專利名稱：多用性活性酶制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)、林業(yè)、畜牧業(yè)上使用的一種多用性活性酶制劑(本制劑在各地取名有多用性活性酶制劑;植物增效酶制劑;玫煙色擬青霉制劑;綠寶酶等，其代號(hào)有“808”和系列產(chǎn)品“808-1”)，它可以提高糧、棉、油、果林、牧草、花卉等多種綠色闊葉植物的產(chǎn)量和質(zhì)量，還可以作為雞、鴨、豬和牛的飼料添加劑，提高其產(chǎn)肉或蛋、奶和毛的數(shù)量。本發(fā)明還有一個(gè)重要的目的，是為農(nóng)、林業(yè)提供一種兼治農(nóng)、林害蟲的生物殺蟲制劑。
當(dāng)前，農(nóng)、林、牧業(yè)方面已有多種植物保護(hù)措施。五十年代至今，形成的以化學(xué)農(nóng)藥為主及若干生物、物理的防治手段，防治了農(nóng)作物病蟲害，發(fā)展了生產(chǎn)。但長期使用化學(xué)農(nóng)藥，造成環(huán)境中農(nóng)藥殘留不斷增加，生態(tài)失調(diào)，人們引以為戒。而其它植物保護(hù)措施覆蓋面不大。再者，七十年代后，人們開拓了某些化學(xué)物質(zhì)對(duì)植物的促生和催熟作用，如現(xiàn)行的葉面寶、多效好、噴施寶、多效唑及金邦素等等，種類繁多。雖然它們?cè)谵r(nóng)業(yè)上起到了增產(chǎn)作用，但仍未解決其殘留毒性的問題，又因其有效期短須多次使用，經(jīng)濟(jì)效益不甚高，而且不能兼治農(nóng)田蟲害。本發(fā)明針對(duì)上述存在的問題，創(chuàng)造了一種純屬生物制品的制劑，即用微生物手段合成廣譜的生物體所需要的酶制劑，主要表現(xiàn)在(1)用途廣，它可作為多種農(nóng)、林作物的生長調(diào)節(jié)劑，并能兼治農(nóng)、林的若干害蟲，同時(shí)也可作為畜牧業(yè)的飼料添加劑;(2)經(jīng)濟(jì)效益高，有效期長，一茬(或一年)作物僅用一次，增產(chǎn)的幅度可在15至20%以上;(3)對(duì)環(huán)境食品無污染和殘留。
發(fā)明目的本發(fā)明的目的在于用微生物手段保護(hù)植物，改善農(nóng)田生態(tài)環(huán)境質(zhì)地，提高農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量。
本

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的內(nèi)容(1)提高農(nóng)、林業(yè)產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量，本制劑純屬生物制品，它可促進(jìn)綠色闊葉植物的光合作用，提高植物葉片的光合作用效率，起到促進(jìn)生長，提高其產(chǎn)量和質(zhì)量的作用。可提高水稻、小麥、玉米、薏米(藥用)、小米、高梁、谷子、甘蔗、甜菜、棉花、苧麻、油菜、大豆(包括各種豆類)、梨、蘋果、桃、李、棗、荔枝、龍眼、葡萄、瓜類、大白菜、牧草、茶葉等作物的產(chǎn)量15至20%以上;(2)本制劑又屬于一種昆蟲病原真菌的微生物殺蟲劑，在日均溫度17至25℃;相對(duì)濕度85%的環(huán)境中，可兼治農(nóng)、林業(yè)上若干害蟲，起到降低化學(xué)農(nóng)藥用量的作用;(3)本制劑富含廣譜的酶蛋白和蛋白肽，能促進(jìn)生物體的各種代謝過程，初步試驗(yàn)證明，它又是飼養(yǎng)業(yè)上的一種生物型的飼料添加劑，它可提高雞、鴨、豬和牛的產(chǎn)肉或蛋、奶、毛的數(shù)量，有待進(jìn)一步探索;(4)本制劑經(jīng)過國家規(guī)定的有關(guān)安全性考察，它對(duì)環(huán)境無毒無殘留，對(duì)人畜安全，已通過安全性鑒定。
