pH6.0 7.0;配制方法將馬 鈴薯去皮、切成lcm見方小塊，立即》文入盛7K鍋中，加火煮沸30分鐘，用紗布 過濾、濾液定容。先將馬鈴薯濾液與葡萄糖、尿素等攪勻，調(diào)節(jié)pH值6 7，再 加入瓊脂，邊加熱邊攪拌慢慢溶解瓊脂，使瓊脂均勻混合后，用漏斗裝入玻璃 試管中，置于常規(guī)高壓鍋蒸汽滅菌。滅菌完畢，撤火將壓力降到0時，開啟高 壓鍋，降溫到手可觸摸時，將試管從高壓鍋取出，傾置斜面，以減少試管壁上 的蒸汽，將管口一頭抬高墊穩(wěn)，傾斜不超過30度，以液體培養(yǎng)基從管底斜至管 高三分之二處為宜，防止?jié)L動，凝固后即成斜面培養(yǎng)基。上述的茯茶的培育方法，其中二級菌種培養(yǎng)基配方及配制方法如下松 木屑54%，粗玉米粉29%，麩皮13%，蔗糖1%，石膏粉1%,過磷酸釣1%, 碳酸鎂0.4%,含水量50 55%, pH6.0 6.5;;配制方法將松木屑、玉米粉、麩 皮、石膏粉、疏粉鎂混合拌勻，另將紅糖用水溶化、倒入木屑玉米粉中拌合， 調(diào)節(jié)pH值6.0~6.5，以手握成團(tuán)，但無7jc擠出為度，裝入無色玻璃廣口瓶中， 裝量不超過80%，用棉塞塞住瓶口，送入常規(guī)高壓鍋蒸汽滅菌即可。上述的茯芬的培育方法，其中轉(zhuǎn)接原種培養(yǎng)基為松木塊-麥麩培養(yǎng)基，配 方松木塊(lcmxlcmx0.5cm) 62%,麥麩22°/。，松木屑10%,蔗糖3%,石膏 粉1%,過磷酸鉤1%，疏酸鎂1%， pH6.0 6.5;配制方法松木塊用糖水煮沸 30分鐘，煮時注意攪動，使木片吸足糖水，然后撈出，另將麥麩、松木屑等其 它輔料拌合拌勻，將煮木塊糖水倒入拌合、含水量控制在60~65%,調(diào)節(jié)pH值6.0 6.5，以手握成團(tuán)，但無水?dāng)D出為度，裝入無色玻璃廣口瓶中，裝量不超過 80%，用棉塞塞住瓶口，送入高壓滅菌鍋蒸汽滅菌后即可。上述的茯茶的培育方法，其中三級菌種塑料袋培養(yǎng)基為糧食培養(yǎng)基，其 配方為小麥26%,粗玉米粉26%,稻谷粉17%，麥麩7%,松木屑22%,紅糖 1.3%，水適量，pH6.0 6.5;配制方法將小麥、玉米粉分別用清水浸泡24小時， 讓小麥、玉米吸透水分后濾干，與稻谷粉、松木屑、石膏粉、硫酸鎂等混合拌 勻，另將紅糖、葡萄糖等用水溶化，倒入小麥、玉米、谷粉、木屑混合粉中拌 勻，含水量55%左右，調(diào)節(jié)pH值6.0-6.5,以手握成團(tuán)，但無水?dāng)D出為度，并 將其裝入聚丙烯塑料袋中，保持松軟、袋口折疊扎緊，置于高壓滅菌鍋蒸汽滅 菌即可。上述的茯茶的培育方法，其中三級菌種塑料袋培養(yǎng)基為糧食培養(yǎng)基，其 配方為松木片(10cmxl.5cmxlcm) 77%，松木屑5%,麥黃夫或稻谷粉15%， 紅糖1%，石膏粉1%,硫酸鎂0.4%，尿素0.4%， pH6.0~6.5。配制方法將紅 糖用水溶化，倒入松木片煮沸30分鐘撈出，另將麥麩(稻谷粉)、松木屑、石 膏粉、硫酸鎂、葡萄糖等混合拌勻，然后將煮松木片的糖水倒入拌勻、調(diào)節(jié)pH 值6.0~6.5,將含水量控制在55%左右，以手握成團(tuán)，但無水?dāng)D出為度，再將松 木片拌合，用聚丙烯塑料袋分裝，裝袋時，先用松木屑、麥麩等粉狀材料墊底， 中間裝松木片，再用松木屑、麥麩等粉狀材料蓋面，并理順?biāo)赡酒?，使其與木 屑等粉狀材料結(jié)合緊密，最后將塑料袋口折疊扎緊后置于高壓滅菌鍋蒸汽滅菌 即可。