專利名稱：一種氨基酸肥及其制法的制作方法
專利說明 本發(fā)明涉及新的化合物及其治療學(xué)上可接受的鹽，它們能抑制外源或內(nèi)源刺激胃酸分泌，因此可用于防治胃潰瘍。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明化合物及其治療學(xué)上可接受鹽的應(yīng)用，可用以抑制哺乳動物(包括人)的胃酸分泌。廣義上，本發(fā)明化合物可用于防治哺乳動物(包括人)的胃腸炎癥及與胃酸有關(guān)的疾病，例如胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、消化性食管炎和佐林格-埃利森縮合癥。此外，這些化合物可用來治療其它胃腸失調(diào)，其中胃抗分泌作用對治療患者胃泌激素和急性上胃腸道出血是理想的。還可用于患者加強護理和手術(shù)前后防止酸吸入及加重潰瘍。本發(fā)明的化合物還可用于防治哺乳動物(包括人)的炎征。尤其是包含溶菌酶的那些化合物。可以具體列舉的病征有風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和痛風(fēng)。本發(fā)明化合物還可用于治療與體內(nèi)硬組織代謝失調(diào)有關(guān)的疾病以及青光眼。本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明化合物或其治療學(xué)上可接受鹽作為活性成分的藥用組合物。另一方面，本發(fā)明涉及制備這類新的化合物以及制備這些化合物所用新的中間體的方法，該活性化合物用于制備藥用組合物的應(yīng)用和上述的醫(yī)療應(yīng)用。
本發(fā)明的主要目的是提供具有高水平生物利用率的化合物。本發(fā)明化合物還顯示在中性和酸性PH中的高度化學(xué)穩(wěn)定性以及有關(guān)抑制胃酸分泌的高效力。生物利用率定義為化合物給藥劑量按未改變的進入全身血液所吸收的部分或百分比，效力在本申請中定義為ED50值。
許多專利文獻均已公開了抑制胃酸分泌的苯并咪唑衍生物，可以列舉的有英國專利1，500，043號、英國專利1，525，958號、美國專利4，182，766號、美國專利4，255，431號、美國專利4，599，347號、美國專利4，555，518號、美國專利4，727，150號、美國專利4，628，098號、歐洲專利124，495號、歐洲專利208，452號、歐洲專利221，041號、歐洲專利279，149號、歐洲專利176，308號和德溫特文摘87-294，449/42號。在美國專利4，359，465號中公開了建議用苯并咪唑衍生物防治特殊的胃腸炎癥。
如上所述，現(xiàn)有技術(shù)介紹的化合物是有效的酸分泌抑制劑，也可用作抗?jié)兯?，為進一步提高這類化合物的可用性，不僅要求具有較高的生物利用率，還應(yīng)具有高效力抑制胃酸分泌和高度的中性PH的化學(xué)穩(wěn)定性。
業(yè)已認識到受試的2-[(吡啶基甲基)亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑在生物利用率及效力和穩(wěn)定性方面顯示了很大程度的易變性，難以鑒別化合物是否具有所有的三方面有益性能，現(xiàn)有技術(shù)沒有指導(dǎo)如何獲得具有這些綜合性能的化合物。
已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物具有提高穩(wěn)定性和酶催分裂作用，基團(上述化學(xué)式中為R)顯示了極高的生物利用率，該化合物用作胃酸分泌所抑制劑乃很有效，并且在中性和酸性PH溶液中顯示高度的化學(xué)穩(wěn)定性，另外，具有酸性PH的高度化學(xué)穩(wěn)定性，使該類化合物可用于無腸溶包衣的口服制劑。
本發(fā)明的式Ⅰ和式Ⅰ′化合物及其生理學(xué)上可接受的鹽
式中F在5或6位上，R是-CH2OCOOR1，其中R1是含1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，或是芐基，或
R1是
，-(CH2)nCOOH或-(CH2)nSO3H，其中n是1-6。當含有氨基官能團時，基團R1可以呈具有生理學(xué)上可接受的抗衡陰離子的銨鹽形式，當含有羧酸或磺酸基團時，基團R1可呈具有生理學(xué)上可接受的抗衡陽離子的鹽的形式。
最佳化合物是4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑-1-基碳酸甲·乙酯，5-氟和6-氟-2[[(4-環(huán)丙基-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺酰基]-1H-苯并咪唑-1-基碳酸甲·乙酯。
氨基官能團酸加成鹽的實例是無機酸(例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸等)或由一、二或三價羧酸(例如乙酸，酒石酸或檸檬酸)中的那些酸。呈鹽形式的羧酸或磺酸的抗衡陽離子的實例是Na+、K+或N+(R2)4，其中R2是含1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基。
