專利名稱：暗紋東方豚的人工繁殖技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種特種魚類的人工繁殖，特別是一種暗紋東方豚的人工繁殖技術(shù)。
暗紋東方豚(Fugu obseurus)隸屬于豚形目豚科東方豚屬，是一種江海洄游性魚類，俗稱“河豚”，肉鮮味美，中國、日本、朝鮮等國人們歷來喜食。但格昴貴，市售價每公斤約1000-1200元人民幣。此外，暗紋東方豚還有很高的綜合利用價值，由其內(nèi)臟提取的毒素價格高達(dá)5-7萬美元/公斤，其艷麗的魚皮亦是制革的上等原料。因此，河豚是一種具有較高開發(fā)價值的名、特、優(yōu)、新水產(chǎn)品。
由于人類經(jīng)濟活動的影響，暗紋東方豚的自然資源劇減，而市場需求卻有增無減。針對這一矛盾，暗紋東方豚的人工繁殖應(yīng)運而生，但由于苗種的繁育技術(shù)不過關(guān)，苗種供給不足，嚴(yán)重制約了人工養(yǎng)殖的發(fā)展。暗紋東方豚是一種溯河性產(chǎn)卵魚類，必須經(jīng)過鹽化、淡化兩個過程，性腺才能發(fā)育成熟，它具有許多純海水性或純淡水性魚類所不具有的獨特的生理、生態(tài)及生物學(xué)特征，其繁殖生態(tài)條件較為苛刻，而前人對其有關(guān)生物、生態(tài)、生理、繁殖等特性知之甚少，因此，暗紋東方豚的人工繁殖是一個懸而未決的技術(shù)難題。1979年，江蘇省淡水水產(chǎn)研究所賈長春等對具有相似屬性的另一種河豚——弓斑東方豚(Fugu ocellatus)的人工繁殖作了初步研究，(水產(chǎn)科技情報，79-7)通過繁殖季節(jié)采捕天然河豚親魚進行激素催產(chǎn)、人工授精、室內(nèi)孵化等措施人工繁殖，但效果不甚理想，人繁三率(催產(chǎn)率、受精率、孵化率)均很低。
本發(fā)明結(jié)合暗紋東方豚的繁殖生態(tài)學(xué)和組織細(xì)胞學(xué)等的研究，在充分掌握暗紋東方豚繁殖生態(tài)環(huán)境和性腺生長發(fā)育規(guī)率的基礎(chǔ)上，利用魚類繁殖是內(nèi)在生理變化和外界環(huán)境協(xié)同作用的原理，通過加強親魚馴養(yǎng)與培育，模擬自然環(huán)境，激素調(diào)控等手段，促進親魚性腺的發(fā)育成熟與排放，并加強孵化期的管理與生態(tài)調(diào)控，以實現(xiàn)提高河豚人工繁殖的催產(chǎn)率、受精率和孵化率的目的。
本發(fā)明對人工繁殖的三個基本環(huán)節(jié)親魚的馴養(yǎng)與培育、催情產(chǎn)卵、孵化中的技術(shù)內(nèi)容進行了科學(xué)的改進與創(chuàng)新，其特征是在充分掌握暗紋東方豚繁殖生態(tài)環(huán)境和性腺生長發(fā)育規(guī)律的基礎(chǔ)上，模擬自然生態(tài)環(huán)境，利用激素調(diào)控，以實現(xiàn)促進親魚性腺的發(fā)育成熟與排卵，同時對孵化期加強生態(tài)管理，促進人工繁殖的催產(chǎn)率、受精率、孵化率的大幅提高，具體技術(shù)步驟為A.親魚的馴養(yǎng)與培育選擇以下其一a.天然采捕親魚的馴養(yǎng)在3-5月季節(jié)，收購從天然水域直接采捕的河豚親魚、選擇無病、無傷、體格健壯、性腺發(fā)育至IV期以上，腹部外觀膨大，手感松軟而有彈性，生殖孔發(fā)紅的親魚，取雄魚數(shù)量不少于雌魚數(shù)量，運輸至室內(nèi)水泥池中馴養(yǎng)，池水面積30-100M2，水深50-100CM，溶氧6mg/L以上，光照500-1000Lux，微流水，日換水1-2次，先投喂動物性餌料，待親魚開口攝食后，再逐步投以混合餌料，每天投餌數(shù)次，同時向池水加水至0.8-1.5M，并每天向池中沖水?dāng)?shù)次；b.