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，從以上技術(shù)方案可知，增加了純菌種的培養(yǎng)及 篩選，使得該純菌種生產(chǎn)的茯苓質(zhì)量好、產(chǎn)量高； 一級菌種(母種)使用的 培養(yǎng)基由于馬鈴薯的含量高，為菌絲的生長提供了更多的營養(yǎng)物質(zhì)，加速了 菌絲的生長速度，節(jié)省了生產(chǎn)時間；二級菌種(原種)使用的培養(yǎng)基，減少 了松木屑的用量，節(jié)省了木材，并增加了轉(zhuǎn)接二級菌種(原種)步驟，為二 級菌種(原種)菌絲的擴(kuò)繁提供了更好的環(huán)境，從而節(jié)省了生產(chǎn)時間。綜上 所述本方法獲得的茯薈產(chǎn)量高、菌種生產(chǎn)周期短、茯苓產(chǎn)品質(zhì)量優(yōu)良穩(wěn)定， 且節(jié)省木材資源。能滿足不斷增大的市場需求，具有較好的經(jīng)濟(jì)和生態(tài)效益。
具體實施方式
實施例1:一種茯茶的培育方法，包括以下步驟 (1)純菌種的獲得選取個大皮薄、皮色紫紅、形態(tài)飽滿、龜裂多、質(zhì)地緊密、肉色白而細(xì)潤、乳汁多、生長期7個月左右、發(fā)育健壯、生命力強的幼薈作菌種，先將茯蒼表 皮削凈，用70%的乙醇進(jìn)行表面消毒，再用無菌水沖洗，然后用消毒布或濾紙 吸干水分，在無菌接種箱內(nèi)，點燃酒精燈，在火焰旁用無菌刀切開，用刀將斷 面挖成弧形，連挖兩次，在第二次挖處挑取麥粒大小塊接于純菌種培養(yǎng)基上，置于溫室，在3crc溫度下培養(yǎng)至長滿菌絲，篩選潔白無雜菌感染，呈絨毛狀濃密粗壯，生長旺盛而均勻，分泌白色乳珠菌絲，即為純菌種；純菌種培養(yǎng)基為馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基，其配方為馬鈴薯84%，葡萄糖9%， 瓊脂5%，尿素0.3%,過磷酸鈣1.1%，維生素B0.5。/。， pH6.0 7.0;配制方法 將馬鈴薯去皮、切成lcm見方小塊，立即放入盛水鍋中，加火煮沸30分鐘，用 紗布過濾、濾液定容。先將馬鈴薯濾液與葡萄糖、尿素等攪勻，調(diào)節(jié)pH值6 7， 再加入瓊脂，邊加熱邊攪拌慢慢溶解瓊脂，使瓊脂均勻混合后，用漏斗裝入玻 璃試管中，置于常規(guī)高壓鍋蒸汽滅菌。滅菌完畢，撤火將壓力降到0時，開啟 高壓鍋，降溫到手可觸摸時，將試管從高壓鍋取出，傾置斜面，以減少試管壁 上的蒸汽，將管口一頭抬高墊穩(wěn)，傾斜不超過30度，以液體培養(yǎng)基從管底斜至 管高三分之二處為宜，防止?jié)L動，凝固后即成斜面培養(yǎng)基。(2) —級菌種(母種)的培養(yǎng)在無菌接種箱內(nèi)，按常規(guī)接種方法將純菌種接入預(yù)先配制好的一級菌種培 養(yǎng)基(該培養(yǎng)基為馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基，其配方及配制方法同純菌種培養(yǎng)基) 中，在32。C溫度下培養(yǎng)，1天菌絲即可長滿斜面，即得一級母種； 一支試管純 菌種可接6 8支一級菌種(母種)。為擴(kuò)大母種的數(shù)量，可以將獲得的母種再轉(zhuǎn) 接到轉(zhuǎn)接母種培養(yǎng)基(該培養(yǎng)基為馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基，其配方及配制方法同 一級菌種培養(yǎng)基)上， 一支一級母種試管可轉(zhuǎn)接4 6支；(3) 二級菌種(原種)培養(yǎng) 按常規(guī)接種方法將一級菌種接入二級菌種培養(yǎng)基上，在25。