一種高寒草甸野生雙孢蘑菇菌株及其子實(shí)體栽培方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種雙孢蘑菇菌株，具體涉及一種高寒草甸野生雙孢蘑菇菌株及其子 實(shí)體栽培方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 雙孢蘑菇是世界上人工栽培時(shí)間最長、栽培面積最廣、技術(shù)最先進(jìn)，效益最 好的一種大型食用菌，又稱為雙孢菇，在分類學(xué)上隸屬于真菌界（Fungi)、擔(dān)子菌門 (Basidiomyca)，層菌綱（Hymenomycetes)、傘菌目（Agaricales)、傘菌科（Agaricaceae)， 蘑菇屬（Agaricus)，它營養(yǎng)豐富，味道鮮美，色白質(zhì)嫩，富含蛋白質(zhì)、多糖等營養(yǎng)豐富，是一 種受世界各國喜愛的"健康食品"，具有很好的保健功能。然而，自身保守的次級(jí)同宗配合遺 傳方式以及野生種質(zhì)資源的缺乏，造成雙孢蘑菇種內(nèi)相似程度極高，遺傳變異不明顯，育種 研宄進(jìn)展緩慢，商業(yè)上近乎純種栽培，且抗逆能力弱，所以種內(nèi)生物多樣性研宄一直是雙孢 蘑葫選種、育種研宄中的熱點(diǎn)。
[0003] 雙孢蘑菇在我國野生資源分布較廣，收集和保護(hù)中國野生資源對(duì)于維護(hù)生物多樣 性和資源的持續(xù)利用具有不可估量的前景。目前，我國野生雙孢蘑菇種質(zhì)相關(guān)的報(bào)道較少， 野生雙孢蘑菇種質(zhì)資源的獲得在雙孢蘑菇育種上具有一定的作用。眾所周知，食用菌生產(chǎn) 的發(fā)展很大程度上依賴于菌種，然而有限的抗逆性強(qiáng)、產(chǎn)量高、品質(zhì)好的雙孢蘑菇優(yōu)良菌株 嚴(yán)重的阻礙了雙孢蘑菇產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，因此，收集、馴化本土野生種質(zhì)資源是解決菌株具有更 強(qiáng)的抗逆性與抗病性能的可靠途徑之一，對(duì)于保護(hù)物種多樣性，對(duì)保證雙孢蘑菇產(chǎn)業(yè)健康 發(fā)展將具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種高寒草甸野生雙孢蘑菇菌株及其子實(shí)體 栽培方法。
[0005] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題采用的技術(shù)方案是：
[0006] 青海省地處青藏高原，高寒、缺氧、干旱，氣候環(huán)境惡劣，本發(fā)明高寒草甸野生雙孢 蘑菇菌株是從青海省青海湖區(qū)域高原草甸采樣野生菌新鮮標(biāo)本，經(jīng)分離篩選、培養(yǎng)和馴化 而成，該菌株命名為青海野生雙孢蘑菇菌株-1，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì) 普通微生物中心（CGMCC)，其簡稱為CGMCC，地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)（郵 編：100101)，保藏編號(hào)為CGMCC NO : 10322,保藏日期為2015年1月12日，分類命名：雙孢 蘑葫 Agaricus bisporus。
[0007] 本發(fā)明之青海野生雙孢蘑菇菌株-1在作為親本進(jìn)行雜交育種中的應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明之一種高寒草甸野生雙孢蘑菇子實(shí)體，由青海野生雙孢蘑菇菌株-1栽培 得到。青海野生雙孢蘑菇菌株-1是雙孢蘑菇一個(gè)菌株，其栽培方法與常規(guī)雙孢蘑菇栽培方 法相似，栽培方法可采用以下三種方法得到，（1)糞草發(fā)酵料栽培；(2)棉籽殼發(fā)酵料袋料 栽培；（3)原生態(tài)人工繁育。
