一種獲得紫色芥藍的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物育種領(lǐng)域，涉及一種獲得紫色芥藍的方法，具體涉及一種利用甘 藍紫陽和中花芥藍獲得紫色芥藍的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 芥藍（Brassica alboglabra Bailey)為十字花科、蕓薹屬、甘藍種一年生或兩年 生草本植物，原產(chǎn)于中國華南地區(qū)，是我國著名的特產(chǎn)蔬菜之一。芥藍按其花瓣顏色可分為 白花芥藍和黃花芥藍，前者主要分布在廣東省，后者主要分布在福建省和廣西壯族自治區(qū)。
[0003] 芥藍營養(yǎng)豐富，富含硫代葡萄糖苷，尤其是4-甲基硫氧丁基硫苷，硫苷的降解產(chǎn) 物蘿卜硫素是迄今為止在蔬菜中發(fā)現(xiàn)的最強烈的Phase II酶誘導劑，它能使致癌基因失 去作用。芥藍中蘿卜硫素含量為80. 4~278. 6 μm〇l/100gFW，遠高于其它種類的十字花科 蔬菜，如青花菜中蘿卜硫素含量為28. 9~88. 3 μm〇l/100gFW，紫甘藍中蘿卜硫素含量為 46. 7~66. 9 μm〇l/100gFW。因此，芥藍在品質(zhì)育種、蘿卜硫素的提取及食品加工業(yè)等領(lǐng)域 有著重要的研宄價值。
[0004] 芥藍栽培歷史悠久，以幼嫩肉質(zhì)莖或肉質(zhì)莖和嫩葉或葉片為食用器官，其中大多 數(shù)品種以肉質(zhì)莖和葉為重要的食用器官。芥藍DUS測試指南中對芥藍肉質(zhì)莖的判定標準 為依據(jù)花青苷顯色的有無分成兩類，其中花青苷顯色則肉質(zhì)莖顏色為紫色、紅色、粉色等顏 色，花青苷無顯色則肉質(zhì)莖顏色為綠色；進一步依據(jù)肉質(zhì)莖花青苷顯色強度，可分為淺、中 和深三個等級。肉質(zhì)莖顯色的芥藍中含有花青素，花青素為水溶性色素，在自然條件下不能 穩(wěn)定存在，常結(jié)合一個或多個糖苷形成花青苷?；ㄇ嘬帐侵匾狞S酮類次生代謝產(chǎn)物，能引 起部分蕓薹屬植物的葉片、花薹或根莖呈現(xiàn)粉色、紅色、紫色和藍色等顏色?；ㄇ嘬赵谥参?細胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成，然后運輸?shù)揭号葜蟹e累，并具有多種生理功能，例如吸引昆蟲傳粉、 抵御低溫和紫外線傷害、以及防治植物病害等；同時花青苷也具有非常重要的醫(yī)療保健功 能，例如抗氧化衰老、抗突變、抗癌、抗動脈硬化、減少夜盲和近視、防止神經(jīng)紊亂、防止老年 癡呆癥及增強機體免疫力等?；ㄇ嗨厥瞧駷橹顾l(fā)現(xiàn)的最強效的自由基清除劑，其抗自 由基氧化能力是Vc的20倍、Ve的50倍，并且對光、熱、氧等穩(wěn)定性好；此外，花青素還是一 種安全、無毒的天然食用色素。因此，花青素在園藝、醫(yī)藥、化妝、食品等方面具有一定的應(yīng) 用潛力和研宄價值?，F(xiàn)有肉質(zhì)莖花青苷顯色的芥藍，如紅腳芥藍、改良紅芥藍薹等，肉質(zhì)莖 花青苷顯色強度淺，難以在芥藍育種中直接利用。如何獲得花青苷含量較高和/或肉質(zhì)莖 和/或葉脈花青苷顯色強度深的芥藍資源或品系，成為一個亟待解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是改良現(xiàn)有芥藍資源，為芥藍育種提供一種新的技術(shù)路 線。
[0006] 本發(fā)明提供了一種獲得紫色芥藍的方法，包括下述步驟：
[0007] (1)甘藍和芥藍雜交，獲得雜交F1代；
[0008] (2)以所述芥藍為輪回親本與雜交F1代連續(xù)回交，獲得回交后代BCnF 1;
[0009] (3)在回交后代BCnF1中選擇肉質(zhì)莖、葉脈和葉片均有花青苷顯色的芥藍單株；
[0010] (4)將步驟（3)選擇的單株進行單株自交，獲得具有優(yōu)良性狀的紫色芥藍；
[0011] 所述優(yōu)良性狀為（a)、（b)、（c)、（d)、（e)或（f) : (a)肉質(zhì)莖和葉脈均具有花青苷 顯色的性狀；(b)肉質(zhì)莖和葉脈均具有花青苷顯色的性狀且總花青苷含量高于步驟（1)中 作為親本的芥藍；（c)肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的性狀；（d)肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的性狀且 總花青苷含量高于步驟（1)中作為親本的芥藍；（e)葉脈具有花青苷顯色的性狀；（f)葉脈 具有花青苷顯色的性狀且總花青苷含量高于步驟（1)中作為親本的芥藍。
[0012] 上述選育方法中，所述步驟（1)中，甘藍和芥藍雜交具體可為以甘藍為父本，以芥 藍為母本進行雜交。
[0013] 上述選育方法中，所述甘藍可為葉片為紫色的甘藍。進一步，紫色甘藍品種具體可 為紫陽甘藍。
[0014] 上述選育方法中，所述芥藍可為肉質(zhì)莖、葉脈和葉片均無花青苷顯色的芥藍品種。 進一步，肉質(zhì)莖、葉脈和葉片均無花青苷顯色的芥藍品種具體可為中花芥藍。
[0015] 上述選育方法中，所述連續(xù)回交為回交5代以上。進一步，連續(xù)回交次數(shù)具體為8 次。
[0016] 上述選育方法中，所述"以所述芥藍為輪回親本與雜交F1代連續(xù)回交，獲得回交后 代 BCnF1"為：
[0017] ①將肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的步驟（1)得到的雜交F1代作為母本，與作為父本的 中花芥藍回交，收獲種子，即為BC 1F1;
[0018] ②將肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的BC1F1作為母本，與作為父本的中花芥藍回交，收獲 種子，即為BC 2F1;
[0019] ③將肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的BC2F1作為母本，與作為父本的中花芥藍回交，收獲 種子，即為BC 3F1;
[0020] ④將肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的BC3F1作為母本，與作為父本的中花芥藍回交，收獲 種子，即為BC 4F1;
[0021] ⑤將肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的BC4F1作為母本，與作為父本的中花芥藍回交，收獲 種子，即為BC 5F1;
[0022] ⑥將肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的BC5F1作為母本，與作為父本的中花芥藍回交，收獲 種子，即為BC 6F1;
[0023] ⑦將肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的BC6F1作為母本，與作為父本的中花芥藍回交，收獲 種子，即為BC 7F1;
[0024] ⑧將肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的BC7F1作為母本，與作為父本的中花芥藍回交，收獲 種子，即為BC 8Fiq
[0025] 所述具有優(yōu)良性狀的紫色芥藍為總花青苷含量為3. 415~22. 038mg/100g鮮重的 芥藍。
[0026] 所述肉質(zhì)莖花青苷顯色為肉質(zhì)莖花青苷顯色強度深。
[0027] 所述葉脈花青苷顯色為葉脈花青苷顯色強度深。
[0028] 以上任一所述方法在芥藍育種中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0029] 上述應(yīng)用中，所述芥藍育種可為將上述方法得到的紫色芥藍作為親本，與其他品 種的芥藍進行雜交和回交，得到具有所述其他品種的芥藍的遺傳背景的紫色芥藍。
[0030] 所述其他品種的芥藍具體可為黃花甜脆芥藍、新加坡芥藍王、漢春早筷芥藍、換頭 香菇芥藍或漢春中筷芥藍。
[0031] 上述應(yīng)用中，由于上述方法得到的紫色芥藍和輪回親本同為芥藍，因此，上述回交 轉(zhuǎn)育過程中，回交代數(shù)可以縮短，主要依據(jù)回交后代與輪回親本性狀的相似程度而定。
[0032] 上述應(yīng)用中，所述回交次數(shù)可為回交3代以上。進一步，連續(xù)回交次數(shù)具體為8次。
[0033] 所述總花青苷含量具體可為地上部分總花青苷含量。
[0034] 實驗證明，利用本發(fā)明提供的獲得芥藍的方法，我們得到的6個芥藍中肉質(zhì)莖和 葉脈花青苷顯色強度深，總花青苷含量在3. 415~22. 038mg/100g FW之間。與作為親本的 中花芥藍品種相比，總花青苷含量高且肉質(zhì)莖和葉脈花青苷顯色強度深。利用本發(fā)明提供 的獲得芥藍的方法獲得的14M9-91培育的雜交種14M8-317和14M8-320的肉質(zhì)莖、葉脈花 青苷顯色強度深，花青苷含量高，說明雜交種能夠保持其高花青苷含量和肉質(zhì)莖花青苷顯 色強度深等性狀的穩(wěn)定遺傳。
【附圖說明】
[0035] 圖1為選育紫色芥藍的技術(shù)路線。
[0036] 圖2為14M9-91的植株表型。
[0037] 圖3為14M8-317的植株生長表型。
[0038] 圖4為14M8-320的植株群體生長狀態(tài)。
【具體實施方式】
[0039] 下面結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡 明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
[0040] 下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0041] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0042] 本實施例中的定量實驗，如無特殊說明均設(shè)置三次重復，結(jié)果取平均值。
[0043] 甘藍紫陽為大連米可多國際種苗有限公司產(chǎn)品，下文中簡稱紫陽。臺選中花芥藍 為廣州市興田種子有限公司產(chǎn)品，下文中簡稱中花芥藍。
[0044] 本實施例中肉質(zhì)莖花青苷顯色有無及顯色強度結(jié)果參照芥藍DUS測試指南 (2013) (http://www. cnpvp. cn/dus/index. aspx ? ID = 77)進行評價。
[0045] 本實施例中所述粗菜薹為芥藍成體肉質(zhì)莖的橫徑在2. 5cm以上（不含2. 5cm)，所 述中等菜薹為芥藍成體肉質(zhì)莖的橫徑在I. 5cm~2. 5cm(含I. 5cm和2. 5cm)，所述細菜薹為 芥藍成體肉質(zhì)莖的橫徑在I. 5cm以下（不含I. 5cm)。
[0046] 總花青苷含量的測定采用pH示差法，具體見參考文獻：楊兆艷.pH示差法測定桑 椹紅色素中花青素含量的研宄.食品科技，2007(4) :201-203。下述實施例中所述總花青苷 含量具體為地上部分總花青苷含量。
[0047] 下述實施例中的特性性狀I(lǐng)為：肉質(zhì)莖、葉脈和葉片均具有花青苷顯色的性狀。
[0048] 下述實施例中的特定性狀I(lǐng)I為：肉質(zhì)莖和葉脈均具有花青苷顯色的性狀。
[0049] 實施例1、獲得紫色芥藍的技術(shù)路線
[0050] 1、將紫陽（父本）與中花芥藍（母本）雜交，收獲種子，即為雜交的F1R，命名為 紫陽-芥藍Fp
[0051] 2、將紫陽-芥藍F1 (母本）與中花芥藍（父本）回交，收獲種子，即為BC1Fp
[0052] 3、將肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的BC1F1 (母本）與中花芥藍（父本）回交，收獲種子， 即為BC2F^
[0053] 4、將肉質(zhì)莖具有花青苷顯色的BC2F1 (母本）與中花