C溫度下培養(yǎng)，經(jīng)過25天獲得二級菌種； 一支母種可接6~8瓶二級菌種(原種)；為擴(kuò)大原種 的數(shù)量，可以將獲得的原種再轉(zhuǎn)接到轉(zhuǎn)接原種培養(yǎng)基上。二級菌種培養(yǎng)基配方及配制方法如下松木屑54%,粗玉米粉29%，麩皮 13%，蔗糖1%，石膏粉1%,過磷酸4丐1%，碳酸鎂0.4%,含水量50~55%, pH6.0 6.5;;配制方法將松木屑、玉米粉、麩皮、石膏粉、硫粉鎂混合拌勻， 另將紅糖用水溶化、倒入木屑玉米粉中拌合，調(diào)節(jié)pH值6.0 6.5，以手握成團(tuán)， 但無水?dāng)D出為度，裝入無色玻璃廣口瓶中，裝量不超過80%，用棉塞塞住瓶口， 送入常規(guī)高壓鍋蒸汽滅菌即可。轉(zhuǎn)接原種培養(yǎng)基為松木塊-麥麩培養(yǎng)基，配方松木塊(lcmxlcmx0.5cm) 62%，麥麩22%，松木屑10%，蔗糖3%,石膏粉1%，過磷酸鈣1%，硫酸鎂 1%, pH6.0 6.5;配制方法+>木塊用糖水煮沸30分鐘，煮時注意攪動，使木片吸足糖水，然后撈出，另將麥麩、松木屑等其它輔料拌合拌勻，將煮木塊糖水倒入拌合、含水量控制在60 65%，調(diào)節(jié)pH值6.0 6.5，以手握成團(tuán)，但無水 擠出為度，裝入無色玻璃廣口瓶中，裝量不超過80%，用棉塞塞住瓶口，送入 高壓滅菌鍋蒸汽滅菌后即可。(4 )三級菌種(栽培種)培養(yǎng)按常規(guī)接種方法將二級菌種接入配制好的三級菌種塑料袋培養(yǎng)基上，前15 天溫度控制在26。C,后期溫度控制在23。C，培養(yǎng)至菌絲長滿袋時，即得三級菌 種； 一般一瓶原種可接20~50瓶三級菌種(栽培種)。三級菌種塑料袋培養(yǎng)基為糧食培養(yǎng)基，其配方為小麥26%，粗玉米粉26%， 稻谷粉17°/。，麥麩7%，松木屑22%，紅糖1.3%，水適量，pH6.0 6.5;配制方 法將小麥、玉米粉分別用清水浸泡24小時，讓小麥、玉米吸透水分后濾干， 與稻谷粉、松木屑、石膏粉、硫S吏鎂等混合拌勻，另將紅糖、葡萄糖等用水溶 化，倒入小麥、玉米、谷粉、木屑混合粉中拌勻，含水量55%左右，調(diào)節(jié)pH值 6.0-6.5,以手握成團(tuán)，但無水?dāng)D出為度，并將其裝入聚丙烯塑料袋中，保持松 軟、袋口折疊扎緊，置于高壓滅菌鍋蒸汽滅菌即可。實施例2:一種茯薈的培育方法，包括以下步驟(1) 純菌種的獲得選取個大皮薄、皮色紫紅、形態(tài)飽滿、龜裂多、質(zhì)地緊密、肉色白而細(xì)潤、 乳汁多、生長期8個月左右、發(fā)育健壯、生命力強的幼苓作菌種，先將茯蒼表 皮削凈，用75%的乙醇進(jìn)行表面消毒，再用無菌水沖洗，然后用消毒布或濾紙 吸干水分，在無菌接種箱內(nèi)，點燃酒精燈，在火焰旁用無菌刀切開，用刀將斷 面挖成弧形，連挖兩次，在第二次挖處挑取麥粒大小塊接于純菌種培養(yǎng)基上， 置于溫室，在25。