[0009] 本發(fā)明之一種高寒草甸野生雙孢蘑菇子實(shí)體在食品加工的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明之一種高寒草甸野生雙孢蘑菇菌絲體，由高寒草甸野生雙孢蘑菇菌株培養(yǎng) 得到。
[0011] 本發(fā)明之青海野生雙孢蘑菇菌株-1的子實(shí)體菌肉緊密、抗逆性強(qiáng)，整個(gè)生育期及 采收期內(nèi)未見病蟲害發(fā)生，與原生態(tài)人工繁育第二年子實(shí)體發(fā)生量對(duì)比，人工培育草原1 號(hào)菌絲體存活越冬能力強(qiáng)，適于原生態(tài)種源恢復(fù)繁育。實(shí)踐證明，青海野生雙孢蘑菇菌株-1 子實(shí)體蛋白質(zhì)、粗纖維、灰分、鈣明顯高于國內(nèi)雙孢蘑菇2796菌株，是一種蛋白質(zhì)含量較高 的優(yōu)質(zhì)食用菌，而脂肪為僅為I. 16g，顯著低于2796菌株3. 6g，而且青海野生雙孢蘑菇菌 株-1子實(shí)體營養(yǎng)成分中還含有豐富的人體必需的Se、Fe、Zn等微量元素。
【附圖說明】
[0012] 圖1為人工栽培的青海野生雙孢蘑菇子實(shí)體。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步加以說明。
[0014] 實(shí)施例1 :高寒草甸野生雙孢蘑菇菌株的分離及其鑒定
[0015] 1、高寒草甸野生雙孢蘑菇菌株的分離：從青海省青海湖區(qū)域高原草甸采樣野生菌 新鮮樣品，采用組織分離法進(jìn)行現(xiàn)場分離，經(jīng)培養(yǎng)得到一株野生蘑菇，制作新鮮標(biāo)本。
[0016] 2、菌絲體形態(tài)特征
[0017] 通過對(duì)青海野生雙孢蘑菇菌株-1的形態(tài)、分布適宜環(huán)境等特征觀察，溫度梯度、 酸堿度梯度試驗(yàn)，篩選出菌絲體生長的最佳培養(yǎng)基是⑥號(hào)黃豆芽培養(yǎng)基，菌絲體生長的最 適pH為pH9,在5°C條件下菌絲體萌發(fā)速度非常緩慢，但能存活，在KTC~30°C下菌絲體能 生長，適宜的生長溫度為20~25 °C。
[0018] 3、子實(shí)體形態(tài)特征
[0019] 子實(shí)體中等大小，單生或叢生，菌蓋直徑7~15cm，初期半球形，后平展，白色，有 鱗片；人工栽培條件下鱗片少或無，光滑，漸變?yōu)榈埸S色，菌蓋白色至淡黃色，表面光滑 或有淡黃色鱗片，菌蓋幼時(shí)為半球形，成熟后平展，邊緣初期內(nèi)卷，菌蓋厚1. 5~2. Icm ;菌 肉白色，傷后變成淡紅色，菌褶初為粉紅色，后變褐色或深褐色，離生、密，不等長；菌柄高 4. 5~9cm，直徑L 5~3. 5cm，近圓形，白色，光滑，內(nèi)部中實(shí)；菌環(huán)白色，膜質(zhì)，較厚，單層， 生于菌柄中部，易脫落；孢子褐色，光滑，1擔(dān)子或2擔(dān)子，孢子橢圓形，光滑，褐色，大小為 (6~8. 5) X (5~6)，孢子印深褐色，鮮菇具有濃郁的蘑菇特殊的香味，其形態(tài)特征與雙孢 蘑菇相近。
[0020] 3、分子生物生化分析
[0021] 青海野生雙孢蘑菇菌株-1由浙江大學(xué)和上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司，采用 分子ITS測序方法分析其基因序列特征和進(jìn)化特性，對(duì)青海野生雙孢蘑菇菌株-1進(jìn)行分子 生物學(xué)鑒定，通過采用真菌基因組DNA抽提、電泳檢測、PCR擴(kuò)增等方法，青海野生雙孢蘑菇 菌株-1與雙孢蘑菇相似度極高，同源性達(dá)到99%以上。
[0022] 由此，根據(jù)形態(tài)、生理特征鑒定及分子生物生化分析初步鑒定該野生蘑菇屬真菌 門、擔(dān)子菌亞門，擔(dān)子菌綱、傘菌目、傘菌科，蘑葫屬，雙孢蘑葫（Agaricus bisporus (Lange) Sing.) 〇
[0023] 4、生態(tài)環(huán)境