本發(fā)明化合物具有硫原子的不對稱中心，即存在兩個旋光異構(gòu)體(對映體)。兩個純對映體、外消旋混合物(每一對映體50%)和這兩種的不等混合物均屬本發(fā)明范圍，中間體化合物及其制備方法也屬本發(fā)明范圍。
可以單獨采用本發(fā)明的5-氟和6-氟異構(gòu)體，或以相等或不等混合物用之。
制備
本發(fā)明的化合物可按下述方法制備
a)式Ⅱ、Ⅱ′化合物與氯甲基碳酸烷基酯或氯甲基碳酸芐酯反應(yīng)，式ⅡⅡ′如下
式中Z是金屬陽離子，例如Na+、K+、Li+或Ag+，也可以是季銨離子，例如四丁基銨。
b)在適宜的堿(如三乙胺或4-N，N-二甲氨基吡啶)存在下，Z是羥甲基的式Ⅱ或Ⅱ′化合物與式Ⅲ化合物反應(yīng)，式Ⅲ如下
式中R′的定義同前，x是Cl或咪唑或?qū)ο趸窖趸蚬δ艿刃Щ鶊F。
a)和b)的反應(yīng)適宜在無水保護氣體下進行。適宜的溶劑是碳氫化合物，例如甲苯或苯或鹵代碳氫化合物(如二氯甲烷或氯仿)。
反應(yīng)可在室溫至反應(yīng)混合物的沸點之間進行。
c)當含有被護羧烷基作為酯時，將R′取代基中的酯水解為式Ⅰ或Ⅰ′化合物。
根據(jù)工藝條件和起始原料，得到的式Ⅰ和Ⅰ′最終產(chǎn)品可以是中性的或是鹽的形式。
含氨基化合物的酸加成鹽可以按已知方法用堿性試劉(如堿)或離子交換方法轉(zhuǎn)變成游離堿，然后，所得游堿轉(zhuǎn)化為有機酸鹽或無機酸鹽。含羧酸化合物的堿加成鹽可按相應(yīng)方法轉(zhuǎn)變成酸的形式，然后，再轉(zhuǎn)化為治療學(xué)上適宜的鹽，例如鈉鹽或鉀鹽。
借助結(jié)晶或色譜可以分離所得的5-氟和6-氟異構(gòu)體，所得外消旋物可分離成純對映體，這可按已知方法例如由外消旋非對映鹽通過色譜或分級結(jié)晶實施。
方法a)所用的式Ⅱ和Ⅱ′中間體可按已知方法制備，舉例說明如下。
在吡啶存在下，可由適當?shù)拇寂c氯甲酸氯甲酯反應(yīng)制得氯甲基碳酸烷基酯和氯甲基碳酸芐酯。
由N-1位帶有H的相應(yīng)的苯并咪唑化合物與甲醛反應(yīng)，可制得Z是羥甲基的式Ⅱ和Ⅱ′中間體，舉例說明如下。
用已知方法可制得式Ⅲ的起始原料，例如，由醇HOR′與碳酰氯或1，1′-碳酰二咪唑或氯甲酸對硝基苯酯反應(yīng)而制得，舉例說明如下。
方法c)所用的中間體可按方法b)制得，其中R′含有被護羧烷基作為酯。
用已知方法可制得在中間體實施例中所介紹的起始原料。
為臨床應(yīng)用起見，本發(fā)明化合物可制成適于口服、直腸、非腸道或其它給藥方式的藥物配制劑。該配制劑通常含有本發(fā)明化合物和藥學(xué)上可接受的載體，該載體可呈固體、半固體或液體稀釋劑，或膠囊形式。這些藥物制劑是本發(fā)明的進一步目的。通常，活性化合物的量占制劑的0.1-95%(重量)，用于非腸道給藥的制劑為0.2-20%(重量)，用于口服給藥的制劑為1-5-%(重量)。
在含本發(fā)明化合物以劑量單位形式的藥物制劑中，口服給藥所選用的化合物可與固體粉狀載體(例如乳糖、蔗糖、山梨糖、甘露糖醇、淀粉、支鏈淀粉、纖維素衍生物、明膠或其它適宜的載體)、穩(wěn)定物質(zhì)[例如堿性化合物(如碳酸鹽、鈉、鉀、鈣、鎂等的氫氧化物和氧化物)]以及潤滑劑(例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酰富馬酸鈉和聚乙二醇蠟)混合，然后，將該混合物加工成丸?；驂撼善瑒Ｍ枇：推瑒┛梢园鼜?fù)腸溶衣，避免活性化合物受酸催化降解，只要能在胃中保持劑型。該腸溶衣選自藥學(xué)上可接受的腸溶衣材料例如蜂蠟、蟲膠或形成陰離子膜聚合物(例如乙酸鄰苯二甲酸纖維素、鄰苯二甲酸羥丙基-甲基纖維素、甲基部分酯化的異丁烯酸聚合物等)，必要時，還可與適宜的增塑劑混合。為便于區(qū)別含有本發(fā)明不同的活性化合物或不同量的活性化合物的丸粒和片劑，可以在包衣中添加各種染劑。
軟明膠膠囊可由含本發(fā)明活性化合物、植物油、脂肪或其它適于軟明膠膠囊的賦形劑混合物的膠囊制得。軟明膠膠囊還可以是如上所述的腸溶衣型。硬明膠膠囊可包括活性化合物丸?；蚰c溶衣丸粒。硬明膠膠囊還可包含活性化合物、與之配伍的固體粉末載體，例如乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、馬鈴薯淀粉、支鏈淀粉、纖維素衍生物或明膠。該硬明膠膠囊可以是如上所述的腸溶衣型。
直腸給藥的劑量單位可以制成栓劑形式，它含有活性物質(zhì)與中性脂肪堿混合物。或者可以制成直腸明膠膠囊形式，它含有活性物質(zhì)與植物油、石蠟油或其它適于直腸明膠膠囊賦形劑的混合物。或者可以制成易于操作的微型灌腸劑形式。或者可以制成微型干灌腸配制劑，在即將給藥前置于適宜溶劑中重制。
口服給藥的液體制劑可以制成糖漿或混懸液，例如含有0.2至20%(重量)活性成分，其余部分為糖或糖醇以及乙醇、水、甘油、丙二醇和/或聚乙二醇的混合物組成的溶液或混懸液。必要時，這種液體制劑可以含有著色劑、調(diào)味劑、似糖和羧甲基纖維素或其它增稠劑。口服液體制劑還可制成干粉劑，在應(yīng)用前置于適宜溶劑中重制。
