專(zhuān)利名稱(chēng)：艾滋病病毒速殺劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種滅菌劑，特別是對(duì)艾滋病病毒的速殺劑。
中國(guó)專(zhuān)利名稱(chēng)為“液體洗消劑”、申請(qǐng)?zhí)枮?8100230和名稱(chēng)為“固體肝炎及艾滋病毒消洗靈”，申請(qǐng)?zhí)枮?9102226分別公開(kāi)了一種洗消劑和一種消洗靈，前者主要采用次氯酸鈉，后者則采用氯化磷酸鈉來(lái)作殺菌劑，它們均為氯制劑。根據(jù)艾滋病病毒分離和抗體測(cè)定，HIV是艾滋病的病源。HIV屬逆轉(zhuǎn)錄RNA病毒，形態(tài)為典型的D型病毒，有偏心核，逆轉(zhuǎn)錄酶需Mg++離子，主要的核心蛋白生物學(xué)特性是嗜T4淋巴細(xì)胞。細(xì)胞在感染病毒后1-2周后大量釋放病毒，形成融合細(xì)胞，最后細(xì)胞被破壞。病毒核酸HIV病毒是人的逆轉(zhuǎn)錄病毒，有三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的病毒基因，進(jìn)一步的分子生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，HIV有很大的遺傳變異，包括核酸的點(diǎn)變異、缺失或插入。細(xì)胞外層的囊膜蛋白(GP 120)很容易改變，由逆轉(zhuǎn)錄酶活性來(lái)確定其滅活程度。采用氯制劑來(lái)殺滅艾滋病病毒不足之處是殺滅速度慢，殺滅效率低，所需的劑量大，且會(huì)有微毒。
本發(fā)明的目的在于避免上述現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，提供一種毒殺滅速度快，殺滅效率高，所需的劑量小，且無(wú)毒的艾滋病病毒速殺劑。
本發(fā)明的艾滋病病毒速殺劑由五碳雙縮醛、十二烷基苯甲基二甲基溴化銨、T-肽、α-丁內(nèi)酯、乙醇和去離子水組成，其重量百分比為五碳雙縮醛 1.0～2.5十二烷基苯甲基二甲基溴化銨 2.8～5.5T-肽 0.15～0.4乙醇(95%) 15.0～35.0去離子水 60.0～80.0本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下方法來(lái)達(dá)到a.將十二烷基苯甲基二甲基溴化銨加入乙醇(95%)中，升溫至45±2℃，攪拌溶解1小時(shí);
b.將T-肽、α-丁內(nèi)酯溶解于去離子水中，再加入五碳雙縮醛，溶解完全;
c.將上述a得到的乙醇溶液與上述b得到的水溶液混合均勻，測(cè)定其pH值至6～7即可。
五碳雙縮醛是一種新型消毒劑，其結(jié)構(gòu)中的兩個(gè)醛基可與細(xì)菌細(xì)胞的氨基發(fā)生反應(yīng)，對(duì)細(xì)胞外層起封閉作用，能滅活細(xì)胞酶，從而達(dá)到滅菌作用。十二烷基苯甲基二甲基溴化銨是一種陽(yáng)離子表面活性劑，因其攜帶正電荷的表面活性離子，有抑菌作用。α-丁內(nèi)酯具有血漿疫苗殺菌作用、速殺劑中加入微量的α-丁內(nèi)酯可大大增加其滅活能力。T-肽是一種帶有酰胺基團(tuán)的化合物，是蛋白質(zhì)水解的中間產(chǎn)物，稱(chēng)為縮氨酸，有抑菌作用。這幾種組分配制而成的速殺劑具有極強(qiáng)的滅活能力，能滅活周質(zhì)酶、堿性磷酸酶和細(xì)胞酶，從而達(dá)到快速的滅菌作用。
以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳述按下表所列數(shù)據(jù)選取各組分，用上述方法在1000升不銹鋼反應(yīng)釜中配制。
以下為艾滋病病毒速殺劑滅活艾滋病毒(HIV)效果的試驗(yàn)結(jié)果。
一、病毒感染試驗(yàn)受試病毒為HIV BA-2株，試驗(yàn)時(shí)于50ul病毒懸液中加入1ml MT4細(xì)胞懸液，室溫吸附40分鐘后，2000轉(zhuǎn)/分，離心沉淀細(xì)胞，用200ul RPMI1640培養(yǎng)基懸浮沉淀的細(xì)胞，在96孔微量培養(yǎng)板上用MT4細(xì)胞滴定病毒滴度。每稀釋度病毒做四孔，以細(xì)胞病變作為病毒感染指標(biāo)，按Reed-Muench法計(jì)算TCID50。
二、中和劑試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)所有中和劑為含1%甘氨酸+0.5%吐溫80的磷酸鹽緩沖液，用以下八組試驗(yàn)考核中和效果，重復(fù)三次。
