一種菌柄細(xì)的白靈菇及其栽培方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食用菌領(lǐng)域，具體涉及一種菌柄細(xì)的白靈菇，以及該白靈菇的栽培方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 白靈葫（Pleurotuseryngiivar.tuoliensis，又名阿魏蘑、刺序側(cè)耳阿魏變種、 白阿魏蘑、刺芹側(cè)耳白色變種、翅鮑菇、玉雪阿魏菇、西天白靈芝、天山神菇等）屬于側(cè)耳屬 (Pleurotus)，中文學(xué)名為白靈側(cè)耳（或者將拉丁學(xué)名Pleurotuseryngiivar.tuoliensis 直譯為：刺芹側(cè)耳托里變種）。白靈菇子實(shí)體肥厚潔白、質(zhì)地細(xì)膩爽口，營(yíng)養(yǎng)豐富，是一種極 為珍貴的大型食用菌。白靈菇兼性寄生于半枯死的新疆阿魏的莖基部和根上，野生資源極 其稀少。
[0003] "白靈菇"名稱來(lái)自1997年北京金信食用菌有限公司從新疆購(gòu)進(jìn)阿魏蘑菌 袋，在北京大面積出菇成功，真菌分類(lèi)學(xué)家卯曉嵐先生將其中文學(xué)名定為白靈側(cè)耳， 拉丁學(xué)名定為Pleurotusnebrodensis，并記載于《中國(guó)大型真菌》（卯曉M主編， 河南科學(xué)技術(shù)出版社，2000年）。但是后來(lái)研宄發(fā)現(xiàn)我國(guó)的白靈側(cè)耳與歐洲真正的 Pleurotusnebrodensis不同，我國(guó)的白靈側(cè)耳學(xué)名應(yīng)為Pleurotuseryngiivar. tuoliensis(Kawai等.mycoscience, 2008, 49:75-79 ;黃晨陽(yáng)等.植物遺傳資源學(xué) 報(bào)，2011，12(5) :825-827, 823)。并已獲得權(quán)威的國(guó)際真菌學(xué)名數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www. indexfungorum.org/)的承認(rèn)，艮P白靈葫的學(xué)名為Pleurotuseryngiivar.tuoliensis。
[0004] 白靈菇是一種食用和藥用價(jià)值都很高的珍稀食用菌，它有農(nóng)業(yè)式栽培和工廠化栽 培兩種栽培方式，白靈菇栽培存在如下主要難題：（1)、菌種少。目前，國(guó)家認(rèn)定的白靈菇菌 種只有4個(gè)，全國(guó)主要栽培菌種估計(jì)不超過(guò)10個(gè)，其中工廠化栽培主要是中農(nóng)1號(hào)，農(nóng)業(yè)式 栽培主要是中農(nóng)翅鮑。這些品種均存在缺點(diǎn)，如中農(nóng)1號(hào)生物學(xué)效率偏低，子實(shí)體較軟，不 耐貯藏；中農(nóng)翅鮑栽培周期長(zhǎng)，子實(shí)體水漬多，外觀差。（2)、后熟期長(zhǎng)。白靈菇是典型需要 后熟的種類(lèi)，后熟期通常在2個(gè)月左右，從接種到開(kāi)始出菇需要120天左右。（3)、生物學(xué)效 率低。白靈菇培養(yǎng)周期太長(zhǎng)，后熟完成后，栽培料失水率高，若出菇前不補(bǔ)水（如工廠化栽 培），生物學(xué)效率只有30%?40%，若出菇前補(bǔ)水（如農(nóng)業(yè)式栽培覆土），生物學(xué)效率可達(dá) 到60%以上。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對(duì)現(xiàn)有的白靈菇菌種少的缺點(diǎn)，本發(fā)明目的在于提供一種新的菌柄細(xì)的白靈 菇。