非腸道給藥溶液可制備成本發(fā)明化合物溶于藥學(xué)上可接受溶劑的溶液，濃度以0.1%至10%(重量)為佳。這些溶液還可含有穩(wěn)定劑和/或緩沖劑，可以制成不同單位劑量的安瓿或小瓶型。非腸道給藥溶液也可制成干制劑，應(yīng)用前可即時用適宜溶劑重制。
活性物質(zhì)的典型日劑量取決于各種因素，例如各患者的個體需要、給藥途徑和疾病。一般，口服和非腸道給藥劑量為5至500mg活性物質(zhì)/日。
下述實施例說明本發(fā)明。
實施例1 4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑-1-基芐碳酸甲酯的制備 將4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑(200mg，0.66mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液與5M甲醛水溶液(1ml，5mmol)強烈攪拌3分鐘，分離后，有機層用硫酸鎂干燥，過濾，將三乙胺(0.091ml，0.66mmol)加到該混合物中，滴入純度90%氯甲酸芐酯(0.10ml，0.66mmol)的二氯甲烷(1ml)溶液，該混合物于室溫攪拌1小時，蒸發(fā)溶液，粗制品用硅膠提純，用二氯甲烷-乙酸乙酯(3∶1)洗脫該產(chǎn)品用乙醇結(jié)晶，得到標題化合物(得率0.047g，15%)。所得化合物的特性由核磁共振確認，該產(chǎn)品的核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例2 4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺酰基]-1H-苯并咪唑-1-基碳酸甲·乙酯的制備 攪拌下，將4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺酰基]-1H-苯并咪唑(1.0g，3.3mmol)和硫酸氫四丁基銨(1.1g，3.2mmol)加到氫氧化鈉(0.26g，6.5mmol)的水(12ml)溶液中，該混合物在室溫下攪拌約5分鐘，然后用二氯甲烷(20ml)提取3次，分離后，合并的二氯甲烷相用硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑，得到油狀物。該殘留油狀物溶解于甲苯(30ml)中，在保護氣體和攪拌下，加入碳酸氯甲·乙酯(0.68g，粗制品)的無水甲苯(3ml)，該混合物于室溫攪拌過夜，蒸去甲苯，殘留油經(jīng)二氧化硅柱色譜分離，用乙酸乙酯洗脫，用乙酸乙酯-乙醚結(jié)晶，得到標題化合物(0.33g，25%)。產(chǎn)品的核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例3和4 5-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑-1-基碳酸甲·乙酯和6-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑-1-基碳酸甲·乙酯的制備 依次將純度80%的粗制品(0.55g，1.2mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液、三乙胺(0.20ml，1.4mmol)和氯甲酸乙酯(0.14ml，1.5mmol)的二氯甲烷(4ml)溶液加入1-羥甲基-5-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑和1-羥甲基-6-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺酰基]-1H-苯并咪唑的混合物中。在保護氣體、室溫下，將該混合物攪拌1小時后，蒸去二氯甲烷，殘留油狀物用二氧化硅柱色譜分離，用乙酸乙酯洗脫，由此得到所要求的化合物為異構(gòu)體混合物(混合比為1∶1)，(得率0.12g，18%)。該產(chǎn)品的核磁共振數(shù)據(jù)詳述如下。
表1 實施例 溶劑 NMR數(shù)據(jù)δppm 1 CDCl33.73(s，3H)，4.34(d，1H)，4.39(d，1H)， (300 MHz) 5.17(s，2H)，6.46(s，2H)，6.72(dd， 1H)，6.85(d，1H)，7.03-7.11(m，1H)， 7.30-7.44(m，7H)，8.35(d，1H) 2 CDCl31.30(t，3H)，3.80(s，3H)，4.20(q，2H)， (300 MHz) 4.90(s，2H)，6.40-6.50(m，2H)， 6.75(dd，1H)，6.90(d，1H)，7.05- 7.15(m，1H)，7.35-7.40(m，1H)，7.40- 7.45(m，1H)，8.40(d，1H) 實施例 溶劑 NMR數(shù)據(jù)δppm 3 CDCl30.30(m，2H)，0.60-0.65(m，2H)，1.20(m， 和 (300 MHz) 1H)，1.30(m，3H)，3.65-3.80(m，2H)， 4 4.20(m，2H)，4.80(s，2H)，6.30-6.45(m， 2H)，6.70(dd，1H)，6.75(d，1H)，7.10- 