親魚的自行培育10月底-11月初，在沙礫底質(zhì)池中，以鹽度逐級遞增方式模擬海水培育，每級3-5天，池水深1.5-2M，水溫10-15℃，放養(yǎng)密度每畝60-100尾，每天投餌數(shù)次，來年2月初，再以鹽度逐級遞減方式過渡至淡水培育，并逐步升高池水溫至16-26℃，投餌中加入維生素E，并不定期向池中沖水，以滿足親魚性腺最后成熟發(fā)育的流水環(huán)境；B.催情產(chǎn)卵采用生理生態(tài)相結(jié)合的方法，對魚體直接注射外源激素催情，使親魚性腺從IV期過渡至V期，并使之排卵、排精，時間在4月份，于催產(chǎn)池中進行，池水10-30M2，水深40-60CM，水溫16-26℃，溶氧6mg/L以上，效應(yīng)時間40-72小時，采用濕法或干法人工授精；C.孵化在孵化池中，水溫16-26℃，溶氧6mg/L以上，光照500-1000Lux，將卵灑于粘卵板上掛置于孵化網(wǎng)箱中，將網(wǎng)箱置于孵化池中靜水孵化或用孵化桶流水孵化，孵化時間6-8天，孵化過程中需采取防霉措施。
a中天然采捕的親魚雌魚體重應(yīng)選擇600克以上，雄魚體重400克以上，雌雄比例1∶1-2，采捕后用雙層尼龍袋運輸，每袋1-2尾，運輸時間超過3小時的，中途應(yīng)充氧換水，運輸過程中防震，以防止性腺退化；若親魚在采捕或運輸過程中受傷，每天用1PPm孔雀石綠藥溶20-30分鐘或1PPmKMnO4藥溶5-10分鐘，待親魚傷愈恢復(fù)后，再放入大池中馴養(yǎng)；b中模擬海水培育的鹽度以2-5‰、7-10‰，15-20‰、30-33‰4級遞增，來年再反向4級遞減過渡至淡水培育。
B中外源催情激素為鯉魚腦垂體(PG)、促黃體生成激素釋放激素類似物(LRH-A)、人絨毛膜促性腺激素(HCG)三種單獨使用或兩兩混合使用，催情劑量雌魚LRH-A80-180ug/kg或HCG2000-4000Iu/g，或2-10mg PG加50-150ug LRH-A/kg，或HCG500-1000ug加50-150ugLRH-A/kg，雄魚劑量減半，注射方式為體腔或背部肌肉注射，注射次數(shù)1-3次，兩次注射間隔時間12-24小時，人工授精后，將卵漂洗2-3次，即可送至孵化程序。
C中的防霉措施是用1PPm孔雀石綠潑灑，但胚胎發(fā)育敏感期及出膜前后忌用，孵化過程中應(yīng)加強監(jiān)控，每隔1-2小時，測水溫，每天觀察溶氧2-3次。
實施例3月中下旬，在常熟與鎮(zhèn)江段收集親魚20組，因受捕撈工具限制，親魚大多有傷，鰭條發(fā)白損傷，雌魚體重在600克以上，雄魚體重400克以上。雌魚腹部膨大，手感松軟而有彈性，生殖孔閉鎖或微張，選擇前進行雌、雄鑒別，雌、雄比例1∶1。采用雙尾尼龍袋充氧運輸，運輸時間5小時，中途換水充氧1次，下墊以塑料泡沫箱防震。親魚馴養(yǎng)在溫室的水泥池進行，面積30m2，水深50-60cm，水溫17-20℃，弱光。采用水泵沿池壁45°角沖水造成流水環(huán)境，同時，每天換水1/3，溫室周圍環(huán)境安靜。因親魚有傷，每天用1PPm孔雀石綠藥浴30分鐘，一星期后，親魚體質(zhì)恢復(fù)，逐漸投以螯蝦肉、羅非魚肉，誘導(dǎo)親魚開口吃食。親魚開口后，逐步投以魚肉糜與鰻魚飼料混合而成的餌料團，并加以促性腺發(fā)育物質(zhì)維生素E等，同時加水至1.2m，催產(chǎn)前每天沖水1次，促進親魚性腺成熟。催情場所溫室20m2的水泥池，水深60cm。4月15日至4月25日用鯉魚腦垂體(PG)、促黃體釋放激素類似物(LRH-A2)混合注射。