[0006] 本發(fā)明另一目的在于提供上述白靈菇的栽培方法。
[0007] 本發(fā)明的目的通過(guò)如下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：
[0008] 本發(fā)明一種白靈葫（Pleurotuseryngiivar.tuoliensis)菌株中農(nóng)白靈4號(hào)，已 于2014年12月12日在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏（保藏地址 為：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研宄所，郵編100101)，其保藏編 號(hào)為CGMCCNo. 10194。
[0009] 上述白靈菇菌株中農(nóng)白靈4號(hào)的栽培方法，包括如下步驟：
[0010] (1)、母種繁殖：按1:80?100的重量比比例將直徑大小0. 3?0. 5cm的中農(nóng)白靈 4號(hào)菌種接種于母種培養(yǎng)基上，在22?28°C、空氣相對(duì)濕度為40?60%、避光條件下培養(yǎng) 10?12天，得中農(nóng)白靈4號(hào)母種；
[0011] ⑵、原種培養(yǎng)：按照重量百分比為3?5%的比例將步驟⑴中所得的中農(nóng)白靈 4號(hào)母種接種于栽培培養(yǎng)料上，在22?28°C、空氣相對(duì)濕度為40?60%、避光條件下培養(yǎng) 28?35天，得中農(nóng)白靈4號(hào)原種；
[0012] (3)、栽培種培養(yǎng)：按照重量百分比為3?5%的比例將步驟（2)中所得的中農(nóng)白 靈4號(hào)原種接種于栽培培養(yǎng)料上，在22?28°C、空氣相對(duì)濕度為40?60%、避光條件下培 養(yǎng)28?35天，得中農(nóng)白靈4號(hào)栽培種；
[0013](4)、冷卻接種：按照重量百分比為5?8%的比例將步驟（3)中所得的中農(nóng)白靈 4號(hào)栽培種接種于栽培培養(yǎng)料上，在22?28°C、空氣相對(duì)濕度為40?60%、避光條件下培 養(yǎng)30?40天，菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)料；
[0014] (5)、搔菌：將袋口打開(kāi)，用消毒刮鏟除去料面上的菌皮，松扎上口，然后將菌袋松 扎上，繼續(xù)培養(yǎng)3?5天，直至菌絲恢復(fù)；
[0015](6)、低溫刺激：將菌袋置于1?3°C低溫下刺激7?14天；或大棚溫度在0?15°C 時(shí)，保持晝夜溫差10?15°C，刺激10?15天；
[0016] (7)、出菇管理和采收：出現(xiàn)原基后，在5?18°C(農(nóng)業(yè)式栽培）或12? 14°C(工業(yè)式栽培），空氣相對(duì)濕度為75?85 %，光照500?800勒克斯，通風(fēng)良好，環(huán)境 C02< 1000XKT6條件下培養(yǎng)20?30天；當(dāng)子實(shí)體菌蓋充分展開(kāi)，但仍有微微卷邊，孢子 未釋放時(shí)采收子實(shí)體。
[0017] 上述栽培方法步驟（1)中所述的菌種指菌絲。
[0018] 上述栽培方法步驟（1)中所述的母種培養(yǎng)基的原料組成成分及其重量比例為：去 皮馬鈴薯塊180?300g(取汁），葡萄糖15?20g，磷酸二氫鉀0? 5?3g，硫酸鎂0? 5?3g， 瓊脂15?25g，水1000ml，pH值自然。
[0019] 上述栽培方法步驟（2)、（3)或（4)中所述的栽培培養(yǎng)料的原料組成成分及其重量 百分比為：棉籽殼75?81 %，麥麩8?15 %，玉米粉2?8 %，石灰1?3 %;再以料水比為 I:1. 8?2. 3的比例加入水。