7.20(m，1H)，7.35(dd，0.5)，7.50(dd， 0.5H)，7.60(dd，0.5H)，7.75(dd，0.5H)， 8.35(d，1H) 中間體的制備 實施例Ⅰ1 4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑的制備 將4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]硫代]-1H-苯并咪唑(1.31g，0.0045mol)溶解于二氯甲烷(60ml)中，加入碳酸氫鈉(0.76g，0.0090mol)的水(10ml)溶液，該混合物冷卻到+2℃時，在攪拌下滴入間氯過苯甲酸(84%，1.64g，0.0045mol)的二氯甲烷(10ml)溶液，于+2℃連續(xù)攪拌15分鐘，分離后，有機層用0.20M氫氧化鈉水溶液提取(2×25ml，0.010mol)，在二氯甲烷(100ml)存在下，用0.1M鹽酸將合并的水溶液中和至pH7-8，分離后，水層用二氯甲烷提取，合并的有機溶液用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)溶液，得到標題化合物(1.06g，77%)。最終產(chǎn)品的核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例Ⅰ2和Ⅰ3 1-羥甲基-5-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑和1-羥甲基-6-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑的制備 將5-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑(3.45g，10.0mmol)溶解于二氯甲烷(50ml)中，加入甲醛溶液(5M，10ml，50mmol)，該混合物強烈攪拌2分鐘，進行相分離，用硫酸鈉干燥二氯甲烷溶液，過濾，低溫(＜30℃)蒸去溶劑，殘留物為異構(gòu)體混合物(比率1∶1)，即純度80%的標題化合物，無需純化可直接用于下一步反應(yīng)。該產(chǎn)品的核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例Ⅰ4 1-羥甲基-4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑的制備 將4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑(1.6g，5.2mmol)懸浮于二氯甲烷(50ml)中，加入甲醇，直至得到澄清溶液。該混合物置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中減壓濃縮，將不可結(jié)晶的油狀殘留物溶解于二氯甲烷(30ml)中，加入甲醛溶液(5M，10ml，50mmol)，該混合物強烈攪拌4分鐘，分離后，用硫酸鈉干燥有機溶液，濃縮至10ml混合物，置于繞瓶中冷卻15分鐘，濾出形成的沉淀物，用冷二氯甲烷洗滌，由此得到標題化合物(1.1g，63%)。核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例Ⅰ5 4-環(huán)丙基甲氧基-2-甲基吡啶-N-氧化物的制備 將環(huán)丙基-甲醇(50ml)加到氫化鈉(55%純度，4.4g，0.1mmol)中，用石醚洗滌，然后，約1小時內(nèi)加入2-甲基-4-硝基吡啶-N-氧化物(6.5g，0.042mol)的環(huán)丙基甲醇(30ml)溶液，所得深棕色混合物加熱至90℃，于90℃攪拌約1小時，此后，減壓蒸去環(huán)丙基甲醇，將二氯甲烷(100ml)加到該殘留物中，攪拌約30分鐘，然后過濾，濃縮，得到9.5g粗制品。
該粗制品用二氧化硅閃色譜純化，用二氯甲烷-甲醇(90-10)洗脫，得到4.0g(53%)純的標題化合物。核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例Ⅰ6 2-乙酰氧甲基-4-環(huán)丙基甲氧基吡啶的制備 將4-環(huán)丙基甲氧基-2-甲基吡啶-N-氧化物(3.8g，0.021mol)溶解于乙酐(10ml)中，并滴入乙酐(20ml)(加熱至90℃)中，滴加后，溫度升至110℃，該混合物于110℃攪拌1小時，然后蒸去溶劑，無需純化即可應(yīng)用該粗制品。核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例Ⅰ7 4-環(huán)丙基甲氧基-2-羥甲基吡啶的制備 將氫氧化鈉(100ml，2M)加到粗制品2-乙酰氧甲基-4-環(huán)丙基甲氧基吡啶中，回流2小時，該混合物用二氯甲烷提取，進行相分離，有機層用硫酸鈉干燥，過濾，蒸去溶劑，得到2.7g標題化合物粗制品，核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。該粗制品可直接使用，無需進一步純化。
