薺菜在防治煙草青枯病菌中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物源農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種薺菜在抑制、防治煙草青枯病菌 中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 養(yǎng)菜（Capsella bursa-pastoris)，俗稱護(hù)生草、凈腸草，屬十字花科養(yǎng)菜屬草本 植物，同時(shí)，薺菜全草均可入藥，又是藥食同源植物。薺菜主要分布于亞熱帶和溫帶地區(qū)，其 中我國各地均見其生長，特別在田野、路邊、庭院等處較為常見。
[0003] 薺菜富含有機(jī)酸、麥角克堿、延胡索酸、類黃酮、生物堿、氨基酸、多肽、丹寧等多種 活性成分，具有明目、強(qiáng)筋健骨、降壓、消炎、鎮(zhèn)痛、解痙、抗菌、抗癌、抗心律失常、清除自由 基、抗脂質(zhì)過氧化、抗病毒、防衰老等預(yù)防疾病和治療疾病的功效。
[0004] 盡管薺菜醫(yī)用方面的研宄較多，但利用薺菜在防治植物病害方面的研宄報(bào)道較 少，尤其是防治煙草青枯病菌的研宄鮮見。因此，本發(fā)明以薺菜提取物對植物病原菌是否具 有抑制作用這一科學(xué)問題，首次進(jìn)行室內(nèi)抑菌試驗(yàn)，探索了提取方法，比較了不同部位抑菌 活性大小，測定了 MIC值等，初步明確了薺菜的開發(fā)潛力，旨在為今后研制植物源農(nóng)藥提供 理論依據(jù)和實(shí)踐基礎(chǔ)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：針對薺菜防治植物病害技術(shù)上的空白，提供了一 種薺菜在抑制、防治煙草青枯病中的應(yīng)用。
[0006] 為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種薺菜在抑制煙草青枯 病菌中的應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明同時(shí)提供一種薺菜在防治煙草青枯病菌中的應(yīng)用。
[0008] 上述所指的應(yīng)用實(shí)質(zhì)上是指薺菜提取物在抑制/防治煙草青枯病菌中的應(yīng)用。
[0009] 上述薺菜提取物為薺菜水提取物，是取薺菜洗凈，曬干至含水量為0. 5-3. 5%后 粉碎，用無菌水對薺菜粉進(jìn)行提取，所得濾液轉(zhuǎn)入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至膏狀得到。其中，粉碎 是以8000-10000r/min的轉(zhuǎn)速，用粉碎機(jī)粉碎成100-120目干粉。用無菌水對薺菜粉進(jìn) 行提取是指按Ig薺菜粉加20-25mL無菌水的比例，于薺菜粉中加入無菌水，于25-26°C以 80-120r/min震蕩24-48h，過濾，收集濾液，濾渣重復(fù)提取1次，合并兩次濾液，所得濾液經(jīng) 雙層紗布和濾紙過濾，再經(jīng)〇. 22 y m細(xì)菌過濾器過濾，即得。
[0010] 上述薺菜提取物，可以采用薺菜全株作為原料，亦可采用薺菜根、薺菜莖或薺菜籽 中的一種或幾種混合作為原料。本文中的薺菜全株包括根、莖、葉和籽，以便于區(qū)分單獨(dú)的 薺菜根、薺菜莖和薺菜籽。
[0011] 本發(fā)明的薺菜的水提取物對煙草青枯病菌具有抑制作用；表明薺菜具有防治植物 病害尤其是煙草青枯病菌的功能；同時(shí)本發(fā)明的實(shí)現(xiàn)，為開發(fā)利用薺菜天然活性物質(zhì)以及 研宄與開發(fā)新生物農(nóng)藥如煙草青枯病菌殺菌劑提供了科學(xué)依據(jù)。
【附圖說明】
[0012] 圖1是薺菜提取物對煙草青枯病菌的抑制作用。
[0013] 其中：A代表薺菜水提取物；B代表無菌水。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 供試植物和菌株
[0015] 新鮮薺菜來自湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)瀏陽科研基地；煙草青枯病菌（Ralstonia solannacearum)由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。
[0016] 煙草青枯病菌菌種的活化：采用接種環(huán)刮取3環(huán)菌種接入牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng) 基（嫩)，26-28°〇下連續(xù)培養(yǎng)24-4811，待菌落長出后，制成濃度1.1\10 !^^/1^菌懸液（以 下均稱為菌懸液），備用。
[0017] 供試培養(yǎng)基
[0018] 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（NA):牛肉膏5g、蛋白胨8g、氯化鈉5g、瓊脂20g、蒸餾水 1000 mL, pH 7. 0-7. 2 ；