1.(速殺劑+病毒)+中和劑50ul 1∶3速殺劑與50ul病毒懸液混合作用1分鐘后，加入50ul中和劑，中和30分鐘。
2.中和劑+病毒50ul中和劑與50ul病毒懸液混合作用30分鐘。
3.(速殺劑+中和劑)+病毒50ul 1∶3速殺劑與50ul中和劑混合作用30分鐘后，再與50ul病毒懸液作用1分鐘。
4.速殺劑+病毒50ul 1∶3速殺劑與50ul病毒懸液混合作用1分鐘。
以上四組作用后按方法一滴定病毒感染滴度。
5.病毒對(duì)照按方法一進(jìn)行。
6.(速殺劑+中和劑)+細(xì)胞50ul 1∶3速殺劑與50ul中和劑混合作用30分鐘后，加入MT4細(xì)胞懸液，40分鐘后按方法一滴定培養(yǎng)。
7.中和劑+細(xì)胞50ul中和劑與1ml MT4細(xì)胞混合40分鐘后按方法一滴定培養(yǎng)。
8.細(xì)胞對(duì)照培養(yǎng)孔中細(xì)胞，不加病毒。
三、病毒滅活試驗(yàn)取50ul不同濃度的速殺劑與50ul病毒懸液混合作用一分鐘后，加入50ul中和劑，中和作用30分鐘，按方法一檢測(cè)病毒感染滴度，同時(shí)設(shè)立未滅活的病毒對(duì)照和正常細(xì)胞對(duì)照，重復(fù)五次，按下式計(jì)算滅活率
滅活率(%)＝ (對(duì)照組平均病毒感染滴度-消毒組平均病毒感染滴度)/(對(duì)照組平均病毒感染滴度) ×100%檢測(cè)結(jié)果表1中和劑試驗(yàn)結(jié)果組別 平均感染滴度(TCID50)1 1.2332 4.8723 4.9704 0.8745 5.242從表1可見(jiàn)，中和劑可中和速殺劑對(duì)病毒的滅活作用，中和劑及中和產(chǎn)物對(duì)病毒無(wú)明顯抑制作用。此外，中和劑及中和產(chǎn)物對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞無(wú)明顯毒性，細(xì)胞對(duì)照生長(zhǎng)良好。
表2速殺劑對(duì)HIV的滅活效果速殺劑稀釋度 平均滅活率(%)1:1 1001:3 99.991:9 99.37
表2結(jié)果說(shuō)明，病毒與速殺劑原液作用1分鐘未見(jiàn)引起細(xì)胞病變，1∶3稀釋的速殺劑在一分鐘內(nèi)可將HIV滅活99.99%，1∶9稀釋速殺劑作用1分鐘不能達(dá)到消毒要求。
急性毒性試驗(yàn)小鼠LD50＝11071.3mg/kg眼刺激及皮膚斑貼試驗(yàn)對(duì)家兔急性眼刺激分指數(shù)(最高值)＝4;局部皮膚刺激積分為0。結(jié)論是本發(fā)明所述的速殺劑屬無(wú)毒產(chǎn)品。對(duì)兔眼基本無(wú)刺激性，對(duì)家兔皮膚無(wú)刺激作用。
本發(fā)明的速殺劑具有殺滅艾滋病病毒速度快、殺菌效率高，所需劑量小，且無(wú)毒的優(yōu)點(diǎn)。
權(quán)利要求
1.一種艾滋病病毒速殺劑，其特征在于由五碳雙縮醛、十二烷基苯甲基二甲基溴化銨、T-肽、α-丁內(nèi)酯、乙醇和去離子水組成，其重量百分比為五碳雙縮醛 1.0～2.5十二烷基苯甲基二甲基溴化銨 2.8～5.5T-肽 0.15～0.4α-丁內(nèi)酯 0.02～0.5乙醇(95%) 15.0～35.0去離子水60.0～80.0
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的艾滋病病毒速殺劑，其特征在于a.將十二烷基苯甲基二甲基溴化銨加入乙醇(95%)中，升溫至45±2℃，攪拌溶解1小時(shí);b.將T-肽、α-丁內(nèi)酯溶解于去離子水中，再加入五碳雙縮醛，溶解完全;c.將上述a得到的乙醇溶液與上述b得到的水溶液混合均勻，測(cè)定其pH值至6～7即可。
全文摘要
一種由五碳雙縮醛、十二烷基苯甲基二甲基溴化銨、T-肽、α-丁內(nèi)酯、乙醇、去離子水組成的艾滋病病毒速殺劑。其中五碳雙縮醛的兩個(gè)活潑醛基可與蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，T-肽和α-丁內(nèi)酯可大大增加其滅活能力，同時(shí)能快速滅活周質(zhì)酶、堿性磷酸酶和細(xì)胞酶。本發(fā)明的速殺劑具有殺滅艾滋病病毒速度快、殺菌效率高，所需劑量小，且無(wú)毒的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A01N37/00GK1074800SQ92100520
公開(kāi)日1993年8月4日 申請(qǐng)日期1992年1月27日 優(yōu)先權(quán)日1992年1月27日
發(fā)明者黃標(biāo)春 申請(qǐng)人:黃標(biāo)春