實施例Ⅰ8 4-環(huán)丙基甲氧基-2-氯甲基吡啶鹽酸化物的制備 將4-環(huán)丙基甲氧基-2-羥甲基吡啶(93%純度)(0.9g，0.0046mol)溶解于二氯甲烷(10ml)中，冷卻至0℃，在0℃下滴入SOCl2(0.5ml，0.0069mol)的二氯甲烷(5ml)溶液，室溫下將反應(yīng)混合物攪拌15分鐘，加入異丙醇(0.5ml)，蒸發(fā)該混合物，得到所要求產(chǎn)品(0.68g，78%)。核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例Ⅰ9 5-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]硫代]-1H-苯并咪唑的制備 以一定的順序?qū)溲趸c(0.2g，0.0051mol)的水(1ml)溶液和4-環(huán)丙基甲氧基-2-氯甲基吡啶鹽酸化物(0.91g，0.0046mol)的甲醇(10ml)溶液加入5-氟-2-巰基-1H-苯并咪唑(0.88g，0.0051mol)的甲醇(25ml)溶液中，該混合物加熱至沸騰，加入氫氧化鈉(0.2g，0.005mol)的水(1ml)溶液，回流1小時，蒸發(fā)甲醇后，加入二氯甲烷(75ml)和水(50ml)，pH調(diào)至10。強烈攪拌該混合物，進行相分離，有機相用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，得到所要求產(chǎn)品(1.25g，72%)。該產(chǎn)品的核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例Ⅰ10 4-氟-2-巰基-1H-苯并咪唑的制備 將1，2-二氨基-3-氟苯(1.6g，12.7mmol)和乙基黃原酸鉀(2.64g，16.5mmol)溶解于乙醇(25ml)和水(6ml)中，該混合物回流14小時，然后置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，加入水(20ml)，用2M鹽酸酸化該溶液，濾出沉淀物，干燥，由此得到標題化合物(1.23g，58%)。核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例Ⅰ11 4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]硫代]-1H-苯并咪唑的制備 將4-氟-2-巰基-1H-苯并咪唑(1.15g，0.0068mol)溶解于甲醇(60ml)中，依次加入氫氧化鈉(0.54g，0.014mol)的水(3ml)溶液和4-甲氧基-2-氯甲基吡啶鹽酸化物(1.32g，0.0068mol)的甲醇(20ml)溶液，該混合物回流1小時，蒸發(fā)溶液，將殘留物分配于二氯甲烷和水之間，分離后，有機溶液用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)，得到的油狀物用硅膠(50g)純化，用1%甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，由此得到標題化合物(1.35g，69%)。該產(chǎn)品的核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
實施例Ⅰ12 5-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑的制備 將5-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]硫代]-1H-苯并咪唑(1.25g，0.0036mol)溶解于二氯甲烷(40ml)中，加入碳酸氫鈉0.6g，0.0072mol)的水(20ml)溶液，當該混合物冷卻至+2℃時，攪拌下加入84%間氯過苯甲酸(0.73g，0.0036mol)的二氯甲烷(5ml)溶液，于室溫連續(xù)攪拌15分鐘，分離兩相，將氫氧化鈉(0.29g，0.0072mol)的水(25ml)溶液加到有機相中，攪拌該混合物，進行相分離，水相與蘇長巖反應(yīng)，過濾，攪拌下滴入甲酸甲酯(0.45ml，0.0073mol)的水(5ml)溶液，用二氯甲烷提取后，用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)溶劑，由此得到標題化合物(0.93g，69%)。該最終產(chǎn)品的核磁共振數(shù)據(jù)詳見下文。
中間體的核磁共振數(shù)據(jù)如下。
實施例 溶劑 NMR數(shù)據(jù)δppm Ⅰ1 CDCl33.65(s，3H)，4.55(d，1H)，4.75(d，1H) (500 MHz) 6.65(d，1H)，6.75(dd，1H)，7.05(dd，1H)， 7.25(dt，1H)，7.3-7.4(b，1H)，8.35(d，1H) Ⅰ2 CDCl30.30(m，2H)，0.65(m，2H)，1.20(m，1H)， 和 (500 MHz) 3.60-3.80(m，2H)，4.70(m，1H)，4.80(m， Ⅰ3 1H)，5.55(m，1H)，5.90(m，1H)，6.70(m， 1H)，6.75(m，1H)，7.05-7.10(m，0.5H)， 7.15-7.20(m，0.5H)，7.20(dd，0.5H)， 