[0024] 本研宄中供試材料采自海拔3500m的青海省青海湖地區(qū)，境內(nèi)有野生雙孢蘑菇分 布，且周邊無人工栽培雙孢蘑菇的草原及山區(qū)，發(fā)生采集地剛察縣高寒草甸人煙稀少，從而 最大程度排除材料受人工栽培種質(zhì)漂移的可能性。野生蘑菇發(fā)生期一般在夏季7~9月， 該野生菇采集時(shí)間為2011年7月29日。
[0025] 5、出葫結(jié)驗(yàn)證
[0026] 將組織分離的野生菌株進(jìn)行栽培試驗(yàn)，在經(jīng)一次發(fā)酵的糞草培養(yǎng)料上，菌絲可萌 發(fā)、吃料較慢，爬土較慢，扭結(jié)較少，結(jié)菇偏遲，第一潮出菇呈典型叢狀，產(chǎn)量偏低。子實(shí)體呈 米白色、有鱗片，菌蓋較平、中部微凹，菌柄直徑正常，有膜狀菌環(huán)，菌褶色較深，見圖1。 [0027] 綜上所述，根據(jù)形態(tài)、生理特征、分子生物生化分析初步鑒定及出菇驗(yàn)證，該野生 蘑菇確定為雙孢蘑菇野生菌株，命名為青海野生雙孢蘑菇菌株-1。
[0028] 實(shí)施例2 :高寒草甸野生雙孢蘑菇與雙孢蘑菇As2796比較分析
[0029] 表1-人工栽培青海野生雙孢蘑菇菌株-1與雙孢蘑菇As2796子實(shí)體營養(yǎng)成分對(duì) 照表
[0030] g/100gdw
[0031]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種高寒草甸野生雙孢蘑菇菌株，其特征在于，所述野生雙孢蘑菇菌株為青海野生 雙孢蘑菇菌株-1，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心（CGMCC)，其 簡稱為CGMCC，地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)（郵編：100101)，保藏編號(hào)為CGMCC NO: 10322,保藏日期為2015年1月12日，分類命名：雙孢蘑菇Agaricusbisporus。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的高寒草甸野生雙孢蘑菇菌株在作為親本進(jìn)行雜交育種中的 應(yīng)用。
3. -種高寒草甸野生雙孢蘑菇子實(shí)體，其特征在于，由權(quán)利要求1所述野生雙孢蘑菇 菌株栽培得到。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的高寒草甸野生雙孢蘑菇子實(shí)體在食品加工的應(yīng)用。
5. -種高寒草甸野生雙孢蘑菇菌絲體，其特征在于，由權(quán)利要求1所述野生雙孢蘑菇 菌株培養(yǎng)得到。
【專利摘要】一種高寒草甸野生雙孢蘑菇菌株及其子實(shí)體栽培方法，所述野生雙孢蘑菇菌株命名為青海野生雙孢蘑菇菌株-1，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)，其簡稱為CGMCC，地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)(郵編：100101)，保藏編號(hào)為CGMCC NO：10322，保藏日期為2015年1月12日，分類命名：雙孢蘑菇Agaricus bisporus。本發(fā)明之青海野生雙孢蘑菇菌株-1的子實(shí)體菌肉緊密、抗逆性強(qiáng)，整個(gè)生育期及采收期內(nèi)未見病蟲害發(fā)生，與原生態(tài)人工繁育第二年子實(shí)體發(fā)生量對(duì)比，人工培育草原1號(hào)菌絲體存活越冬能力強(qiáng)，適于原生態(tài)種源恢復(fù)繁育。CGMCC No.1032220150112
【IPC分類】A01G1-04
【公開號(hào)】CN104813848
【申請?zhí)枴緾N201510227891
【發(fā)明人】高淑敏, 劉海林, 彭秀科, 徐鴻雁, 羅春燕, 薛鳳琴
【申請人】高淑敏
【公開日】2015年8月5日
【申請日】2015年5月7日