C溫度下培養(yǎng)至長滿菌絲，篩選潔白無雜菌感染，呈絨毛狀濃 密粗壯，生長旺盛而均勻，分泌白色乳^^菌絲，即為純菌種；純菌種培養(yǎng)基配方及配制方法同實施例1;(2) —級菌種(母種)的培養(yǎng)在無菌接種箱內(nèi)，按常規(guī)接種方法將純菌種接入預(yù)先配制好的一級菌種培 養(yǎng)基(該培養(yǎng)基為馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基，其配方及配制方法同純菌種培養(yǎng)基) 中，在25。C溫度下培養(yǎng)，2天菌絲即可長滿斜面，即得一級母種； 一支試管純 菌種可接6~8支一級菌種(母種)。為擴(kuò)大母種的數(shù)量，可以將獲得的母種再轉(zhuǎn) 接到轉(zhuǎn)接母種培養(yǎng)基(該培養(yǎng)基為馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基，其配方及配制方法同 一級菌種培養(yǎng)基)上， 一支一級母種試管可轉(zhuǎn)接4 6支；(3) 二級菌種(原種)培養(yǎng)按常規(guī)接種方法將一級菌種接入二級菌種培養(yǎng)基上，在30。C溫度下培養(yǎng)， 經(jīng)過23天獲得二級菌種； 一支母種可接6~8瓶二級菌種(原種)；為擴(kuò)大原種 的數(shù)量，可以將獲得的原種再轉(zhuǎn)接到轉(zhuǎn)接原種培養(yǎng)基上。二級菌種培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)接原種培養(yǎng)基配方及配制方法同實施例1。(4) 三級菌種(栽培種)培養(yǎng)按常規(guī)接種方法將二級菌種接入配制好的三級菌種塑料袋培養(yǎng)基上，前15 天溫度控制在25。C，后期溫度控制在22。C,培養(yǎng)至菌絲長滿袋時，即得三級菌 種； 一般一瓶原種可接20-50瓶三級菌種(栽培種)。三級菌種塑料袋培養(yǎng)基為糧食培養(yǎng)基，其配方為松木片 (10cmxl.5cmxlcm) 77%，松木屑5%,麥麩或稻谷粉15%，紅糖1°/。，石膏粉 1%,硫S臾鎂0.4。/。，尿素0.4°/。， pH6.0~6.5。配制方法將紅糖用水溶化，倒入 松木片煮沸30分鐘撈出，另將麥麩(稻谷粉)、松木屑、石膏粉、硫酸鎂、葡 萄糖等混合拌勻，然后將煮松木片的糖水倒入拌勻、調(diào)節(jié)pH值6.0-6.5，將含 水量控制在55°/。左右，以手握成團(tuán)，但無水?dāng)D出為度，再將松木片拌合，用聚 丙烯塑料袋分裝，裝袋時，先用松木屑、麥麩等粉狀材料墊底，中間裝松木片， 再用松木屑、麥麩等粉狀材料蓋面，并理順?biāo)赡酒蛊渑c木屑等粉狀材料結(jié) 合緊密，最后將塑料袋口折疊扎緊后置于高壓滅菌鍋蒸汽滅菌即可。實施例3一種茯苓的培育方法，包括以下步驟(1) 純菌種的獲得 同實施例1;(2) —級菌種(母種)的培養(yǎng)在無菌接種箱內(nèi)，按常規(guī)接種方法將純菌種接入預(yù)先配制好的一級菌種培 養(yǎng)基(該培養(yǎng)基為馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基，其配方及配制方法同純菌種培養(yǎng)基) 中，在28。C溫度下培養(yǎng)，2天菌絲即可長滿斜面，即得一級母種； 一支試管純 菌種可接6~8支一級菌種(母種)。為擴(kuò)大母種的數(shù)量，可以將獲得的母種再轉(zhuǎn) 接到轉(zhuǎn)接母種培養(yǎng)基(該培養(yǎng)基為馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基，其配方及配制方法同 一級菌種培養(yǎng)基)上， 一支一級母種試管可轉(zhuǎn)接4 6支； (3 ) 二級菌種(原種)培養(yǎng)按常規(guī)接種方法將一級菌種接入二級菌種培養(yǎng)基上，在30。