本發(fā)明所能解決的問題本發(fā)明如能得到廣泛的實(shí)施，則農(nóng)、林、牧業(yè)上可能解決的問題是(1)在現(xiàn)有的土地面積上提高農(nóng)、林、牧及家禽、家畜的產(chǎn)量和質(zhì)量，滿足人們?nèi)找嬖鲩L的物質(zhì)需求;(2)降低食品中化學(xué)農(nóng)藥的殘留量，造福子孫后代。
本發(fā)明的生產(chǎn)和使用方法是通過以下技術(shù)方案得以實(shí)施的，本制劑的生產(chǎn)和使用方法如下
1、制劑生產(chǎn)方法(1)本制劑產(chǎn)生菌是半知菌類昆蟲病原真菌-玫煙色擬青霉北京變種(常規(guī)菌株)，在常規(guī)條件下擴(kuò)大繁殖，制成的固體或液體種子。種子形態(tài)是該菌的分生孢子或菌絲段。計(jì)量單位是億個(gè)/克或億個(gè)/毫升;(2)本制劑發(fā)酵培養(yǎng)基是玉米粉(指所有種類的玉米碾磨而成的玉米粉);(3)本制劑發(fā)酵條件是，料的溫度20至24℃;含水量65至70%;接種量按每克玉米粉配種子0.3億個(gè)的比例接種。實(shí)例100公斤玉米粉，加入種子33000億，加水65至70公斤，攪拌均勻后置入發(fā)酵槽內(nèi)，在20至24℃條件下發(fā)酵50至60小時(shí)，或當(dāng)菌量達(dá)2×109/克時(shí)終止發(fā)酵;(4)風(fēng)干發(fā)酵物終止發(fā)酵時(shí)即風(fēng)干，并磨成30至40目的細(xì)度(呈粉末狀)，并加以密封包裝備用。說明書附圖
是本制劑的生產(chǎn)示意圖。
2、制劑使用方法本制劑是一種粉狀物，在農(nóng)作物上使用時(shí)，需加水稀釋成所需濃度的懸浮液，用壓力噴霧器噴灑于農(nóng)作物的葉部。其使用方法(1)使用部位主要使用于植物的葉背面，禾本科植物苗期使用，則噴灑于植株上即可;(2)使用劑量禾本科植物苗期每畝使用劑量是100至120克，棉花、油菜使用濃度是0.9%;木本植物(如各種果樹)使用濃度在0.5至0.7%，均一年使用一次;(3)最佳使用時(shí)期使用在作物生長的早期，禾本科植物在種后30至40天，果樹則在謝花后20至30天，棉花在種后30至40天，油菜宜在5、6葉時(shí)，寒地牧草宜在日均溫度15℃以上時(shí)用;(4)施用808制劑的效果實(shí)例小麥單株小穗增加0.6個(gè);有效小穗增加0.7個(gè);穗粒數(shù)增加2、3粒;畝穗數(shù)量增加3萬穗;千粒重增加2克;畝產(chǎn)量增加88.4公斤。
水稻株高增加3.5厘米;穗長增加1.1厘米;總實(shí)粒數(shù)增加4%;總粒數(shù)增加6%;總實(shí)粒重增加2%;千粒重減少0.6克，畝產(chǎn)量390公斤比對(duì)照增加76.5公斤。
玉米鮮重增加10%;干重增加36%。
棉花生長中期取樣測定結(jié)果，棉桃增加36%;棉桃和花的總量增加38%。
柑桔葉長增加1.25厘米;葉寬增加1.12厘米;梢長增加7厘米;單果重增加10.9%;糖量自10.46上升到11.32。
