一種離體牙齒保存液的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種用于離體組織的保存液，尤其涉及一種離體牙齒保存液。
【背景技術(shù)】
[0002] 由于各種原因?qū)е碌难荔w缺損和牙齒缺失已成為危害口腔乃至人體健康的主要 疾病。目前主要是借助于各種牙科材料充填來應(yīng)對(duì)牙齒缺損疾病，雖然在一定程度上能阻 止病變的繼續(xù)發(fā)展，但不能解決根本問題。對(duì)于牙齒缺失盡管解決途徑很多，但最有效和最 根本的辦法還是牙齒生物性再生。
[0003] 隨著組織再生醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展，為牙體缺損和牙齒缺失的有效治療帶來了希望。 目前已有許多研宄利用牙源性上皮和牙源性間充質(zhì)的相互作用再生出牙齒組織。常用的牙 源性間充質(zhì)包括牙乳頭細(xì)胞和牙髓細(xì)胞。由于牙乳頭細(xì)胞在臨床難以獲得，因此，目前用于 牙體及牙齒再生的種子細(xì)胞首選是牙髓來源的細(xì)胞，其中最重要的是牙髓干細(xì)胞。
[0004] 2000年首次發(fā)現(xiàn)了牙髓干細(xì)胞，Gronthos等發(fā)現(xiàn)在離體的乳牙和智齒中都存在 牙髓干細(xì)胞。這是一類具有高增殖能力、高度自我更新能力、多項(xiàng)分化能力的細(xì)胞。已有研 宄利用該細(xì)胞成功地構(gòu)建牙髓、牙本質(zhì)以及牙齒組織。
[0005] 成功從離體的牙齒中提取出足夠量符合標(biāo)準(zhǔn)的牙髓干細(xì)胞，首先遇到的問題就是 離體牙齒保存的問題。口腔環(huán)境較其他組織環(huán)境不同，口腔內(nèi)的細(xì)菌數(shù)量很多，種類相當(dāng) 繁雜，離體牙齒保存不當(dāng)極易發(fā)生染菌，且牙齒內(nèi)細(xì)胞量較少，離體牙齒保存不當(dāng)也極易發(fā) 生牙髓干細(xì)胞提取失敗的情況。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明提供了一種離體牙齒保存液，實(shí)驗(yàn)表明這種保存液可以有效的保存離體牙 齒，保持細(xì)胞活性且避免污染的發(fā)生。
[0007] 本發(fā)明提供的一種離體牙齒保存液，其特征在于，每IL保存液中有以下重量配比 成分組成：
[0008] 青霉素 0. 3-0. 6g 鏈霉素 0. 5-lg 甲硝唑 0.02-0.04g 兩性霉素 B 0.015-0. 025g 羥甲基纖維素 5-10g， 胰島素 50-100ug MEM 余量
[0009] 本發(fā)明所述離體牙齒保存液所含成分中，青霉素可以有效的抑制及殺滅革蘭氏 陽性菌；鏈霉素可以有效的抑制及殺滅革蘭氏陰性菌；甲硝唑可以有效的抑制及殺滅厭氧 菌；兩性霉素 B可以有效的抑制及殺滅真菌；羥甲基纖維素為惰性物質(zhì)，能夠降低細(xì)胞的代 謝活動(dòng)，降低不良因素對(duì)細(xì)胞活性的影響，保持細(xì)胞活性；胰島素能顯著提高細(xì)胞利用葡萄 糖的效率，維持細(xì)胞的營養(yǎng)供應(yīng)。常用于細(xì)胞培養(yǎng)的MEM作為保存液的基礎(chǔ)成分，MEM中的 磷酸鹽及碳酸鹽緩沖體系可以有效的保持細(xì)胞環(huán)境的穩(wěn)定，且MEM中富含細(xì)胞代謝必需的 無機(jī)鹽離子，氨基酸，糖分，維生素等重要成分，可以有效的保持細(xì)胞的活性。
[0010]另外本發(fā)明所述離體牙齒保存液中可以加入普朗尼克F68和葡聚糖硫酸酯，來增 加保存液粘稠度，可以減少離體牙齒在運(yùn)輸過程中因震動(dòng)或搖晃引起的液體對(duì)組織和細(xì)胞 的損傷。
【具體實(shí)施方式】
[0011] 為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明 進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。
[0012] 實(shí)施例1 :
[0013] 配制IL離體牙齒保存液，在無菌條件下，取0. 5L的MEM溶液，加入青霉素 0. 5g、鏈 霉素0. 8g、甲硝唑0. 03g、兩性霉素 B 0. 02g、羥甲基纖維素8g、胰島素80ug，攪拌溶解，加入 MEM至IL定容，攪拌均勻，將制得的溶液無菌分裝至已滅菌的采集瓶內(nèi)，每瓶25ml。
[0014] 實(shí)施例2 :
[0015] 配制IL離體牙齒保存液，在無菌條件下，取0. 5L的MEM溶液，加入青霉素 0. 5g、鏈 霉素0. 8g、甲硝唑0. 03g、兩性霉素 B 0. 02g、普朗尼克F6840g、葡聚糖硫酸酯7g、羥甲基纖 維素8g、胰島素80ug、攪拌溶解，加入MEM至IL定容，攪拌均勾，將制得的溶液無菌分裝至 己滅菌的采集瓶內(nèi)，每瓶25ml。
[0016] 使用效果實(shí)例：
[0017] 將20離體健康牙齒分別放于保存液中，2-8度保存120小時(shí)后取出，無菌操作下提 取牙髓干細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)20顆牙齒皆可以成功提取出牙髓干細(xì)胞。
[0018] 以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精 神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種離體牙齒保存液，其特征在于，每IL保存液中有以下重量配比成分組成：
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的牙齒保存液，其特征在于，所述保存液還可以加入普朗尼克 F68 30-50g和葡聚糖硫酸酯5-10g。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種離體牙齒保存液，用于儲(chǔ)存牙齒離體后保證牙齒細(xì)胞的活性，其具體組成為，每1L保存液中各組分的含量如下：青霉素0.3-0.6g、鏈霉素0.5-1g、甲硝唑0.02-0.04g、兩性霉素B0.015-0.025g、羥甲基纖維素5-10g、胰島素50-100ug、余量為MEM。該保存液可以提供牙齒離體后所需營養(yǎng)物質(zhì)和低菌環(huán)境，有效保持細(xì)胞活性，用于離體牙齒的長期保存。
【IPC分類】A01N1-02
【公開號(hào)】CN104705289
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510095451
【發(fā)明人】董成友, 張路軍, 王穎
【申請(qǐng)人】安徽新生命干細(xì)胞科技有限公司
【公開日】2015年6月17日
【申請(qǐng)日】2015年3月1日