C溫度下培養(yǎng)， 經(jīng)過20天獲得二級菌種； 一支母種可接6~8瓶二級菌種(原種)；為擴(kuò)大原種 的數(shù)量，可以將獲得的原種再轉(zhuǎn)接到轉(zhuǎn)接原種培養(yǎng)基上。二級菌種培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)接原種培養(yǎng)基配方及配制方法同實施例1。(4)三級菌種(栽培種)培養(yǎng) 按常規(guī)接種方法將二級菌種接入配制好的三級菌種塑料袋培養(yǎng)基上，前15 天溫度控制在28。C，后期溫度控制在24。C，培養(yǎng)至菌絲長滿袋時，即得三級菌 種； 一般一瓶原種可接20~50瓶三級菌種(栽培種)。三級菌種塑料袋培養(yǎng)基配方及配制方法同實施例1;茯茶的種植種植分春種和秋種兩季，春種在"清明"到"小滿"(4~5月) 之間進(jìn)行，秋種在"立秋"至"秋分(8 9月)之間進(jìn)行，將上述實施例培育得 到的三級菌種(栽培種)下窖接種到準(zhǔn)備好活立松根、段木、松枝及丫小徑材 上，然后做好茶場管理及病蟲害防治工作。6~8個月后，當(dāng)茶場的窖土凸起、龜 裂，裂縫不再增大時，說明窖內(nèi)的茯薈已經(jīng)停止生長，此時可以采收，活立松 根、段木、可收獲2 3次，小材枝丫可收獲1 2次。以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明作任何形式上的 限制，任何未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例 所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1、一種茯苓的培育方法，包括以下步驟
(1)純菌種的獲得
先將茯苓表皮削凈，用70～75％的乙醇進(jìn)行表面消毒，再用無菌水沖洗，然后用消毒布或濾紙吸干水分，在無菌接種箱內(nèi)，點燃酒精燈，在火焰旁用無菌刀切開，用刀將斷面挖成弧形，連挖兩次，在第二次挖處挑取麥粒大小塊接于純菌種培養(yǎng)基上，置于溫室，在25～30℃溫度下培養(yǎng)至長滿菌絲，篩選潔白無雜菌感染，呈絨毛狀濃密粗壯，生長旺盛而均勻，分泌白色乳珠菌絲，即為純菌種；
(2)一級菌種的培養(yǎng)
在無菌接種箱內(nèi)，按常規(guī)接種方法將純菌種接入預(yù)先配制好的一級菌種培養(yǎng)基中，在25～32℃溫度下培養(yǎng)，1-2天菌絲即可長滿斜面，即得一級菌種；
(3)二級菌種培養(yǎng)
按常規(guī)接種方法將一級菌種接入二級菌種培養(yǎng)基上，在25～30℃溫度下培養(yǎng)，經(jīng)過20-25天獲得二級菌種；
(4)三級菌種培養(yǎng)
按常規(guī)接種方法將二級菌種接入配制好的三級菌種塑料袋培養(yǎng)基上，前15天溫度控制在25～28℃，后期溫度控制在22～24℃，培養(yǎng)至菌絲長滿袋時，即得三級菌種。
2、 如權(quán)利要求
l所述的茯苓的培育方法，其中將獲得的一級菌種按 常規(guī)接種方法再轉(zhuǎn)接到轉(zhuǎn)接母種培養(yǎng)基上。
3、 如權(quán)利要求