[0020] 上述栽培方法中所述的栽培培養(yǎng)料的組成成分及其重量百分比優(yōu)選為：棉籽殼 81%，麥麩12. 5%，玉米粉3. 5%，石灰3%，料水比I:1. 86,即含水量為65%。
[0021] 上述栽培方法步驟（1)、（2)、（3)或（4)中所述的溫度優(yōu)選為24?26°C，進(jìn)一步 優(yōu)選為25°C。
[0022] 上述栽培方法步驟（1)、（2)、（3)或（4)中所述的空氣相對(duì)濕度優(yōu)選為60%。
[0023] 上述栽培方法步驟（4)中所述的接種方法為先拔出菌袋中央事先插入的空心塑 料棒，將栽培種接入拔出空心塑料棒后留下的孔洞中。
[0024] 上述栽培方法步驟（1)中所述的母種培養(yǎng)基的制備方法，包括按照比例將去皮馬 鈴薯塊（直徑約Icm)置于600ml水中，沸水煮30min，4層紗布過(guò)濾，取汁液；向所得汁液中 加入少于400ml水，再加葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、瓊脂，定容至1000ml，邊攪拌邊小火 加熱，至以上成分完全溶解，分裝試管（規(guī)格為20mmX200mm)，121°C滅菌30min;擺斜面，備 用。所用瓊脂可以是瓊脂條或瓊脂粉。
[0025] 上述栽培方法步驟（2)、（3)中所述的栽培培養(yǎng)料的制備方法為：按照比例將各原 料組分混合，攪拌均勻；再按照料水比加入水，攪拌均勻，裝瓶/袋，栽培培養(yǎng)料采用高壓滅 菌，在 125°C保持 150min。
[0026] 上述栽培方法步驟（4)中所述的栽培培養(yǎng)料的制備方法為：按照比例將各原料組 分混合，攪拌均勻；再按照料水比加入水，攪拌均勻，栽培袋采用聚丙烯或聚乙烯袋，栽培袋 厚度一般5?6絲，菌袋折徑17cm，長(zhǎng)35cm;將制備好的栽培培養(yǎng)料裝入袋中，要求松緊適 度，裝好后袋口內(nèi)翻壓入中間的洞孔中，并插入空心棒，擺放于消毒筐中，即進(jìn)行滅菌。一般 采用常壓滅菌，從蒸鍋內(nèi)上大氣后，在KKTC下保持12?14小時(shí)，待冷卻后接種。
[0027] 本發(fā)明白靈菇中農(nóng)白靈4號(hào)的分離馴化過(guò)程：
[0028] 2009年5月，本發(fā)明人在新疆塔城地區(qū)裕民縣磚廠附近戈壁灘采集到寄生在新疆 阿魏根部的野生白靈菇子實(shí)體，通過(guò)子實(shí)體組織分離得到菌絲（菌種），檢測(cè)菌絲rDNA-ITS 大小和序列，鑒定其為白靈葫（Pleurotuseryngiivar.tuoliensis)，將分離得到的菌 種于2009-2011年栽培，每年對(duì)菇形良好的子實(shí)體進(jìn)行組織分離，均在difcoPDA培養(yǎng)基 (BDdifcoPDA培養(yǎng)基的組成及其比例：BDdifcoPDA粉末39g，蒸餾水1000ml)上培養(yǎng)，從中 篩選出菌絲生長(zhǎng)速度快、生長(zhǎng)健壯、菌落圓整的菌株。2012、2013年栽培試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)2011年篩 選出的1601號(hào)菌株出葫表現(xiàn)優(yōu)異，命名為中農(nóng)白靈4號(hào)。