蘋果促進(jìn)苗木的生長，按主桿周長與其生長量之比值，比對(duì)照的高度增加3%;梢長增加43%，葉數(shù)增加36。糖量增加1.6%。
大豆提高大豆產(chǎn)量15%，并降低其蚜蟲和病毒病的危害率。
作為雞飼料添加劑的初試結(jié)果，新雞產(chǎn)蛋量增加10%;老雞產(chǎn)蛋量增加20至30%，可替代部分進(jìn)口魚粉。
本制劑的生化性質(zhì)本制劑主要有效成份是酶蛋白，其生化分析結(jié)果1、蛋白質(zhì)分析含蛋白質(zhì)7至10%，其組成氨基酸有17種。
2、酶及其同工酶分析主要活性酶有兩大類(1)廣譜呼吸酶類其中的酶活性強(qiáng)和較強(qiáng)的9種醛氧化酶、酸性磷酸酶、酯酶、延胡索酸酶、亮氨肽酶、蘋果酸脫氫酶、、蘋果酸酶、四唑氧化酶和乳酸脫氫酶;酶活性弱的4種醇脫氫酶、磷酸甘油脫氫酶、羥基丁酸脫氫酶和山梨醇脫氫酶。它們大都和植物的呼吸代謝有關(guān)，其中有的就是三羧酸循環(huán)酶系中的成員，如蘋果酸脫氫酶，它廣泛存在于植物的各個(gè)組織中。在線粒體上，它能催化蘋果酸變?yōu)椴蒗Ｒ宜岬姆磻?yīng);在細(xì)胞質(zhì)中，它又能將草酰乙酸還原為蘋果酸，因而是糖代謝中的一個(gè)重要的酶。其反應(yīng)式為

同樣，延胡索酸酶也是三羧酸酶系中的一員，能使檸檬酸變?yōu)樘O果酸。乳酸脫氫酶是無氧代謝中的一種酶，它能把丙酮酸變?yōu)槿樗?又如酯酶、亮胺肽酶和酸性磷酸酶，這些酶在生物體內(nèi)廣泛存在并參與了各種反應(yīng)，酯酶還有解毒作用。(2)廣譜蛋白酶A、蛋白質(zhì)和多肽在電泳譜上可見本制劑的蛋白質(zhì)和多肽各有14條帶之多。而多肽類物質(zhì)在神經(jīng)活動(dòng)、免疫調(diào)節(jié)等生命活動(dòng)中具有十分重要作用;B、氨基酸種類從氨基酸組成分析得出的結(jié)論是組成蛋白質(zhì)的氨基酸有17種;C、可利用氨基酸種類本制劑產(chǎn)生菌在水洗瓊脂平板上能分別利用17種氨基酸形成菌絲體，說明該菌體外可吸收利用的氨基酸種類也是廣譜的。從A、B、C三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果說明，本制劑的蛋白質(zhì)合成和水解酶也都是廣譜的。(3)產(chǎn)生菌酶學(xué)特性制劑酶活性是依賴于產(chǎn)生菌酶學(xué)特性。A、呼吸酶產(chǎn)生菌具有11種呼吸酶，占制劑13種呼吸酶的85%;B、蛋白質(zhì)和多肽產(chǎn)生菌具有的蛋白質(zhì)和多肽類達(dá)10條帶之多。占制劑14條帶的75%;C氨基酸總量產(chǎn)生菌氨基酸總量達(dá)16.4%，而制劑氨基酸總量為7至10%。A、B、C三點(diǎn)除說明制劑酶蛋白主要依賴于產(chǎn)生菌的生物學(xué)特性之外，還取決培養(yǎng)基的生物學(xué)特性。
上述試驗(yàn)結(jié)果及分析，從分子生物水平揭示了本制劑酶種類廣譜性，從而初步闡明在應(yīng)用實(shí)踐上呈現(xiàn)多功能的結(jié)果。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的最好方式808多用性活性酶制劑是由生物合成的，其制劑應(yīng)用效果取決于產(chǎn)生菌的生物學(xué)特性的強(qiáng)度。要保持或增強(qiáng)產(chǎn)生菌的性能必須開展種的研究工作。如果由研究單位供應(yīng)用于大量生產(chǎn)的種子;生產(chǎn)單位承擔(dān)大量培養(yǎng)的任務(wù)。則1、可以增強(qiáng)或保持種的活性，增強(qiáng)本制劑的應(yīng)用效果。