1所述的茯苓的培育方法，其中將獲得的二級菌種按 常規(guī)接種方法再轉(zhuǎn)接到轉(zhuǎn)接原種培養(yǎng)基上。
4、 如權(quán)利要求
l-3之一所述的茯苓的培育方法，其中純菌種培養(yǎng)基、 一級菌種培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)接母種培養(yǎng)基為馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基，其配方為馬 鈴薯84%，葡萄糖9%，瓊脂5%，尿素0.3%,過磷酸4丐1.1%,維生素B0.5%， pH6.0 7.0;配制方法將馬鈴薯去皮、切成lcm見方小塊，立即放入盛水 鍋中，加火煮沸30分鐘，用紗布過濾、濾液定容。先將馬鈴薯濾液與葡萄 糖、尿素等攪勻，調(diào)節(jié)pH值6-7，再加入瓊脂，邊加熱邊攪拌慢慢溶解瓊 脂，使瓊脂均勻混合后，用漏斗裝入玻璃試管中，置于常規(guī)高壓鍋蒸汽滅 菌。滅菌完畢，撤火將壓力降到0時，開啟高壓鍋，降溫到手可觸摸時， 將試管從高壓鍋取出，傾置斜面，以減少試管壁上的蒸汽，將管口一頭抬 高墊穩(wěn)，傾斜不超過30度，以液體培養(yǎng)基從管底斜至管高三分之二處為宜， 防止?jié)L動，凝固后即成斜面培養(yǎng)基。
5、 如權(quán)利要求
4所述的茯苓的培育方法，其中二級菌種培養(yǎng)基配方 及配制方法如下松木屑54%，粗玉米粉29%,麩皮13%,嚴(yán)糖1%,石膏 粉1%,過磷酸釣1%,碳酸鎂0.4%，含水量50~55%， pH6.0 6.5;;配制方 法將松木屑、玉米粉、麩皮、石膏粉、硫粉鎂混合拌勻，另將紅糖用水 溶化、倒入木屑玉米粉中拌合，調(diào)節(jié)pH值6.0-6.5,以手握成團(tuán)，但無水 擠出為度，裝入無色玻璃廣口瓶中，裝量不超過80%，用棉塞塞住瓶口， 送入常規(guī)高壓鍋蒸汽滅菌即可。
6、 如權(quán)利要求
4所述的茯苓的培育方法，其中轉(zhuǎn)接原種培養(yǎng)基為松 木塊-麥麩培養(yǎng)基，配方松木塊(lcmxlcmx0.5cm) 62%,麥麩22%，松 木屑10°/。，蔗4唐3%,石膏4分1°/ ，過石岸酸4丐1%,石危酸4美1°/。， pH6.0 6.5; 配制方法松木塊用糖水煮沸30分鐘，煮時注意攪動，使木片p及足糖水， 然后撈出，另將麥麩、松木屑等其它輔料拌合拌勻，將煮木塊糖水倒入拌 合、含水量控制在60-65°/。，調(diào)節(jié)pH值6.0-6.5，以手握成團(tuán)，但無水?dāng)D出 為度，裝入無色玻璃廣口瓶中，裝量不超過80%,用棉塞塞住瓶口，送入 高壓滅菌鍋蒸汽滅菌后即可。
7、 如權(quán)利要求
5所述的茯苓的培育方法，其中三級菌種塑料袋培養(yǎng) 基為糧食培養(yǎng)基，其配方為小麥26%,粗玉米粉26%，稻谷粉17%，麥 麩7°/。，松木屑22%,紅糖1.3%,水適量，pH6.0 6.5;配制方法將小麥、 玉米粉分別用清水浸泡24小時，讓小麥、玉米吸透水分后濾干，與稻谷4分、 松木屑、石膏粉、硫酸鎂等混合拌勻，另將紅糖、葡萄糖等用水溶化，倒 入小麥、玉米、谷4分、木屑混合粉中拌勻，含水量55%左右，調(diào)節(jié)pH值 6.0-6.5,以手握成團(tuán)，但無水?dāng)D出為度，并將其裝入聚丙烯塑料袋中，保 持松軟、袋口折疊扎緊，置于高壓滅菌鍋蒸汽滅菌即可。
8、 如權(quán)利要求