7.40(dd，0.5H)，7.50(dd，0.5H)， 7.70(dd，0.5H)，8.15(d，1H) Ⅰ4 DMSO 3.74(s，3H)，4.76(d，1H)，4.89(d，1H)， (300 MHz) 5.7-5.9(m，2H)，6.91(dd，1H)，7.00(d， 1H)，7.1-7.2(m，1H)，7.40(m，1H)， 7.60(d，1H)，8.33(d，1H) Ⅰ5 CDCl30.36(m，2H);0.68(m，2H); (500 MHz) 1.26(m，1H);2.52(s，3H); 3.83(d，2H);6.70(dd，1H); 6.77(d，1H);8.16(d，1H) Ⅰ6 CDCl30.37(m，2H);0.69(m，2H); (500 MHz) 2.16(s，3H);3.87(d，2H); 6.75(dd，1H);6.87(d，1H); 8.42(d，1H) Ⅰ7 CDCl30.36(m，2H);0.67(m，2H); (500 MHz) 1.27(m，1H);3.86(d，2H); 4.69(s，2H);6.72(dd，1H)， 6.78(d，1H);8.33(d，1H) Ⅰ8 DMSO 0.40(m，2H);0.60(m，2H)， (300 MHz) 1.30(m，1H);4.20(d，2H); 5.00(s，2H);7.45(dd，1H); 7.65(d，1H);8.70(d，1H) Ⅰ9 CDCl30.36-0.39(m，2H);0.67-0.71(m，2H); (500 MHz) 1.27(m，1H);3.89(d，2H)，4.29(s， 2H);6.81(dd，1H);6.89(d，1H); 6.94(m，1H);7.24(dd，1H);7.46(dd， 1H)，8.43(d，1H) Ⅰ10 DMSO 6.95(d，1H)，7.00(dd，1H)， (500 MHz) 7.10(dt，1H) Ⅰ11 CDCl33.90(s，3H)，4.30(s，2H)，6.85(dd， (500 MHz) 1H)，6.90(d，1H)，6.90(dd，1H)， 7.10(dt，1H)，7.2-7.4(b，1H)， 8.50(d，1H) Ⅰ12 CDCl30.22(m，2H);0.60(m，2H);1.10(m， (500 MHz) 1H);3.45(m，1H);3.60(m，1H); 4.52(d，1H);4.70(d，1H);6.65(d， 1H);6.70(dd，1H);7.08(m，1H); 7.30-7.90(b，2H);8.28(d，1H) 目前已知實施本發(fā)明的最好方法是采用實施例3和4所述化合物。
含本發(fā)明化合物作為活性成分的藥物制劑的制備詳述如下。
糖漿 用下述成分制備含1%(每份體積的重量)活性物質(zhì)的糖漿 實施例1的化合物 1.0g 糖(粉末) 30.0g 糖精 0.6g 甘油 5.0g 吐溫 1.0g 調(diào)味劑 0.05g 乙醇96% 5.0g 蒸餾水適量至最終體積為 100ml 制備實施例1化合物的乙醇和吐溫溶液，將糖和糖精溶解于60g溫水中，冷卻后，將活性化合物的溶液加入該糖溶液中，加入甘油和調(diào)味劑的乙醇溶液，該混合物用水稀釋至最終體積為100ml。
片劑 用下述成分制備含50mg活性化合物的片劑 Ⅰ.實施例1的化合物 500g 乳糖 700g 甲基纖維素 6g 聚乙烯吡咯烷酮交聯(lián)劑 50g 硬脂酸鎂 15g 碳酸鈉 6g 蒸餾水 適量 Ⅱ.羥丙基甲基纖維素 36g 聚乙二醇 9g 二氧化鈦著色劑 4g 凈化水 313g Ⅰ.實施例1的化合物粉末與乳糖混合，用甲基纖維素和碳酸鈉的水溶液粒化，該濕物料加壓篩分，顆粒置于烘箱干燥，此后，將顆粒與聚乙烯吡咯烷酮和硬脂酸鎂混合，該干混合物在直徑7mm沖頭的壓片機上壓制成片芯(10000片)，每片含50mg活性物質(zhì)。
Ⅱ.制備羥丙基甲基纖維素的聚乙二醇的凈化水溶液，分散二氧化鈦后，用Accela Cota、Manesty包衣設(shè)備將該溶液噴涂在片劑Ⅰ上，得到最終的片劑重為125mg。
靜脈注射液 用下述成分制備每ml含4mg活性化合物的不經(jīng)腸道的靜脈用配制劑 本發(fā)明的可溶活性化合物或化合物的混合物 4g 聚乙二醇 400g 乙醇 100g 無菌水至最終體積為 1000ml 將活性化合物或化合物的混合物溶解于聚乙二醇和乙醇中，加入無菌水至最終體積為1000ml，該溶液通過0.22μm過濾器過濾，立即分配裝入10ml無菌安瓿中密封。
膠囊 用下述成分制備含30mg活性化合物的膠囊 實施例3和4化合物的混合物 300g 乳糖 700g 微晶纖維素 40g 低取代的羥丙基纖維素 62g 凈化水 適量 將活性化合物的混合物與這些干成分混合，用磷酸氫二鈉?；摑裎锪霞訅和ㄟ^擠壓機使成球狀，置于流化壓干燥機干燥。
采用流化床包衣機，將500g上述小丸先涂復(fù)羥丙基甲基纖維素(30g)的水(600g)溶液，干燥后，第二次涂復(fù)下述溶液 包衣溶液 纖維素鄰苯二甲酸羥丙基甲酯 70g 十六醇 4g 丙酮 600g 乙醇 200g 最后，將包衣過的小丸填充進膠囊。
栓劑 采用熔結(jié)方法，由下述成分制備栓劑，每一栓劑含40mg活性化合物。