雌魚2-10mgPG加50-150ngLRH-A/kg，雄魚劑量減半，體腔注射，分二次注射，間隔時間12小時，注射第二針后，隨時檢查卵的發(fā)育情況，接近產(chǎn)卵時間時，每隔2小時檢查一次，用挖卵器挖取少許卵于顯微鏡檢查，若卵核偏位，卵粒正規(guī)，卵色晶瑩透明時，輕按腹部有卵粒流出時，即采卵、授精。采卵時，2人分別提出雌、雄魚頭部，使雌、雄魚泄殖孔相對，右手自上而下，緩緩?fù)茢D，把精、卵擠入干燥的塘瓷盆內(nèi)，用羽毛輕輕攪拌2-3分鐘，漂洗3次。將卵灑于粘卵板上，孵化，共獲受精卵36余萬粒，受精率75％。孵化采用粘卵板靜水孵化方式進行，共獲出膜仔魚約28萬尾，孵化率78％。孵化設(shè)備由粘卵板和孵化網(wǎng)箱組成，粘卵板由50目的聚乙烯網(wǎng)布做成，將直徑焊成矩形架，而后將網(wǎng)布縫上。受精卵粘于粘卵板后，將粘卵板掛置于50目網(wǎng)箱中孵化。用100目篩絹過濾后的東太湖水作為孵化用水，溶氧7mg/L以上，孵化溫度18-20℃。除敏感期及出膜前后，用1PPm孔雀石綠潑灑防霉。光照條件500lux，孵化時間140-216小時，孵化過程中，每天檢測溶氧、NH4-N、水溫等，24小時跟蹤觀察胚胎發(fā)育。
本發(fā)明注意把握河豚人繁的各個環(huán)節(jié)，特別加強親魚的管理與培育，通過篩選優(yōu)質(zhì)親魚，強化培育親魚，人工模擬自然生態(tài)條件和注射外源激素，嚴(yán)格掌握激素注射劑量，使影響河豚魚性腺發(fā)育的內(nèi)外條件協(xié)同作用，共同促使精、卵的成熟與排放，提高精、卵質(zhì)量，從而提高親魚的催產(chǎn)率、受精率，同時通過對孵化用水的生態(tài)調(diào)控，使用防霉藥物，改進孵化方式，加強生態(tài)管理，大大提高了魚苗孵化率。本技術(shù)第一次實現(xiàn)了暗紋東方豚人工繁殖的成功，對暗紋東方豚人工繁養(yǎng)殖的發(fā)展具推動作用。與其它河豚人繁技術(shù)相比，不僅提高了人繁三率、催產(chǎn)率達(dá)90％以上，還第一次通過自行培育親魚，穩(wěn)定了人繁三率，使河豚魚的人工繁殖獲得突破性進展。本發(fā)明技術(shù)亦適用于其它河豚魚類，特別是同屬江海洄游的弓斑東方豚。
權(quán)利要求
1.暗紋東方豚的人工繁殖技術(shù)，包括親魚的采取，馴養(yǎng)與培育、催情產(chǎn)卵、孵化等過程，其特征是在充分掌握暗紋東方豚繁殖生態(tài)環(huán)境和性腺生長發(fā)育規(guī)律的基礎(chǔ)上，模擬自然生態(tài)環(huán)境，利用激素調(diào)控，以實現(xiàn)促進親魚性腺的發(fā)育成熟與排卵，同時對孵化期加強生態(tài)管理，促進人工繁殖的催產(chǎn)率、受精率、孵化率的大幅提高，具體技術(shù)步驟為A.親魚的馴養(yǎng)與培育選擇以下其一a.天然采捕親魚的馴養(yǎng)在3-5月季節(jié)，收購從天然水域直接采捕的河豚親魚，選擇無病、無傷，體格健壯、性腺發(fā)育至IV期以上，腹部外觀膨大，手感松軟而有彈性，生殖孔發(fā)紅的親魚，取雄魚數(shù)量不少于雌魚數(shù)量，運輸至室內(nèi)水泥池中馴養(yǎng)，池水面積30-100M2，水深50-100CM，溶氧6mg/L以上，光照500-1000Lux，微流水，日換水1-2次，先投喂動物性餌料，待親魚開口攝食后，再逐步投以混合餌料，每天投餌數(shù)次，同時向池水加水至0.8-1.5M，并每天向池中沖水?dāng)?shù)次；b.親魚的自行培育10月底-11月初，在室內(nèi)沙礫底質(zhì)池中、以鹽度逐級遞增方式模擬海水培育，每級3-5天，池水深1.5-2M，水溫10-15℃，放養(yǎng)密度每畝60-100尾，每天投餌數(shù)次，來年2月初，再以鹽度逐級遞減方式過渡至淡水培育，并逐步升高池水溫至16-26℃，投餌中加入維生素E，并不定期向池中沖水，以滿足親魚性腺最后成熟發(fā)育的流水環(huán)境；B.