2、生產(chǎn)成本下降，生產(chǎn)部門只要提供材料、場地及曲盤培養(yǎng)、自然風(fēng)干、塑料袋包裝等過程的費(fèi)用?？墒∪プ栽嚬堋N子罐或克氏瓶培養(yǎng)的設(shè)備費(fèi)支出。
3、按照這一方式，所有的農(nóng)林、山區(qū)及貧困地區(qū)均可引進(jìn)種子，自行發(fā)酵使用，所創(chuàng)造效益則更大。
權(quán)利要求
1.一種適用于農(nóng)、林、牧及飼料業(yè)上使用的多用性活性酶制劑，由13種呼吸酶(及其同工酶)組成，其特征在于產(chǎn)生菌玫煙色擬青霉北京變種(SP.808)的生物合成，按產(chǎn)生菌分生孢子0.3億，玉米粉(指所有種類玉米碾成的玉米粉)1克、水0.7毫升的比例給量，在28至30℃發(fā)酵50至60小時(shí)，并經(jīng)風(fēng)干后得到的生物制劑，用于農(nóng)作物上具有促進(jìn)作物生長，兼治作物害蟲的長效作用，可提高農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量，而且可降低化學(xué)農(nóng)藥的污染與殘留量，用于飼養(yǎng)動(dòng)物，是一種優(yōu)良的飼料添加劑，可取代部分進(jìn)口魚粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多用性活性酶制劑，其特征是在于包含呼吸酶(及其同工酶)13種(即酸性磷酸酶、醇脫氫酶、醛氧化酶、酯酶、延胡索酸酶、磷酸甘油脫氫酶、羥基丁酸脫氫酶、乳酸脫氫酶、蘋果酸脫氫酶、蘋果酸酶、亮氨肽酶、山梨醇脫氫酶、四唑氧化酶)及蛋白肽14條帶，粗蛋白總量10%，其組成氨基酸17種(有天門冬酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、賴氨酸、精氨酸)，作為植物體的微生態(tài)調(diào)節(jié)劑和動(dòng)物飼料添加劑的活性物質(zhì)，這些特征與已登記專利的擬青霉其他菌株生理特征完全不同。
3.如權(quán)利要求1所述的酶制劑，其制劑特征呈淺粉灰色粉末狀物，應(yīng)用范圍廣，如糧、棉(包括麻類)、油、果、蔬菜、花卉和茶葉等，此外還可作為雞、鴨、豬、牛、魚、蝦等的飼料添加劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種多用性活性酶制劑，內(nèi)含廣譜呼吸酶(及其同工酶)13種，其組成氨基酸17種。在農(nóng)、林業(yè)上用于水稻、玉米、小麥、豆類、瓜類、油菜、棉花、果樹、牧草、麻等作物，具有促進(jìn)作物生長，兼治若干害蟲的作用，提高作物產(chǎn)量15至20％，在畜牧業(yè)上，作雞、鴨、豬、牛等的飼料添加劑，也具有促進(jìn)動(dòng)物生長，提高其肉或蛋、奶的產(chǎn)量和質(zhì)量的作用，并可代替部分進(jìn)口魚粉。本制劑生產(chǎn)工藝簡單，生產(chǎn)成本低廉，對(duì)于環(huán)境無毒無殘留，其綜合的經(jīng)濟(jì)、生態(tài)、社會(huì)效益較大。
文檔編號(hào)A23K1/165GK1073419SQ9210481
公開日1993年6月23日 申請(qǐng)日期1992年6月29日 優(yōu)先權(quán)日1992年6月29日
發(fā)明者方祺霞 申請(qǐng)人:方祺霞