組合物及其應(yīng)用、紅細(xì)胞凍存制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別涉及組合物及其應(yīng)用、紅細(xì)胞凍存制劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 紅細(xì)胞也稱紅血球，在常規(guī)化驗(yàn)英文?？s寫(xiě)成RBC，是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì) 胞，同時(shí)也是脊椎動(dòng)物體內(nèi)通過(guò)血液運(yùn)送氧氣的最主要的媒介，同時(shí)還具有免疫功能。哺乳 動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞是無(wú)核的，這意味著它們失去了DNA。
[0003] 紅細(xì)胞含有血紅素（hemoglobin)，其具有緩沖的作用。血紅素十分活躍，它既能和 氧結(jié)合在一起，也能和二氧化碳結(jié)合。因此，其主要工作為運(yùn)輸氧和二氧化碳。紅細(xì)胞的功 能是運(yùn)輸氧，二氧化碳，電解質(zhì)，葡萄糖以及氨基酸這些人體新陳代謝所必須的物質(zhì)。此外 還在酸堿平衡中起一定的緩沖作用。這兩項(xiàng)功能都是通過(guò)紅細(xì)胞中的血紅蛋白來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
[0004] 紅細(xì)胞通過(guò)血紅蛋白運(yùn)送氧氣，紅細(xì)胞的90%由血紅蛋白組成。血紅蛋白是一種 紅細(xì)胞相關(guān)的化合物肌紅蛋白，在肌肉細(xì)胞中存儲(chǔ)氧氣。血紅蛋白Olb)由珠蛋白和亞鐵血 紅素結(jié)合而成。血液呈現(xiàn)紅色就是因?yàn)槠渲泻衼嗚F血紅素的緣故。它可以在肺部或腮部 臨時(shí)與氧氣分子結(jié)合，該分子中的Fe2+在氧分壓高時(shí)，與氧結(jié)合形成氧合血紅蛋白（HbO2); 在氧分壓低時(shí)，又與氧解離，身體的組織中釋放出氧氣，成為還原血紅蛋白，由此實(shí)現(xiàn)運(yùn)輸 氧的功能。血紅蛋白也可以運(yùn)送由機(jī)體產(chǎn)生的二氧化碳（不到氧氣總量的2%，更多的二氧 化碳由血漿解決）。血紅蛋白中Fe2+如氧化成Fe3 +，稱高鐵血紅蛋白，則喪失攜帶氧氣的能 力。
[0005] 血細(xì)胞的長(zhǎng)期保存有著重要的臨床意義及戰(zhàn)略意義，如成份輸血、自體輸血、稀有 血液的保存、戰(zhàn)爭(zhēng)狀態(tài)及遠(yuǎn)航備血等。近年來(lái)，紅細(xì)胞超低溫儲(chǔ)存越來(lái)越受到重視。但目前 紅細(xì)胞儲(chǔ)存仍然采用傳統(tǒng)的凍存液配方，如胎牛血清聯(lián)合培養(yǎng)基，而紅細(xì)胞膜比普通的細(xì) 胞更脆，更容易受到超低溫的損害，故改良凍存液配方，是提高紅細(xì)胞凍存的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
[0006] 此外，傳統(tǒng)的凍存液均含有胎牛血清（FBS)，而FBS源于動(dòng)物，可能含有動(dòng)物源性 病原體，這降低了凍存的紅細(xì)胞在臨床上應(yīng)用的安全性，為此，急需改進(jìn)凍存液配方，去除 FBS0

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 有鑒于此，本發(fā)明提供一種組合物及其應(yīng)用、紅細(xì)胞凍存制劑及其制備方法。本發(fā) 明的目的是提供一種不含F(xiàn)BS的凍存液配方，在提高安全性的同時(shí)，亦提高紅細(xì)胞凍存的 效果。
[0008] 為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：
[0009] 本發(fā)明提供了一種組合物，包括DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基、DMS0、右旋糖酐40、白蛋白 和紅細(xì)胞保存液Fetuin。
[0010] Fetuin:用DMEM/F12培養(yǎng)基溶解，配成lOOmg/ml的儲(chǔ)存液。
[0011] 右旋糖酐40原料為6 %右旋糖酐40-氯化鈉注射液（國(guó)森藥業(yè)），稀釋成1 %終濃 度。
[0012] 白蛋白原料為20%的白蛋白注射液（奧克特琺瑪藥劑生產(chǎn)有限公司）。
[0013] 在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述組合物包括：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物，其特征在于，包括DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基、DMSO、右旋糖酐40、白蛋白和 紅細(xì)胞保存液Fetuin。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述組合物包括： DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基 DMSO 終濃度為2~20% 右旋糖酐40 終濃度為0.5~5% 白蛋白 終濃度為0.5~5% 紅細(xì)胞保存液Fetuin 終濃度為0.丨~10 mg/'ml。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的組合物，其特征在于，所述組合物包括： DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基 DMSO 終濃度為5~18% 右旋糖酐40 終濃度為1~4% 白蛋曰 終濃度為丨~4% 紅細(xì)胞保存液Fetuin 終濃度為0.5~8 mg/m丨。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述的組合物，其特征在于，所述DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基 在所述組合物中的終濃度為70~93 %。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的組合物在制備紅細(xì)胞凍存劑中的應(yīng)用。
6. -種紅細(xì)胞凍存劑，其特征在于，包括如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的組合物。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的紅細(xì)胞凍存劑，其特征在于，其為紅細(xì)胞凍存液。
8. -種如權(quán)利要求7所述的紅細(xì)胞凍存劑的制備方法，其特征在于，取所述DMS0、所述 右旋糖酐40、所述白蛋白和所述紅細(xì)胞保存液Fetuin溶于所述DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
9. 一種紅細(xì)胞的凍存方法，其特征在于，采用如權(quán)利要求6或7所述的胎盤(pán)玻璃化凍存 劑保存所述紅細(xì)胞。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的凍存方法，其特征在于，取所述紅細(xì)胞離心，棄上清，與所述 紅細(xì)胞凍存劑混合，_80°C保存。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別涉及組合物及其應(yīng)用、紅細(xì)胞凍存制劑及其制備方法。該組合物包括DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基、DMSO、右旋糖酐40、白蛋白和紅細(xì)胞保存液Fetuin。本發(fā)明的紅細(xì)胞無(wú)血清凍存液不含胎牛血清，排除了動(dòng)物源性病原體的污染，并且明顯提高了紅細(xì)胞復(fù)蘇后的活力。
【IPC分類(lèi)】A01N1-02
【公開(kāi)號(hào)】CN104823967
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510288280
【發(fā)明人】陳海佳, 王一飛, 葛嘯虎, 吳子杰, 王小燕, 李平
【申請(qǐng)人】廣州賽萊拉干細(xì)胞科技股份有限公司
【公開(kāi)日】2015年8月12日
【申請(qǐng)日】2015年5月29日