[0029] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和有益效果：（1)本發(fā)明提供了一種新的白靈菇菌株，豐富了白靈 菇的類(lèi)型；（2)該菌株的菌蓋呈雪白色，長(zhǎng)徑平均11. 5厘米，短徑平均10. 4厘米，厚度平均 5. 1厘米；菌柄中生，白色，上下等粗，質(zhì)地硬，表面光滑，菌柄平均長(zhǎng)5. 0厘米，平均粗4. 7 厘米；菌褶呈乳白色，無(wú)網(wǎng)紋。（3)本發(fā)明中農(nóng)白靈4號(hào)的子實(shí)體商品價(jià)值較高，菌蓋呈貽 貝狀，質(zhì)地硬，外觀漂亮，出菇整齊，形態(tài)一致性高。（4)中農(nóng)白靈4號(hào)農(nóng)業(yè)式栽培平均單菇 重247. 0±35. 3g，每袋能出2個(gè)菇；生物學(xué)效率高。
【附圖說(shuō)明】：
[0030] 圖1.中農(nóng)白靈4號(hào)的子實(shí)體照片。
[0031] 圖2.采用引物P4擴(kuò)增的5個(gè)白靈菇菌株的ISSR圖譜；其中M為Marker，1為華 雜13, 2為中農(nóng)翅鮑，3為KH2,4為中農(nóng)1號(hào)，5為中農(nóng)白靈4號(hào)。
[0032] 圖3.采用引物P24擴(kuò)增的5個(gè)白靈菇菌株的ISSR圖譜；其中M為Marker，l為華 雜13, 2為中農(nóng)翅鮑，3為KH2,4為中農(nóng)1號(hào)，5為中農(nóng)白靈4號(hào)。
[0033] 圖4.中農(nóng)白靈4號(hào)的IGS2經(jīng)HapII酶切電泳圖譜；其中1為中農(nóng)1號(hào)，2為中農(nóng) 白靈4號(hào)。
[0034] 圖5.中農(nóng)白靈4號(hào)的IGS2經(jīng)RsaI酶切電泳圖譜；其中1為中農(nóng)1號(hào)，2為中農(nóng) 白靈4號(hào)。
【具體實(shí)施方式】：
[0035] 以下通過(guò)實(shí)例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但是對(duì)本發(fā)明不構(gòu)成任何限制。
[0036]實(shí)施例1中農(nóng)白靈4號(hào)的分類(lèi)鑒定：
[0037](一）中農(nóng)白靈4號(hào)的形態(tài)特征及分類(lèi)鑒定：
[0038] 中農(nóng)白靈4號(hào)原基散生，白色；成熟時(shí)，菌蓋呈雪白色，貽貝狀，質(zhì)地硬，長(zhǎng)徑平均 11. 5厘米，短徑平均10. 4厘米，厚度平均5. 1厘米；菌柄中生，白色，上下等粗，質(zhì)地硬， 表面光滑，菌柄平均長(zhǎng)5. 0厘米，平均粗4. 7厘米；菌褶呈乳白色，無(wú)網(wǎng)紋。菌蓋長(zhǎng)寬比約 I. 1: 1，菌柄的長(zhǎng)寬比約I. 1: 1，菌蓋長(zhǎng)和菌柄長(zhǎng)之比約2. 3:1。子實(shí)體出葫整齊，形態(tài)的一 致性高于80% (見(jiàn)圖1)。根據(jù)《中國(guó)大型真菌》（卯曉嵐主編，河南科學(xué)技術(shù)出版社，2000 年出版），對(duì)比第66頁(yè)有關(guān)白靈菇的照片及相應(yīng)特征描述，中農(nóng)白靈4號(hào)與白靈菇的相關(guān)描 述一致，即中農(nóng)白靈4號(hào)在分類(lèi)上屬于白靈菇，正如技術(shù)背景介紹的白靈菇拉丁學(xué)名變更， 它正確的拉丁學(xué)名為Pleurotuseryngiivar.tuoliensis〇
[0039](二）與通過(guò)國(guó)家認(rèn)定的4個(gè)白靈菇菌株的ISSR圖譜對(duì)比鑒定分析
[0040] (1)、試驗(yàn)菌株：對(duì)照菌株：通過(guò)國(guó)家認(rèn)定的白靈菇菌株只有4個(gè)，即華雜13號(hào)、中 農(nóng)翅鮑、KH2和中農(nóng)1號(hào)；本發(fā)明菌株：中農(nóng)白靈4號(hào)
[0041] (2)、試驗(yàn)方法：以菌株的DNA為模板，分別以P4或P2