實施例2化合物 4g Witepsol H-15 150g 41℃下，將活性化合物與Witepsol H-15均勻混合，該熔融物料充填進預(yù)制的栓劑包囊中，凈重為1.84g。冷卻后，熱封包囊，每一栓劑含40mg活性化合物。
生物效應(yīng) 生物利用率 試驗動物的選擇 試驗采用鼠和狗兩種不同種類的動物，測量它們對同一化合物的生物利用率水平的變化。我們認為鼠是更適于生物利用率試驗的動物。這是基于我們認為肝代謝生物利用率最具突出效果，而與雌鼠和狗相比，在人體內(nèi)這類化合物的肝化謝模式更類似于雄鼠的肝代謝，另外，雄鼠對生物利用率的試驗結(jié)果與對狗的試驗結(jié)果相比，能得到更寬的“范圍”，因此，雄鼠試驗?zāi)Ｊ侥軐Σ煌衔锏纳锢寐式o出更清晰的差異。按另一方法所述，可預(yù)計雄鼠試驗的生物利用率與對狗用同一化合物所得試驗結(jié)果相比，可以得出如人對不同試驗化合物之間相應(yīng)差異的更好數(shù)值。
生物利用率的評定 通過計算未提高穩(wěn)定性和酶催分裂基團化合物的血漿濃度區(qū)(AUC)曲線間比值評定生物利用率，所述化合物即式Ⅰ或Ⅰ′中R被氫取代的化合物(本文定義為化合物A)，對鼠和狗按照1)本發(fā)明的相應(yīng)化合物經(jīng)十二指腸內(nèi)(id)給藥，2)化合物A靜脈內(nèi)(iv)給藥。使用治療學(xué)上相對低的劑量。在學(xué)述上公認這種方法評定生物利用率是有效的(參見M.Rowland and T.N.Tozer，Clinical Pharmacokinetics，2nd ed.，Lea & Febiger，London 1989，P42)。試驗數(shù)據(jù)列于表3。
藥效 在雄鼠和狗的靜脈和十二指腸測定酸分泌的抑制效力，當動物試驗數(shù)據(jù)對人體內(nèi)某種化合物的效力與本發(fā)明化合物相關(guān)性時，被認為對人的效力相當于測量雄鼠和狗之間的水平。效力數(shù)據(jù)列于表3。
生物試驗 神志清醒的雄鼠胃酸分泌的抑制試驗 采用Sprague-Dawley種雄鼠，在它們的胃(腔)的十二指腸上部瘺管插進套管，分別收集胃分泌物和給以試驗物質(zhì)，外科手術(shù)后恢復(fù)14天，然后開始試驗。
分泌試驗之前，受試動物禁食但不禁水20小時，通過胃套管反復(fù)洗胃，并且皮下給以6ml格林氏葡萄糖溶液，將五肽促胃酸激素和氯化氨甲酰膽堿(分別為20nmol/kg.h和110nmol/kg.h)輸液3.5小時(1.2ml/h，皮下)，刺激胃酸分泌，在此期間以30分鐘一次收集胃分泌物，在開始刺激后90分鐘，靜脈或十二指腸內(nèi)給以試驗物質(zhì)或賦形劑1ml/kg，胃液試樣用0.1mol/L氫氧化鈉滴定至pH7.0。根據(jù)滴定劑量和濃度計算胃酸排泄量結(jié)果，以一組4-5只鼠的平均反應(yīng)為基礎(chǔ)作進一步計算。給藥至1.0之前30分鐘內(nèi)，固定胃酸排泄量，給以試驗物質(zhì)或賦形劑后的期間，胃酸排泄量表示為分次反應(yīng)，根據(jù)試驗化合物和賦形劑激發(fā)的分次反應(yīng)計算抑制百分率。在劑量-反應(yīng)對數(shù)曲線上用圖解內(nèi)推法得到ED50值，或者假定劑量-反應(yīng)的所有曲線為同一斜率，根據(jù)單次劑量試驗測定ED50值。這些結(jié)果均根據(jù)給藥/賦形劑后第二小時胃酸分泌量測定。
雄鼠的生物利用率 采用Sprague-Dawley種成熟的雄鼠，試驗前一天，所有鼠均在麻醉下在左頸總動脈插入套管，靜脈試驗所用的鼠也在頸靜脈插入套管(參見V Popovic and P Popovic，J Appl Physiol 1960;15，727-728)。十二指腸試驗所用的鼠在十二指腸的頂部也插入套管。在頸背外置套管，這些鼠經(jīng)外科手術(shù)后分室關(guān)置，給試驗物質(zhì)前禁食但不禁水，靜脈內(nèi)和十二指腸內(nèi)給藥劑量相同(4μmol/kg)，1次約1分鐘(2ml/kg)。
給藥后每隔4小時從頸總動脈反復(fù)抽取血樣(0.1-0.4g)，在分析試驗化合物前盡快冷凍。
用線性斜方形規(guī)則測定化合物A的血液濃度區(qū)-時間曲線(AUC)，并將最后測定的血液濃度除以最后階段的消除率常數(shù)，根據(jù)本發(fā)明式Ⅰ化合物的十二指腸內(nèi)給藥計算化合物A的體內(nèi)生物利用率(F%) F(%)＝ (AUC(化合物A) 十二指腸內(nèi)給藥(本發(fā)明化合物))/(AUC(化合物A) 靜脈內(nèi)給藥(化合物A)) ×100 清醒的狗的胃酸分泌抑制和生物利用率 采用雄性或雌性的Harrier狗，從十二指腸瘺管給以試驗化合物或賦形劑，并且在室瘺插入套管，收集胃分泌物。
分泌試驗之前，這些動物禁食約18小時，但允許自由飲水，以產(chǎn)生約80%單獨最高分泌反應(yīng)的劑量輸液組胺二鹽酸鹽(12ml/h)刺激胃酸分泌4小時，連續(xù)30分鐘一次收集胃液。開始組胺輸液后1小時，以0.5ml/kg體重十二指腸內(nèi)或靜脈內(nèi)給以試驗物質(zhì)或賦形劑，滴定至pH7.0時測定胃液試樣的酸度，計算胃酸排出量。試驗物質(zhì)或賦形劑給藥后，收集的胃酸排出量表示為分次反應(yīng)，給藥至1.0之前的范圍內(nèi)固定胃酸排泄量。根據(jù)試驗化合物和賦形劑激發(fā)的分次反應(yīng)計算抑制百分率。在劑量-反應(yīng)對數(shù)曲線上用圖解內(nèi)推法得到ED50值，或者假定所有試驗化合物劑量-反應(yīng)曲線為同一斜率，根據(jù)單次劑量試驗測定ED50值，所記錄的全部結(jié)果均根據(jù)給藥后2小時胃酸排泄量測定。