[0019] 實(shí)施例1薺菜的水提取物對煙草青枯病菌的抑制作用
[0020] 取薺菜（全株，包括根、莖、葉及籽）洗凈，曬干至含水量為0.5-3. 5%，以9000r/ min的轉(zhuǎn)速，用粉碎機(jī)粉碎成100-120目干粉。
[0021] 稱取20g薺菜干粉，加入400mL無菌水，25°C條件下，120r/min震蕩24h，過濾，收 集濾液；濾渣重復(fù)提取1次，合并兩次濾液，濾液經(jīng)雙層紗布和濾紙過濾，再經(jīng)0. 22 y m細(xì)菌 過濾器過濾，所得濾液置于壓力為0. 09-0.1 Mpa，水浴溫度為60°C，冷凝溫度為6°C，轉(zhuǎn)速為 80r/min (旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)條件，下同），旋轉(zhuǎn)至膏狀物，無菌水定容為薺菜的水提取物，4°C保存?zhèn)?用。
[0022] 采用抑菌圈法測定薺菜的水提取物對煙草青枯病菌的抑菌效果，滅菌的NA培養(yǎng) 基倒入培養(yǎng)皿中待其冷卻，移液槍移取200 y L菌懸液，涂布均勻，打孔器（7_)在培養(yǎng)基上 打孔，注入100 y L提取物，無菌水做對照，每處理重復(fù)3次，將平皿置于分別置于26-28°C細(xì) 菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)，觀察結(jié)果，以出現(xiàn)最大抑菌圈的抑菌效果最佳，并用十字交叉法測量抑菌圈 直徑，計(jì)算抑制率。
[0023]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種薺菜在抑制煙草青枯病菌中的應(yīng)用。
2. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，是指薺菜提取物在抑制煙草青枯病菌中的 應(yīng)用。
3. -種薺菜在防治煙草青枯病菌中的應(yīng)用。
4. 如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，是指薺菜提取物在防治煙草青枯病菌中的 應(yīng)用。
5. -種薺菜在制備煙草青枯病菌殺菌劑的應(yīng)用。
6. 如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，是指薺菜提取物在制備煙草青枯病菌殺菌 劑中的應(yīng)用。
7. 如權(quán)利要求2或4或6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述薺菜提取物為薺菜水提取物。
8. 如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述薺菜水提取物是取薺菜洗凈，曬干至含 水量為0. 5-3. 5%后粉碎，用無菌水對薺菜粉進(jìn)行提取，所得濾液入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至膏狀 得到。
9. 如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述用無菌水對薺菜粉進(jìn)行提取是指按Ig 薺菜粉加20-25mL無菌水的比例，于薺菜粉中加入無菌水，于25-26°C以80-120r/min震蕩 24-48h，過濾，收集濾液，濾渣重復(fù)提取1次，合并兩次濾液，所得濾液經(jīng)雙層紗布和濾紙過 濾，再經(jīng)0. 22ym細(xì)菌過濾器過濾，即可。
10. 如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述薺菜粉為薺菜全株粉、薺菜根粉、薺菜 莖粉和薺菜籽粉中的一種或幾種。
【專利摘要】本發(fā)明屬于植物源農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體提供了一種薺菜在防治煙草青枯病菌中的應(yīng)用。本發(fā)明探索薺菜提取物對煙草青枯病菌的抑制作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)薺菜提取物對煙草青枯病菌具有抑制作用，其抑制率為27.2％，其中根、莖、籽提取物抑菌效果最強(qiáng)，葉的抑菌效果為零。進(jìn)一步研究結(jié)果顯示薺菜根、莖、籽提取物對煙草青枯病菌的MIC值均為80mg/mL，為開發(fā)利用薺菜天然活性物質(zhì)以及研究與開發(fā)新的生物農(nóng)藥提供了科學(xué)依據(jù)。
【IPC分類】A01P1-00, A01N65-08
【公開號】CN104770401
【申請?zhí)枴緾N201510209580
【發(fā)明人】廖曉蘭, 劉雙清, 謝燕, 張亞
【申請人】湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年7月15日
【申請日】2015年4月29日