催情產(chǎn)卵采用生理生態(tài)相結(jié)合的方法，對魚體直接注射外源激素催情，使親魚性腺從IV期過渡至V期，并使之排卵、排精，時間在4月份，于催產(chǎn)池中進行，池水10-30M2，水深40-60CM，水溫16-26℃，溶氧6mg/L以上，效應(yīng)時間40-72小時，采用濕法或干法人工授精；C.孵化在孵化池中，水溫16-26℃，溶氧6mg/L以上，光照500-1000Lux，將卵灑于粘卵板上掛置于孵化網(wǎng)箱中，將網(wǎng)箱置于孵化池中靜水孵化或用孵化桶流水孵化，孵化時間6-8天，孵化過程中需采取防霉措施。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的暗紋東方豚人工繁殖技術(shù)，其特征是a中天然采捕的親魚雌魚體重應(yīng)選擇600克以上，雄魚體重400克以上，雌雄比例1∶1-2，采捕后用雙層尼龍袋運輸，每袋1-2尾，運輸時間超過3小時的，中途應(yīng)充氧換水，運輸過程中防震，以防止性腺退化；若親魚在采捕或運輸過程中受傷，每天用1PPm孔雀石綠藥溶20-30分鐘或1PPmKMnO4藥溶5-10分鐘，待親魚傷愈恢復(fù)后，再放入大池中馴養(yǎng)；b中模擬海水培育的鹽度以2-5‰、7-10‰、15-20‰、30-33‰4級遞增，來年再反向4級遞減過渡至淡水培育。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的暗紋東方豚人工繁殖技術(shù)，其特征是B中外源催情激素為鯉魚腦垂體(PG)、促黃體生成激素釋放激素類似物(LRH-A)、人絨毛膜促性腺激素(HCG)三種單獨使用或兩兩混合使用，催情劑量雌魚LRH-A80-180ug/kg或HCG2000-4000Iu/g，或2-10mg PG加50-150ug LRH-A/kg，或HCG500-1000ug加50-150ugLRH-A/kg，雄魚劑量減半，注射方式為體腔或背部肌肉注射，注射次數(shù)1-3次，兩次注射間隔時間12-24小時，人工授精后，將卵漂洗2-3次，即可送至孵化程序。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的暗紋東方豚人工繁殖技術(shù)，其特征是C中的防霉措施是用1PPm孔雀石綠潑灑，但胚胎發(fā)育敏感期及出膜前后忌用，孵化過程中應(yīng)加強監(jiān)控，每隔1-2小時，測水溫，每天觀察溶氧2-3次。
全文摘要
由于人類經(jīng)濟活動的影響,暗紋東方豚的自然資源劇減,而市場需求卻有增無減。本發(fā)明結(jié)合暗紋東方豚的繁殖生態(tài)學(xué)和組織細(xì)胞學(xué)等的研究,在充分掌握暗紋東方豚繁殖生態(tài)環(huán)境和性腺生長發(fā)育規(guī)率的基礎(chǔ)上,利用魚類繁殖是內(nèi)在生理變化和外界環(huán)境協(xié)同作用的原理,通過加強親魚馴養(yǎng)與培育,模擬自然環(huán)境,激素調(diào)控等手段,促進親魚性腺的發(fā)育成熟與排放,并加強孵化期的管理與生態(tài)調(diào)控,以實現(xiàn)提高河豚人工繁殖的催產(chǎn)率、受精率和孵化率。
文檔編號A01K61/00GK1256069SQ98111600
公開日2000年6月14日 申請日期1998年12月9日 優(yōu)先權(quán)日1998年12月9日
發(fā)明者陳亞芬, 劉正文, 陳源高 申請人:中國科學(xué)院南京地理與湖泊研究所