5所述的茯苓的培育方法，其中三級菌種塑料袋培養(yǎng) 基為糧食培養(yǎng)基，其配方為松木片77%，松木屑5%，麥麩或稻谷粉15%, 紅糖1%,石膏粉1%，硫酸鎂0.4%，尿素0.4%， pH6.0 6.5。配制方法 將紅糖用水溶化，倒入松木片煮沸30分鐘撈出，另將麥麩或稻谷粉、松木 屑、石膏粉、硫酸鎂、葡萄糖等混合拌勻，然后將煮松木片的糖水倒入拌 勻、調(diào)節(jié)pH值6.0~6.5，將含水量控制在55%左右，以手握成團(tuán)，但無水 擠出為度，再將松木片拌合，用聚丙烯塑料袋分裝，裝袋時，先用松木屑、 麥麩等粉狀材料墊底，中間裝松木片，再用松木屑、麥麩等粉狀材料蓋面， 并理順?biāo)赡酒蛊渑c木屑等粉狀材料結(jié)合緊密，最后將塑料袋口折疊扎 緊后置于高壓滅菌鍋蒸汽滅菌即可。
9、 如權(quán)利要求
6所述的茯苓的培育方法，其中三級菌種塑料袋培養(yǎng) 基為糧食培養(yǎng)基，其配方為小麥26°/。，粗玉米粉26°/。，稻谷粉17%，麥 麩7%，松木屑22%,紅糖1.3%,水適量，pH6.0 6.5;配制方法將小麥、玉米粉分別用清水浸泡24小時，讓小麥、玉米吸透水分后濾干，與稻谷粉、 松木屑、石膏粉、硫酸鎂等混合拌勻，另將紅糖、葡萄糖等用水溶化，倒 入小麥、玉米、谷粉、木屑混合粉中拌勻，含水量55%左右，調(diào)節(jié)pH值 6.0~6.5，以手握成團(tuán)，但無水?dāng)D出為度，并將其裝入聚丙烯塑料袋中，保 持松軟、袋口折疊扎緊，置于高壓滅菌鍋蒸汽滅菌即可。
10、如權(quán)利要求
6所述的茯蒼的培育方法，其中三級菌種塑料袋培 養(yǎng)基為糧食培養(yǎng)基，其配方為松木片77%,松木屑5%,麥麩或稻谷粉 15%，紅糖1%，石膏粉1%，硫酸鎂0.4°/。，尿素0.4%， pH6.0 6.5。配制 方法將紅糖用水溶化，倒入松木片煮沸30分鐘撈出，另將麥麩或稻谷粉、 松木屑、石膏粉、硫酸鎂、葡萄糖等混合拌勻，然后將煮松木片的糖水倒 入拌勻、調(diào)節(jié)pH值6.0-6.5，將含水量控制在55%左右，以手握成團(tuán)，但 無水?dāng)D出為度，再將松木片拌合，用聚丙烯塑料袋分裝，裝袋時，先用松 木屑、麥麩等粉狀材料墊底，中間裝松木片，再用松木屑、麥麩等粉狀材 料蓋面，并理順?biāo)赡酒蛊渑c木屑等粉狀材料結(jié)合緊密，最后將塑料袋 口折疊扎緊后置于高壓滅菌鍋蒸汽滅菌即可。
專利摘要
本發(fā)明公開一種茯苓的培育方法，包括(1)先將茯苓表皮削凈，用70～75％的乙醇進(jìn)行表面消毒，再用無菌水沖洗，然后用消毒布或濾紙吸干水分，在無菌接種箱內(nèi)，點燃酒精燈，在火焰旁用無菌刀切開，用刀將斷面挖成弧形，連挖兩次，在第二次挖處挑取麥粒大小塊接于純菌種培養(yǎng)基上，置于溫室，在25～30℃溫度下培養(yǎng)至長滿菌絲，篩選潔白無雜菌感染，呈絨毛狀濃密粗壯，生長旺盛而均勻，分泌白色乳珠菌絲，即為純菌種；(2)一級菌種的培養(yǎng)；(3)二級菌種培養(yǎng)；(4)三級菌種培養(yǎng)。本發(fā)明具有菌絲生產(chǎn)周期短，茯苓質(zhì)量優(yōu)良穩(wěn)定，產(chǎn)量高。
文檔編號A01G1/04GKCN101578945SQ200910102629
公開日2009年11月18日 申請日期2009年6月22日
發(fā)明者蘭才武, 屠倫建, 楊光明, 忠 鄧, 鄭建立 申請人:貴州信邦中藥發(fā)展有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan