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一種白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法

文檔序號:8516543閱讀:311來源:國知局
一種白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于食用菌工廠化栽培技術領域,具體的說涉及一種白色金針菇片段形 態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法。
【背景技術】
[0002] 目前國內白色金針菇菌種主要為固體菌種和球形的液體菌種。固體菌種的眾多缺 點已在淘汰的邊緣,而球形液體菌種有兩大缺陷,球形菌種的粒徑大,在接種操作時容易堵 住噴頭,對生產效率和員工士氣影響很大。球形菌種的菌絲含量偏低,有效菌絲量也偏少、 接種后萌發(fā)偏慢,整個栽培瓶發(fā)菌周期達到22天左右。相對傳統(tǒng)的固體菌種的栽培尚存在 優(yōu)勢,但是在集約化規(guī)模化的生產中已成瓶頸。

【發(fā)明內容】

[0003] 本發(fā)明旨在解決上述技術問題。
[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法。
[0005] 為解決上述技術問題,本發(fā)明公開一種白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方 法,包括如下步驟: 51. 分別配制接種培養(yǎng)基和轉接培養(yǎng)基; 52. 接種培養(yǎng)基和轉接培養(yǎng)基滅菌; 53. 液體母種處理; 54. 將S3處理后的液體母種接種至接種培養(yǎng)基進行培養(yǎng); 55. 步驟S4培養(yǎng)完成后,利用轉接培養(yǎng)基進行轉接培養(yǎng)。
[0006] 進一步的,步驟Sl所述接種培養(yǎng)基由如下組分組成:白糖30g/L,豆柏粉4g/L, MgSO4 0. 2~1.0 g/L,KH2PO4O. 2~I. 2g/L,消泡劑0. 3~0. 4ml/L,加水定容,配制液體培養(yǎng) 基;所述豆柏粉經過140目粉碎。
[0007] 作為進一步的優(yōu)選方案,步驟Sl所述轉接培養(yǎng)基由如下組分組成:豆柏粉0. 15% ~0· 35%、白砂糖 0· 15% ~0· 35%、MgSO4 0· 04% ~0· 09%、KH2PO4 0· 04% ~0· 09%、余量 為水,配制液體培養(yǎng)基;所述豆柏粉經過140目粉碎后用水溶解,所述白砂糖用熱水溶解, 所述MgSC^P KH 2P04用水溶解。
[0008] 作為進一步的優(yōu)選方案,步驟S2所述滅菌是將液體培養(yǎng)基(接種培養(yǎng)基和轉接培 養(yǎng)基)加入液體菌種培養(yǎng)罐內后,將培養(yǎng)罐推入滅菌鍋滅菌,溫度95~105 °C維持60min,再 溫度121~123°C維持80min。
[0009] 更進一步地,所述液體培養(yǎng)基滅菌完成后推進萬級冷卻室,冷卻到室溫。
[0010] 作為進一步的優(yōu)選方案,步驟S3所述液體母種處理是將挑選好的液體母種,放置 在磁力攪拌機上攪拌14~16分鐘后使用。
[0011] 作為進一步的優(yōu)選方案,步驟S4或步驟S5均是在百級層流罩下接種,然后推入 萬級培養(yǎng)室接無菌壓縮空氣培養(yǎng)6~9天,在培養(yǎng)期間控制培養(yǎng)溫度19~22°C,通氣壓力 I. 2 ~I. 8Mpa〇
[0012] 更近一步地,所述無菌壓縮空氣是由最小孔徑為0.0 lppm的過濾器所過濾,并由 冷凍式干燥機、吸附式干燥機除油除水的空氣。
[0013] 與現(xiàn)有技術相比,本發(fā)明技術方案的有益效果是: 1、液體菌種制備過程簡單,操作簡便。
[0014] 2、菌絲形態(tài)大部分為極小片段,接種時很少堵噴頭,能滲透至培養(yǎng)基內部。
[0015] 3、接種后菌絲活性高,萌發(fā)快,整個發(fā)菌周期短。
[0016] 4、應用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)金針菇液體菌種,發(fā)菌時間只需16~18天,比球形 菌種縮短4~6天。
【具體實施方式】
[0017] 下面結合實施例對本發(fā)明的作進一步的說明。但本發(fā)明的實施方式并不因此限定 于以下實施例。除非特別說明,本發(fā)明采用的材料和加工方法為本技術領域常用材料和加 工方法。
[0018] 一種白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法,包括如下步驟: 51. 培養(yǎng)基配制; 52. 培養(yǎng)基滅菌; 53. 液體母種處理; 54. 接種; 55. 轉接培養(yǎng)。
[0019] 步驟Sl中進行培養(yǎng)基配制包括以下步驟: Sl 1.接種培養(yǎng)基配制; S12.轉接培養(yǎng)基配制。
[0020] 首先,步驟Sll中接種培養(yǎng)基配制包括以下步驟:豆柏粉過140目的粉碎機粉碎, 按以下比例:白糖30g/L,豆柏粉4g/L,MgS04 0· 2~I. 0g/L,KH2P04 0· 2~I. 2g/L,消泡劑 150~200ml/500L,加水定容,配制液體培養(yǎng)基。
[0021] 步驟S12中轉接培養(yǎng)基配制包括以下步驟:豆柏粉過140目的粉碎機粉碎后用 水溶解,白糖用熱水溶解,硫酸鎂和磷酸二氫鉀用水溶解后,按以下重量比例:豆柏粉〇. 15% ~0· 35%、白砂糖 0· 15% ~0· 35%、MgS04 0 . 04% ~0· 09%、KH2P04 0· 04% ~0· 09%、余量 為水,配制液體培養(yǎng)基。
[0022] 其次,步驟S2中將液體培養(yǎng)基加入液體菌種培養(yǎng)罐內后,將培養(yǎng)罐推入滅菌鍋滅 菌,溫度95~105°C維持60min,溫度121~123°C維持80min。滅菌完成后推進萬級冷卻 室,冷卻到室溫。
[0023] 再次,步驟S3中將挑選好的液體母種,放置在磁力攪拌機上攪拌14~16分鐘后 使用。
[0024] 最后,步驟S4、S5在百級層流罩下接種,然后推入萬級培養(yǎng)室接無菌壓縮空氣培 養(yǎng)6~9天,在培養(yǎng)期間控制培養(yǎng)溫度19~22°C,通氣壓力1. 2~I. 8Mpa。無菌壓縮空氣 是由最小孔徑為〇. Olppm的過濾器所過濾,并由冷凍式干燥機、吸附式干燥機除油除水的 空氣。
[0025] 本發(fā)明實施例所采用的供試菌種,白色金針葫(F. var. velutipes.)母種為電白中 茂生物技術有限公司佛山三水分公司的W14。
[0026] 接種培養(yǎng)基包括:白糖 30g/L、豆柏粉4g/L、MgS04 0· 2-1. 0g/L,KH2P04 0· 2-1. 2g/ L,其余為水。并放入磁力攪拌器轉子1枚,規(guī)格為長35mm,寬8mm。IL刻度三角瓶裝液量為 600ml。滅菌后接入8塊2mm左右試管斜面原種,將其放入22°C、轉速為150轉/分搖床中 培養(yǎng)9天。
[0027] 轉接培養(yǎng)基配制: ① 將白糖放入容器中加 IOL水,攪拌使其溶解; ② 加入MgSOjP KH 2P04并使其溶解; ③ 將豆栢粉經過120目篩子過濾,然后加入上述溶液中,使其充分分散在水中定容。
[0028] ④將上述液體通過40目的不銹鋼篩過濾,倒入發(fā)酵罐,加入消泡劑200ml ;加水 將配制好的培養(yǎng)基倒入發(fā)酵罐中,121°C高壓蒸汽滅菌,待其溫度冷卻至85°C以下時,將發(fā) 酵罐推出,通入無菌空氣,壓力為1.2~1.8兆帕,并在罐體上放置一水淋以迅速冷卻罐體, 當罐體溫度冷卻至25°C以下時即可接液體母種。
[0029] 其中,發(fā)酵罐培養(yǎng)溫度為21°C,通氣壓力為1. 2兆帕,液體母種培養(yǎng)8天后測量菌 絲含量、菌球密度與直徑。
[0030] 菌絲含量的測定:將培養(yǎng)好的發(fā)酵罐出料口打開倒出菌絲,分別在上中下三層用 三角瓶取250ml菌液,菌絲放置磁力攪拌機上攪拌10分鐘,量取IOml菌液進行3500r/m離 心分離,倒掉上清液,稱量菌絲重量。
[0031] 下表為對發(fā)酵罐液體菌種的菌絲含量、菌球密度、菌體粒徑的測量結果:
【主權項】
1. 一種白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法,其特征在于,包括如下步驟:
51. 分別配制接種培養(yǎng)基和轉接培養(yǎng)基;
52. 接種培養(yǎng)基和轉接培養(yǎng)基滅菌;
53. 液體母種處理;
54. 將S3處理后的液體母種接種至接種培養(yǎng)基進行培養(yǎng);
55. 步驟S4培養(yǎng)完成后,利用轉接培養(yǎng)基進行轉接培養(yǎng)。
2. 根據(jù)權利要求1所述的白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法,其特征在于,步 驟Sl所述接種培養(yǎng)基由如下組分組成:白糖30g/L,豆柏粉4g/L,MgSO4 0. 2~I.Og/L, KH2PO4O. 2~I. 2g/L,消泡劑0? 3~0? 4ml/L,加水定容;所述豆柏粉經過140目粉碎。
3. 根據(jù)權利要求1所述的白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法,其特征在于,步 驟Sl所述轉接培養(yǎng)基由如下組分組成:豆柏粉0. 15%~0. 35%、白砂糖0. 15%~0. 35%、 MgSO4 0? 04% ~0? 09%、KH2PO4 0? 04% ~0? 09%、余量為水; 所述豆柏粉經過140目粉碎后用水溶解,所述白砂糖用熱水溶解,所述MgSOjPKH2PO4 用水溶解。
4. 根據(jù)權利要求1所述的白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法,其特征在于,步 驟S2所述滅菌是將接種培養(yǎng)基和轉接培養(yǎng)基在95~105°C維持60min,再121~123°C維 持 80min。
5. 根據(jù)權利要求4所述的白色金針菇液體菌種的制備方法,其特征在于,所述滅菌完 成后冷卻到室溫。
6. 根據(jù)權利要求1所述的白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法,其特征在于,步 驟S3所述液體母種處理是將挑選的液體母種,放置在磁力攪拌機上攪拌14~16分鐘后使 用。
7. 根據(jù)權利要求1所述的白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法,其特征在于,步 驟S4或步驟S5是在百級層流罩下接種,然后推入萬級培養(yǎng)室接無菌壓縮空氣培養(yǎng)6~9 天,在培養(yǎng)期間控制培養(yǎng)溫度19~22°C,通氣壓力1. 2~I. 8Mpa。
8. 根據(jù)權利要求7所述的白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法,其特征在于,所 述無菌壓縮空氣是由最小孔徑為0.Olppm的過濾器所過濾,并由冷凍式干燥機、吸附式干 燥機除油除水的空氣。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種白色金針菇片段形態(tài)液體菌種的培養(yǎng)方法,包括:培養(yǎng)基配制、培養(yǎng)基滅菌、液體母種處理、接種、轉接培養(yǎng)。將挑選好的液體母種,放置在磁力攪拌機上攪拌14~16分鐘后,在百級層流罩下接種,然后推入萬級培養(yǎng)室接無菌壓縮空氣培養(yǎng)6~9天,在培養(yǎng)期間控制培養(yǎng)溫度19~22℃,通氣壓力1.2~1.8Mpa。本發(fā)明技術方案的有益效果是:液體菌種制備過程簡單,操作簡便。菌絲形態(tài)大部分為極小片段,能滲透至培養(yǎng)基內部,接種時很少堵噴頭。接種后菌絲活性高,萌發(fā)快,整個發(fā)菌周期短。應用本發(fā)明的培養(yǎng)基培養(yǎng)金針菇液體菌種,發(fā)菌時間只需16~18天,比球形菌種縮短4~6天。
【IPC分類】A01G1-04
【公開號】CN104838894
【申請?zhí)枴緾N201510301673
【發(fā)明人】程加兵
【申請人】電白中茂生物科技有限公司
【公開日】2015年8月19日
【申請日】2015年6月5日
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