給藥后間隔至3小時采血樣分析血漿中試驗化合物濃度。采集后30分鐘內(nèi)分離血漿和冷凍，然后分析，用線性斜方形規(guī)則，外推至無限時間，計算化合物A的AUC(血漿濃認區(qū)-時間曲線)，按上述鼠試驗?zāi)Ｊ接嬎惚景l(fā)明化合物在十二指腸內(nèi)給藥后化合物A的體內(nèi)生物利用率(F%)。
化學(xué)穩(wěn)定性 在37℃、不同pH值的緩沖水溶液中，按動力學(xué)方法推斷低濃度的本發(fā)明化合物的化學(xué)穩(wěn)定性。表3的結(jié)果表示pH7時的半衰期(t1/2)，就是說在此時間周期后，原先化合物量的一關(guān)保持未改變;pH2時的t10%，就是說在此時間周期后，原化合物的10%被分解。
生物試驗和穩(wěn)定性試驗的結(jié)果 表3給出本發(fā)明化合物可應(yīng)用的試驗數(shù)據(jù) 表3，生物試驗數(shù)據(jù)和穩(wěn)定性數(shù)據(jù) a)狗1 1.5μmol/kg-55% 狗2 1.5μmol/kg無作用 ED50值以一只狗為基準 b)一只狗的測定數(shù)值。
權(quán)利要求
1、式Ⅰ和式Ⅰ′化合物及其生理學(xué)上可接受的鹽，式Ⅰ和Ⅰ′如下
式中F在5或6位上，R是-CH2OCOOR′，其中R是含1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，或是芐基，或
R′是
，-(CH2)nCOOH或-(CH2)nSO3H，其中n是1-6。
2、按權(quán)利要求1的式Ⅰ′化合物，即，
4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺酰基]-1H-苯并咪唑-1-基碳酸甲·乙酯。
3、按權(quán)利要求1的式Ⅰ化合物的混合物，即，
5-氟和6-氟-2-[[(4-環(huán)丙基-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑-1-基碳酸甲·乙酯。
4、權(quán)利要求1化合物的鹽酸鹽。
5、含有權(quán)利要求1化合物作為活性成分的藥用組合物。
6、權(quán)利要求1定度的化合物在治療中的應(yīng)用。
7、權(quán)利要求1定義的化合物用于抑制包括人的哺乳動物的胃酸分泌。
8、權(quán)利要求1定義的化合物用于治療包括人的哺乳動物的胃腸炎癥。
9、抑制胃酸分泌的方法，該方法將權(quán)利要求1定義的化合物用于包括人的哺乳動物。
10、治療包括人的哺乳動物胃腸炎癥的方法，該方法將權(quán)利要求1定義的化合物用于哺乳動物。
11、抑制包括人的哺乳動物胃酸分泌的藥物制造中，權(quán)利要求1化合物的應(yīng)用。
12、治療包括人的哺乳動物胃腸炎癥的藥物制造中，權(quán)利要求1化合物的應(yīng)用。
13、權(quán)利要求1化合物的制備方法，該方法包括
a)式Ⅱ或Ⅱ′化合物與氯甲基碳酸烷基酯或氯甲基碳酸芐酯反應(yīng)，式Ⅱ和Ⅱ′如下
式中Z是金屬陽離子，例如Na+、K+、Li+或Ag+，也可以是季銨離子，例如四丁基銨，或
b)式中Z是羥甲基的式Ⅱ或Ⅱ′化合物與式Ⅲ化合物反應(yīng)，式Ⅲ如下
式中R′的定義同前，X是氯或咪唑或?qū)ο趸窖趸蚬δ艿刃Щ鶊F，或
c)當含被護羥烷基作為酯時，式Ⅰ或Ⅰ′化合物的R′取代基的酯水解;
得到式Ⅰ或Ⅰ′化合物，必要時，得到的化合物可轉(zhuǎn)化為鹽或純異構(gòu)體。
14、1-羥甲基-5-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺酰基]-1H-苯并咪唑和1-羥甲基-6-氟-2-[[(4-環(huán)丙基甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺?；鵠-1H-苯并咪唑。
15、1-羥甲基-4-氟-2-[[(4-甲氧基-2-吡啶基)甲基]亞磺酰基]-1H-苯并咪唑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種氨基酸肥及其制法，這種氨基酸肥的有效成分包括氨基酸水解液、磷酸二氫鉀，亞硫酸氫鈉，硫酸鋅，硫酸錳以及幾種微量元素，上述的氨基酸水解液可以直接采用胱氨酸生產(chǎn)中的一次母液，也可以用人或禽畜的毛發(fā)、皮、蹄角、血等含角質(zhì)蛋白的物質(zhì)經(jīng)水解制成。本發(fā)明的氨基酸肥稀釋后可噴施于農(nóng)作物、蔬菜、果樹、花卉的枝葉上，肥效高，用量小，成本低。
文檔編號C05F1/00GK1052654SQ9110001
公開日1991年7月3日 申請日期1991年1月8日 優(yōu)先權(quán)日1991年1月8日
發(fā)明者王秀云, 張洪昌 申請人:王秀云