一種利用中早39改良水稻稻瘟病抗性的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種利用中早39所攜帶的5個稻瘟病抗性基因來改良水稻材料的稻瘟病抗性，以選育稻瘟病抗性提高而農(nóng)藝性狀與待改良水稻材料相似的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]水稻是我國重要的糧食作物。稻瘟病是危害水稻的最嚴(yán)重病害之一，多年來一直被認(rèn)為是水稻三大病害之首。培育抗稻瘟病的水稻品種一直是育種界公認(rèn)的防治稻瘟病的最經(jīng)濟(jì)有效的途徑。利用多個稻瘟病抗性基因并將不同的抗性基因聚合到同一個品種中是使該品種獲得持久抗性的前提和基礎(chǔ)。中早39是中國水稻研宄所培育的常規(guī)秈稻品種，于2009年通過浙江省審定，2012年通過國家審定。被農(nóng)業(yè)部認(rèn)定為超級稻的中早39具有良好的稻瘟病抗性，本發(fā)明人通過分子生物學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)中早39攜帶P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因，因此中早39可作為稻瘟病抗性基因的供體親本以改良水稻材料的稻瘟病抗性。在此背景下，本發(fā)明提出了一種將中早39攜帶的？1-(12、？1(13、？15、？讓、？19等5個稻瘟病抗性基因同時導(dǎo)入到不攜帶這5個抗性基因的水稻待改良材料中，以獲得稻瘟病抗性改良的水稻材料的育種方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明采用的是利用特異性功能標(biāo)記來選擇性的聚合中早39中存在的Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因，并結(jié)合常規(guī)育種手段以選育稻瘟病抗性提高而農(nóng)藝性狀與待改良材料基本一致的水稻材料的育種方法。本發(fā)明主要有兩個優(yōu)點(diǎn):(A)最終獲得的育種材料同時聚合中早39攜帶的P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因；(B)使最終獲得的育種材料與待改良材料的農(nóng)藝性狀基本保持一致，僅在稻瘟病抗性上有提尚。
[0004]本發(fā)明包括以下步驟:
[0005](I)將不攜帶P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的稻瘟病抗性待改良水稻材料與攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的中早39雜交，獲得雜種匕代；
[0006](2)種植步驟⑴獲得的雜種匕代，并將雜種F1R與步驟⑴描述的不攜帶P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的稻瘟病抗性待改良水稻材料回交，獲得BC1F1代種子;
[0007](3)種植步驟(2)獲得的BC1F1代種子，并利用檢測Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的特異性功能標(biāo)記選擇同時攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的BC1F1代單株與步驟(I)描述的不攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的稻瘟病抗性待改良水稻材料回交，獲得BC2F1代種子；
[0008](4)種植步驟(3)獲得的BC2F1代種子，并利用檢測Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的特異性功能標(biāo)記選擇同時攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的BC2F1代單株與步驟(I)描述的不攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的稻瘟病抗性待改良水稻材料回交，獲得BC3F1代種子；
[0009](5)種植步驟(4)獲得的BC3F1代種子，并利用檢測Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的特異性功能標(biāo)記選擇同時攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的BC3F1代單株與步驟(I)描述的不攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的稻瘟病抗性待改良水稻材料回交，獲得BC4F1代種子；
[0010](6)種植步驟(5)獲得的BC4F1代種子，并利用檢測P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的特異性功能標(biāo)記選擇同時攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的BC4F1代單株，與步驟(I)描述的不攜帶P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的稻瘟病抗性待改良水稻材料進(jìn)行連續(xù)回交，每一回交世代均選擇同時攜帶P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的單株與輪回親本進(jìn)行回交，直到得到滿意的回交后代BCmF1 (m彡5)為止；
[0011](7)種植步驟(6)得到的BCniF1On彡5)代單株，利用檢測Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的特異性功能標(biāo)記選擇同時攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的BCmF1On ^ 5)代單株自交，自交代數(shù)根據(jù)育種需要確定，獲得農(nóng)藝性狀穩(wěn)定的BCmFnOn彡5，η彡2)代材料；
[0012](8)種植步驟(7)獲得的農(nóng)藝性狀穩(wěn)定的BCmFnOn彡5，η彡2)代材料，利用檢測P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的特異性功能標(biāo)記選擇同時攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的BCmFnOn彡5，η彡2)代單株，得到稻瘟病抗性改良且農(nóng)藝性狀與步驟(I)描述的不攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的稻瘟病抗性待改良水稻材料相似的改良材料。
[0013]進(jìn)一步地，所述步驟(I)中，不攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的稻瘟病抗性待改良水稻材料可以是秈稻，也可以是粳稻，可以是恢復(fù)系，也可以是保持系等不同的育種材料。
[0014]進(jìn)一步地，所述步驟(2)、步驟(3)、步驟(4)、步驟(5)、步驟(6)利用不攜帶P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的稻瘟病抗性待改良水稻材料作為輪回親本進(jìn)行連續(xù)回交的目的是，使最終獲得的水稻材料的農(nóng)藝性狀與不攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的稻瘟病抗性待改良水稻材料相似。
[0015]進(jìn)一步地，所述步驟(3)、步驟(4)、步驟(5)、步驟(6)、步驟(7)、步驟⑶中，利用檢測Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的特異性功能標(biāo)記選擇同時攜帶P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的單株進(jìn)行回交或自交的目的是，保證P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因在改良后代中始終存在。
[0016]進(jìn)一步地，所述步驟(3)、步驟(4)、步驟(5)、步驟(6)、步驟(7)、步驟⑶中，檢測P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的特異性功能標(biāo)記可以根據(jù)Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的已公開DNA序列進(jìn)行自行開發(fā)。
【具體實(shí)施方式】
[0017]用一個具體實(shí)施例子進(jìn)行詳細(xì)說明:利用中早39改良中組I號的稻瘟病抗性(中組I號是中國水稻研宄所培育的常規(guī)秈稻品種，于1999年通過浙江省品種審定；本發(fā)明人利用特異性的功能標(biāo)記檢測顯示中組I號不攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因，而中早39攜帶P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因)，具體實(shí)施步驟如下:
[0018]1.將中早39與中組I號雜交，獲得雜種F1代種子19粒(可以用中早39做母本中組I號做父本進(jìn)行雜交，也可以用中組I號做母本中早39做父本進(jìn)行雜交);
[0019]2.種植雜種F1，將雜種F1代單株與中組I號回交，獲得BC1F1代種子32粒；種植BC1F1代種子，利用5個特異性的功能標(biāo)記對BC 代單株進(jìn)行檢測，選擇同時攜帶P1-d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的單株與中組I號回交，獲得BC2F1代種子41粒；
[0020]3.種植BC2F1代單株，利用5個特異性的功能標(biāo)記對BC芯代單株進(jìn)行檢測，選擇同時攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的單株與中組I號回交，獲得BC3F1代種子133粒；
[0021]4.種植BC3Fl代單株，利用5個特異性的功能標(biāo)記對BC3F1代單株進(jìn)行檢測，選擇同時攜帶Pi_d2、Pid3、Pi5、Pib、Pi9等5個稻瘟病抗性基因的單株與中組I號回交，獲得BC4F1代種子75粒；
[0022]5.種植BC4F1